Estudio longitudinal sueco sobre actividad física y estado físico (SPAF)

MATERIALES DE ESTUDIO: Los investigadores finalizaron la última recopilación de datos realizada a los 63 años en 2021-2022 del estudio de cohorte longitudinal en humanos SPAF-1958. Como punto de partida, en 1974, se seleccionaron sistemáticamente seis áreas geográficas de Suecia. En cada área, se seleccionó aleatoriamente una escuela secundaria superior, de la cual se seleccionaron aleatoriamente 429 (224 hombres y 205 mujeres) alumnos del grado más bajo para ser incluidos en el estudio. Se invitó a toda la cohorte a realizar cuestionarios y pruebas a los 16, 34, 52 y 63 años. RECOPILACIÓN DE DATOS: Cuestionario: El cuestionario incluía preguntas sobre factores del estilo de vida como actividad física, hábitos dietéticos, tabaquismo y consumo de alcohol.

El cuestionario también incluía preguntas sobre salud, enfermedad, medicación y rasgos personales. Pruebas de rendimiento físico: Se utilizaron algunas pruebas de rendimiento físico en todas las recopilaciones de datos entre los 16 y los 63 años, incluidas la capacidad aeróbica y la fuerza muscular estática y dinámica. A las pruebas se agregaron pruebas específicas que evalúan la función muscular en relación con la debilidad muscular a los 63 años. Se extrajo sangre venosa para el análisis de variables de salud estándar, así como para un estudio ampliado del perfil endocrino y del perfil de células inflamatorias. Se estimó mediante ecografía el tamaño de los músculos de dos músculos seleccionados de la pierna. La composición corporal y el tamaño de los músculos se determinaron en 60 sujetos mediante imágenes por resonancia magnética de todo el cuerpo. Pruebas del estado neurológico: se realizaron estudios de conducción nerviosa motora (NCS) en los nervios mediano y cubital derechos, y bilateralmente en los nervios tibial y peroneo. Las NCS sensoriales se realizaron en los nervios mediano, cubital y radial superficial derechos, y bilateralmente en los nervios peroneos superficial y sural. Se registraron las velocidades de conducción motora y sensorial, los potenciales de acción de los músculos compuestos (CMAP) proximales y distales y los potenciales de acción de los nervios sensoriales (SNAP). Para estimación del número de unidades motoras (MUNE) m. tibial anterior (TA) y m. Las políticas abductoras breves (ABP) se probaron mediante estimulación eléctrica del nervio mediano y peroneo, respectivamente. MUNE se obtuvo dividiendo el tamaño del CMAP máximo por el tamaño del potencial medio de unidad motora única registrado en la superficie (S-MUP). MUNE=CMAP máximo (área) / SMUP medio (área). Para definir la neuropatía de fibras pequeñas, se recogió una biopsia de piel para medir la densidad de la inervación epidérmica de fibras pequeñas. Se obtuvieron muestras de músculo esquelético con una aguja de biopsia Bergström de m. vastus lateralis y se congelaron rápidamente en isopentano enfriado con nitrógeno líquido y se almacenaron a -80°C. Para maximizar la posibilidad de incluir un gran número de uniones de transmisión neuromuscular (placas terminales) en la biopsia muscular, el sitio óptimo de la biopsia se determinó según la ubicación de la respuesta de contracción máxima a la estimulación nerviosa eléctrica. Además, la aguja se redirigió después de la penetración de la piel para cortar las miofibras lo más longitudinalmente posible. Este enfoque fue elegido para optimizar las condiciones para los análisis de la NMJ.

ANÁLISIS DEL MÚSCULO ESQUELÉTICO: La recogida de datos a los 63 años se completará con análisis morfológicos e inmunohistoquímicos/enzimáticos de 120 biopsias musculares. La alteración de la integridad del axón y de la unidad motora puede iniciar e impulsar la atrofia y el deterioro funcional de los músculos esqueléticos durante el envejecimiento. Para probar nuestra hipótesis del impacto neurogénico en la pérdida de fuerza muscular, los investigadores examinarán y compararán biopsias de músculo esquelético de 27 y 63 años en los mismos individuos. Esta parte de los análisis se centrará en las transiciones de tipos de fibras (subtipos de miosina), el cambio en el tamaño de las fibras y la agrupación de tipos de fibras con el avance de la edad (un signo de denervación seguida de reinervación). Para las biopsias a los 63 años, después de la criosección, las secciones de músculo se teñirán mediante histoquímica enzimática, tinciones histológicas e inmunohistoquímica, seguidas de imágenes de microscopía confocal. A partir de los 27 años se dispone de tejido muscular seccionado y teñido de un subgrupo de la cohorte, para comparar con las características del músculo a los 63 años. Estas muestras deben digitalizarse en nuestras instalaciones de análisis de imágenes y microscopía antes de realizar los análisis de agrupación de fibras. Además, las biopsias musculares obtenidas a los 63 años se analizarán para detectar NMJ mediante tinción para acetilcolina (presináptica), CHARN (receptores postsinápticos), células terminales de Schwann y la inervación autónoma paralela (norepinefrina). Los investigadores utilizarán un panel de anticuerpos que incluyen marcadores de participación de células de Schwann axonales y terminales en la reinervación. HR realizará la criosección y el refinamiento/validación de los protocolos de etiquetado en colaboración con BU, TG y MW. RR.HH. tiene un puesto de tiempo completo en el grupo y está especializado en estos métodos. Además, los investigadores solicitan financiación de 1 mes para que un asistente de investigación digitalice y analice la composición de las fibras musculares a partir de los 27 años. ANÁLISIS DE IMÁGENES DE RESONANCIA MAGNÉTICA Los sujetos fueron escaneados con una cámara Siemens de 1,5 Tesla en el Hospital Universitario Karolinska en Huddinge. Los investigadores utilizaron una secuencia Dixon grasa-agua modificada de 2 puntos que escanea todo el cuerpo en 6 minutos. El análisis automático de imágenes se realizará utilizando el software de segmentación AMRA ™ (Advanced MR Analytics AB, Linköping, Suecia). Los datos proporcionados incluyen tejido adiposo y muscular de todo el cuerpo (desde el cuello hasta la rodilla), volumen muscular e infiltración de grasa muscular en los músculos anterior y posterior del muslo, y tejido adiposo subcutáneo en el abdomen y contenido de grasa del hígado. La ventaja de los resultados de la técnica de resonancia magnética no es sólo la muy alta reproducibilidad, sino también el hecho de que se puede ajustar al tamaño corporal mediante puntuaciones z específicas del músculo para el volumen y la infiltración de grasa. Esto ha sido un problema importante en el pasado, ya que las personas esencialmente pequeñas se clasificaban mucho más fácilmente como sarcopénicas, mientras que las personas con sobrepeso u obesidad rara vez se clasificaban como con muy poca masa muscular. La puntuación z estandarizada se ha calculado para diferentes grupos de edad basándose en más de 10.000 personas escaneadas en el Biobanco del Reino Unido. Tanto el valor del volumen muscular como la infiltración de grasa del músculo se asociaron con la función física, con el valor predictivo más fuerte cuando el volumen muscular bajo se combinó con una infiltración alta de grasa, es decir, una composición muscular adversa.