Estudo Longitudinal Sueco de Atividade Física e Fitness (SPAF)

MATERIAIS DE ESTUDO: Os investigadores concluíram a última coleta de dados realizada aos 63 anos em 2021-2022 do estudo de coorte longitudinal humano SPAF-1958. No início do estudo, em 1974, foram sistematicamente seleccionadas seis áreas geográficas na Suécia. Em cada área, foi selecionada aleatoriamente uma escola secundária, da qual 429 (224 homens e 205 mulheres) alunos do nível mais baixo foram selecionados aleatoriamente para serem incluídos no estudo. Toda a coorte foi convidada para questionário e testes aos 16, 34 e 52 e 63 anos. COLETA DE DADOS: Questionário: O questionário incluiu perguntas sobre fatores de estilo de vida, como atividade física, hábitos alimentares, tabagismo, consumo de álcool.

O questionário também incluiu perguntas sobre saúde, doença, medicação e características pessoais. Testes de desempenho físico: Alguns testes de desempenho físico foram utilizados em todas as coletas de dados de 16 a 63 anos, incluindo capacidade aeróbica e força muscular estática e dinâmica. Testes específicos que avaliam a função muscular em relação à fraqueza muscular foram adicionados aos testes aos 63 anos. Sangue venoso foi coletado para análise de variáveis ​​padrão de saúde, bem como estudo ampliado do perfil endócrino e do perfil de células inflamatórias. O tamanho muscular de dois músculos selecionados na perna foi estimado por ultrassom. A composição corporal e o tamanho muscular foram determinados em 60 indivíduos por imagens de ressonância magnética de todo o corpo. Teste do estado neurológico: Estudos de condução nervosa motora (NCS) foram realizados nos nervos mediano e ulnar direito, e bilateralmente nos nervos tibial e fibular. A NCS sensorial foi realizada nos nervos mediano, ulnar e radial superficial direitos, e bilateralmente nos nervos sural e fibular superficial. Foram registradas velocidades de condução motora e sensorial, potenciais de ação muscular compostos proximais e distais (CMAP) e potenciais de ação nervosa sensorial (SNAP). Para estimativa do número de unidades motoras (MUNE) m. tibial anterior (TA) e m. as políticas abdutoras curtas (ABP) foram testadas por estimulação elétrica do nervo mediano e fibular, respectivamente. O MUNE foi obtido dividindo o tamanho do CMAP máximo pelo tamanho do potencial médio da unidade motora única registrado na superfície (S-MUP). MUNE=Max CMAP (área) / Média SMUP (área). Para definir neuropatia de pequenas fibras, foi coletada uma biópsia de pele para medir a densidade da inervação epidérmica de pequenas fibras. Amostras de músculo esquelético foram obtidas com agulha de biópsia de Bergström da m. vasto lateralis e foram congelados em isopentano resfriado com nitrogênio líquido e armazenados a -80°C. Para maximizar a possibilidade de incluir um grande número de junções de transmissão neuromuscular (placas terminais) na biópsia muscular, o local ideal da biópsia foi determinado pela localização da resposta máxima de contração à estimulação elétrica nervosa. Além disso, a agulha foi redirecionada após a penetração na pele para cortar as miofibras o mais longitudinalmente possível. Esta abordagem foi escolhida para otimizar as condições para análises da JNM.

ANÁLISES DO MÚSCULO ESQUELÉTICO: A coleta de dados aos 63 anos será completada com análise morfológica e imuno-/enzimo-histoquímica de 120 biópsias musculares. A ruptura da integridade do axônio e da unidade motora pode iniciar e levar ao desgaste e ao comprometimento funcional dos músculos esqueléticos durante o envelhecimento. Para testar nossa hipótese do impacto neurogênico na perda de força muscular, os investigadores examinarão e compararão biópsias de músculo esquelético de 27 e 63 anos nos mesmos indivíduos. Esta parte das análises se concentrará nas transições de tipos de fibras (subtipos de miosina), na mudança no tamanho das fibras e no agrupamento de tipos de fibras com o avanço da idade (um sinal de desnervação seguida de reinervação). Para as biópsias aos 63 anos, após crio-secção, as seções musculares serão coradas usando histoquímica enzimática, manchas histológicas e imuno-histoquímica, seguidas por imagens de microscopia confocal. A partir dos 27 anos de idade há tecido muscular seccionado e corado disponível em um subgrupo da coorte, para comparar com as características do músculo aos 63 anos. Essas amostras precisam ser digitalizadas em nossas instalações de microscopia e análise de imagens antes das análises de agrupamento de fibras. Além disso, as biópsias musculares colhidas aos 63 anos serão analisadas para JNM por coloração para acetilcolina (pré-sináptica), CHARNs (receptores pós-sinápticos), células terminais de Schwann e inervação autonômica paralela (norepinefrina). Os investigadores usarão um painel de anticorpos incluindo marcadores de envolvimento de células de Schwann axonais e terminais na reinervação. O crio-seccionamento e o refinamento/validação dos protocolos de rotulagem serão realizados pelo RH em colaboração com BU, TG e MW. O RH atua em tempo integral no grupo e é especializado nesses métodos. Além disso, os investigadores solicitam financiamento de 1 mês para um assistente de pesquisa digitalizar e analisar a composição das fibras musculares a partir dos 27 anos. ANÁLISES DE IMAGENS DE RESSONÂNCIA MAGNÉTICA Os indivíduos foram escaneados com uma câmera Siemens de 1,5 Tesla no Hospital Universitário Karolinska em Huddinge. Os investigadores usaram uma sequência Dixon de água gorda modificada de 2 pontos que examina todo o corpo em 6 minutos. A análise automática de imagens será realizada usando o software de segmentação AMRA™ (Advanced MR Analytics AB, Linköping, Suécia). Os dados fornecidos incluem tecido adiposo e muscular de todo o corpo (do pescoço ao joelho), volume muscular e infiltração de gordura muscular nos músculos anteriores e posteriores da coxa, e tecido adiposo subcutâneo no abdômen e conteúdo de gordura no fígado. A vantagem dos resultados da técnica de ressonância magnética não é apenas a altíssima reprodutibilidade, mas também o fato de poder ser ajustada ao tamanho corporal usando escores z específicos do músculo para volume e infiltração de gordura. Este tem sido um grande problema no passado, já que pessoas essencialmente pequenas eram muito mais facilmente classificadas como sarcopênicas, enquanto pessoas com sobrepeso/obesas raramente eram classificadas como tendo pouca massa muscular. O escore z padronizado foi calculado para diferentes faixas etárias com base em mais de 10.000 pessoas escaneadas no Biobank do Reino Unido. Tanto o valor do volume muscular quanto a infiltração de gordura no músculo foram associados à função física, com o valor preditivo mais forte quando o baixo volume muscular foi combinado com alta infiltração de gordura, ou seja, composição muscular adversa.