通过污染物混合物测定环境和人体暴露量的化学计 (EXPOSO-METER)

样本量的确定

研究项目 EXPOSO-METER 的目的不是进行大型队列研究，而是进行概念验证试点研究，该研究将构成未来工作的基础。 因此，采用两种方法来确定样本量：

1. 根据对类似研究的文献综述，找到了来自高水平期刊的密切匹配的例子。 它与来自德国两个城市的总共 16 个人（不同的组织，总共 88 个样本）进行了合作。 EXPOSO-METER 中的工作将远远超过该研究参与者的数量。 此外，由于美国、欧洲和韩国不同的生活方式和暴露条件，全球三个地区预计将出现明显的大规模差异。
2. 应用 Cochran 公式 [n= (Z^2 p(1-p))/e^2] 进行样本量计算：置信度为 90% (Z=1.645)， 最大变异性（50%，即 p=0.5）和 +/-10% 精度（e=0.1），它提供的最小样本量为 68 名参与者。

因此，综合结果，最小样本量为每个区域 50 名研究参与者，每个区域 100 名研究参与者是理想的。

样品采集

研究参与者的分布如下：30-40岁的25名女性和25名男性参与者，以及每个年龄组的5名女性和5名男性参与者：20-30、40-50、50-60、60-70 ，70-80岁。 收集以下样品：（1）从下腹切下的皮下脂质2-20g，放入标有唯一样品识别号（ID）的玻璃瓶中，并保存在-20℃下； (2) 使用装有络合剂乙二胺四乙酸 (EDTA) 的试管抽取 5 mL 血液，并标记 ID，并保存在 -20 °C 下。 此外，研究参与者还被要求填写参与者问卷，并贴上ID。 完成后，样品组将被运送到 UFZ 实验室。

UFZ 的样品处理

脂质组织：将样品解冻、匀浆并测定其脂质含量。 (a) 被动平衡取样：向样品中添加硅胶薄膜取样器，该取样器是具有合适尺寸和厚度的医用级硅胶片，并使用乙酸乙酯索氏提取进行预清洁。 大约之后。 48 小时（平衡所需），除去有机硅，彻底清洁其表面，并用乙酸乙酯萃取有机硅中的化学物质。 (b) 总提取：将用不同的溶剂混合物直接提取脂质组织的子样本。 两种方法中的溶剂都会被蒸发，样品通过一系列色谱柱进行清洁，并且通过气相/液相色谱 (GC/LC) 与高分辨率质谱 (HRMS) 或串联质谱 (MS/多发性硬化症）。 总共将使用这两种技术筛选 150 + 400 种化学品。 为了质量保证/质量控制，使用稳定同位素标记的内标化合物。 结果将结合各地区的背景，调查问卷中的数据将用于支持数据解释。

血液：血液样本将被提交至目前正在开发的提取程序，与上述方法类似，提取物经过GC/LC-HRMS（或MS/MS）进行清洁、浓缩和分析，如上所述。

可能的扩展

作为进一步扩展这项工作的第一个选择，研究人员的目标是探索对 UFZ 中以靶向模式定量的广泛化学混合物进行非靶向筛选。可能还有更多尚未确定的化学物质需要在 UFZ 通过 EXPOSO-METER 合作或其他相关项目进行研究。 对于其他项目，将在开始工作之前征求书面同意。

作为第二种选择，研究人员有兴趣通过探索生物分析工具（生物测定）的应用来表征人类样本中存在的复杂化学物质引起的混合效应，从而增加上述化学分析。 这可以在 UFZ 通过 EXPOSO-METER 合作或通过其他未来项目来完成。 对于其他项目，将在开始工作之前征求书面同意。