스웨덴 신체 활동 및 피트니스 종단 연구 (SPAF)

연구 자료: 연구자들은 인간 종단 코호트 연구 SPAF-1958의 2021~2022년 63세에 수행된 최신 데이터 수집을 완료했습니다. 1974년 기준선에서 스웨덴의 6개 지리적 영역이 체계적으로 선택되었습니다. 각 지역별로 한 개의 상위 중등학교가 무작위로 선정되었으며, 그 중 최하위 학년 학생 429명(남학생 224명, 여학생 205명)이 무작위로 선정되어 연구에 포함되었습니다. 전체 코호트는 16세, 34세, 52세 및 63세에 설문조사와 테스트를 위해 초대되었습니다. 데이터 수집: 설문지: 설문지에는 신체 활동, 식습관, 흡연, 음주와 같은 생활 방식 요인에 대한 질문이 포함되었습니다.

설문지에는 건강, 질병, 약물 치료 및 개인적 특성에 대한 질문도 포함되었습니다. 신체 성능 테스트: 유산소 능력, 근육 정적 및 동적 근력을 포함하여 16~63세의 모든 데이터 수집에서 신체 성능에 대한 일부 테스트가 사용되었습니다. 근육 약화와 관련된 근육 기능을 평가하는 특정 테스트가 63세에 테스트에 추가되었습니다. 표준 건강 변수 분석뿐만 아니라 내분비 프로필 및 염증 세포 프로필에 대한 확장된 연구를 위해 정맥혈을 채취했습니다. 다리에서 선택된 두 근육의 근육 크기를 초음파로 추정했습니다. 60명의 피험자를 대상으로 전신의 MR 영상을 촬영하여 신체 구성과 근육 크기를 측정했습니다. 신경학적 상태 테스트: 운동 신경 전도 연구(NCS)는 오른쪽 중앙 및 척골 신경과 경골 신경 및 비골 신경에 대해 양측으로 수행되었습니다. 감각 NCS는 우측 정중, 척골 및 표층 요골 신경에 시행되었고 양측에는 비복 신경 및 표층 비골 신경에 시행되었습니다. 운동 및 감각 전도 속도, 근위 및 원위 복합 근육 활동 전위(CMAP) 및 감각 신경 활동 전위(SNAP)가 기록되었습니다. 운동 단위 수 추정(MUNE)의 경우 m. 전경골근(TA) 및 m. ABP(abductorpolicies brevis)는 각각 정중 신경과 비골 신경의 전기 자극을 통해 테스트되었습니다. MUNE는 최대 CMAP의 크기를 평균 표면 기록 단일 운동 단위 전위(S-MUP)의 크기로 나누어 얻은 것입니다. MUNE=최대 CMAP(면적) / 평균 SMUP(면적). 소섬유 신경병증을 정의하기 위해 피부 생검을 수집하여 소섬유 표피 신경 분포의 밀도를 측정했습니다. m.의 Bergström 생검 바늘을 사용하여 골격근 샘플을 얻었습니다. Vastus lateralis는 액체 질소 냉각 이소펜탄에서 급속 냉동되어 -80°C에 보관되었습니다. 근육 생검에 많은 수의 신경근 전달 접합(종판)을 포함할 가능성을 최대화하기 위해 최적의 생검 부위는 전기 신경 자극에 대한 최대 연축 반응의 위치에 따라 결정되었습니다. 또한, 근섬유를 가능한 한 세로 방향으로 절단하기 위해 피부를 관통한 후 바늘의 방향을 바꾸었습니다. 이 접근법은 NMJ 분석 조건을 최적화하기 위해 선택되었습니다.

골격근 분석: 63세의 데이터 수집은 120개 근육 생검에 대한 형태학적 및 면역/효소-조직화학적 분석으로 완료됩니다. 축삭 및 운동 단위 완전성의 붕괴는 노화 동안 골격근의 소모 및 기능적 손상을 시작하고 촉진할 수 있습니다. 근력 손실에 대한 신경성 영향에 대한 우리의 가설을 테스트하기 위해 연구자들은 동일한 개인을 대상으로 27세와 63세의 골격근 생검을 검사하고 비교할 것입니다. 분석의 이 부분은 섬유 유형 전환(미오신 하위 유형), 섬유 크기의 변화 및 노화에 따른 섬유 유형의 클러스터링(신경 제거 후 재신경 분포의 징후)에 중점을 둘 것입니다. 63세의 생검을 위해 냉동 절편 후 근육 절편을 효소 조직화학, 조직학적 염색 및 면역조직화학을 사용하여 염색한 후 공초점 현미경 이미징을 실시합니다. 27세부터 코호트의 하위 그룹에서 사용할 수 있는 절단되고 염색된 근육 조직이 있어 63세의 근육 특성과 비교됩니다. 이러한 샘플은 섬유 클러스터링을 분석하기 전에 현미경 및 영상 분석 시설에서 디지털화되어야 합니다. 또한 63세에 채취한 근육 생검은 아세틸콜린(시냅스 전), CHARN(시냅스 후 수용체), 말단 슈반 세포 및 평행 자율 신경 분포(노르에피네프린)에 대한 염색을 통해 NMJ에 대해 분석됩니다. 연구자들은 재신경 분포에 축삭 및 말단 슈반 세포 관련 마커를 포함하는 항체 패널을 사용할 것입니다. 라벨링 프로토콜의 극저온 절편화 및 개선/검증은 HR이 BU, TG 및 MW와 협력하여 수행됩니다. HR은 그룹 내에서 정규직을 맡고 있으며 이러한 방법에 특화되어 있습니다. 또한 연구자들은 27세부터 근육 섬유 구성을 디지털화하고 분석할 연구 보조원을 위한 1개월 자금 지원을 신청합니다. 자기 공명 이미지 분석 피험자는 Huddinge의 Karolinska University Hospital에서 1.5 Tesla Siemens 카메라로 스캔되었습니다. 연구자들은 6분 안에 몸 전체를 스캔하는 수정된 2점 Dixon 지방-물 시퀀스를 사용했습니다. 자동 영상 분석은 AMRA™ 분할 소프트웨어(Advanced MR Analytics AB, Linköping, 스웨덴)를 사용하여 수행됩니다. 제공되는 데이터에는 몸 전체(목부터 무릎까지)의 지방 및 근육 조직, 허벅지 전후 근육의 근육량 및 근육 지방 침윤, 복부의 피하 지방 조직 및 간의 지방 함량이 포함됩니다. MRI 기법 결과의 장점은 재현성이 매우 높을 뿐만 아니라 체적 및 지방 침투에 대한 근육별 z-점수를 이용하여 신체 크기에 맞게 조정할 수 있다는 점입니다. 본질적으로 작은 사람은 근육감소증으로 훨씬 더 쉽게 분류되는 반면, 과체중/비만인 사람은 근육량이 너무 적은 것으로 분류되는 경우가 거의 없었기 때문에 이것은 과거에 큰 문제였습니다. 표준화된 z-점수는 영국 Biobank에서 스캔한 10,000명 이상의 사람들을 기반으로 다양한 연령대에 대해 계산되었습니다. 근육량 값과 근육의 지방 침윤은 모두 신체 기능과 관련이 있었으며, 낮은 근육량과 높은 지방 침윤, 즉 불리한 근육 구성이 결합되었을 때 가장 강력한 예측 값을 보였습니다.