오염 물질의 혼합물에 의한 환경 및 인간 노출을 결정하는 화학계 (EXPOSO-METER)

샘플 크기 결정

연구 프로젝트인 EXPOSO-METER는 대규모 코호트 연구를 목표로 하는 것이 아니라 향후 작업의 기반이 될 개념 증명 파일럿 연구를 목표로 합니다. 따라서 샘플 크기를 결정하기 위해 두 가지 접근 방식을 따랐습니다.

1. 유사한 연구에 대한 문헌 검토를 기반으로 고급 저널에서 밀접하게 일치하는 예를 확인했습니다. 2개의 독일 도시에서 온 총 16명의 개인과 함께 작업했습니다(서로 다른 조직, 총 88개 샘플). EXPOSO-METER의 작업은 이 연구 참가자 수를 훨씬 초과할 것입니다. 또한, 미국, 유럽 및 한국의 뚜렷한 라이프스타일과 노출 조건으로 인해 3개의 글로벌 지역에서 뚜렷한 대규모 차이가 나타날 것으로 예상됩니다.
2. Cochran의 공식 [n= (Z^2 p(1-p))/e^2]이 샘플 크기 계산에 적용되었습니다: 90% 신뢰 수준(Z=1.645), 최대 가변성(50%, 즉, p=0.5) 및 +/-10% 정밀도(e=0.1), 최소 샘플 크기 68명의 참가자를 렌더링합니다.

종합 결과 따라서 최소 표본 크기는 지역당 50명의 연구 참여자이며 지역당 100명의 연구 참여자가 이상적입니다.

샘플 수집

다음과 같은 연구 참가자 분포를 대상으로 합니다: 30-40세의 여성 25명과 남성 25명, 그리고 각 연령대의 여성 5명과 남성 5명: 20-30, 40-50, 50-60, 60-70 , 70-80년. 다음 샘플이 수집됩니다: (1) 하복부에서 절제된 피하 지질 2-20g, 고유 샘플 식별 번호(ID)로 표시된 유리 바이알에 넣고 -20°C에 보관; (2) 착화제 에틸렌디아민테트라아세트산(EDTA)으로 채워진 튜브를 사용하여 5mL의 혈액을 ID로 표시하고 -20°C에 보관합니다. 또한, 연구 참여자는 ID로 표시될 참여자 설문지를 작성해야 합니다. 완료되면 샘플 세트는 UFZ 실험실로 배송됩니다.

UFZ에서 샘플 처리

지질 조직: 샘플을 해동하고 균질화한 다음 지질 함량을 측정합니다. (a) 수동 평형 샘플링: 실리콘 박막 샘플러를 샘플에 추가합니다. 실리콘 박막 샘플러는 적합한 크기와 두께의 의료용 실리콘 시트이며 에틸 아세테이트로 Soxhlet 추출을 사용하여 사전 세척됩니다. 약 후. 48시간(평형에 필요) 실리콘을 제거하고 표면을 철저히 세척한 다음 실리콘의 화학물질을 에틸 아세테이트로 추출합니다. (b) 전체 추출: 지질 조직의 하위 샘플은 다양한 용매 혼합물로 직접 추출됩니다. 두 접근 방식의 용매는 모두 증발되고 샘플은 다양한 컬럼을 통해 세척되며 화학 물질은 고분해능 질량 분석법(HRMS) 또는 탠덤 질량 분석법(MS/ 미시시피). 총 150 + 400개의 화학 물질이 두 가지 기술을 사용하여 스크리닝됩니다. 품질 보증/품질 관리를 위해 안정 동위 원소 표지 내부 표준 화합물이 사용됩니다. 결과는 지역 전체의 맥락에 맞게 설정되며 설문지의 데이터는 데이터 해석을 지원하는 데 사용됩니다.

혈액: 혈액 샘플은 위에서 설명한 접근 방식과 유사하게 현재 개발 중인 추출 절차에 제출되며 추출물은 위에서 설명한 대로 GC/LC-HRMS(또는 MS/MS)로 세척, 농축 및 분석됩니다.

가능한 확장

이 작업을 더 확장하기 위한 첫 번째 옵션으로 조사관은 UFZ에서 표적 모드로 정량화되는 광범위한 화학 물질 혼합물의 비표적 스크리닝을 탐색하는 것을 목표로 합니다. UFZ에서, EXPOSO-METER 협력을 통해 또는 기타 관련 프로젝트를 통해 연구할 관심 대상인 아직 확인되지 않은 화학 물질이 더 많을 수 있습니다. 다른 프로젝트의 경우 작업을 시작하기 전에 서면 동의를 구합니다.

두 번째 옵션으로 조사관은 인간 샘플에 존재하는 복잡한 화학 물질 배열에 의해 도출된 혼합 효과를 특성화하기 위해 생물 분석 도구(생물 검정)의 적용을 탐색하여 위에서 설명한 화학 프로파일링에 추가하는 데 관심을 가질 것입니다. 이는 UFZ에서, EXPOSO-METER 협력을 통해 또는 다른 향후 프로젝트를 통해 수행될 수 있습니다. 다른 프로젝트의 경우 작업을 시작하기 전에 서면 동의를 구합니다.