Związek poziomów kisspeptyny z wydzielaniem insuliny w cukrzycy

WSTĘP:

Od czasu odkrycia kisspeptyny jako „strażnika bramy” osi podwzgórze-przysadka-gonady, istnieje ogromne zainteresowanie cząsteczką. Kisspetyny to grupa peptydów pochodzących z genu kiss, które mają wspólny C-końcowy dekapeptyd z resztą argininy-fenyloalaniny na końcu aminowym.(1, 2) Te peptydy i ich docelowy receptor GPR54 ulegają silnej ekspresji w podwzgórzu, przednim płacie przysadki, wysepkach Langerhansa i gonadach. (2-5) Znaczenie kisspeptyny jako cząsteczki regulacyjnej dla układu rozrodczego zostało dobrze udokumentowane w znacznej liczbie badań. (6, 7) Prowadzi to do możliwości, że kisspeptyna może odgrywać równie kluczową rolę w innych miejscach, w których się znajduje, a mianowicie w trzustce.

Badacze wykazali, że kisspeptyna odgrywa rolę w regulacji aktywności komórek beta.(8) Pomimo wcześniejszych sprzecznych wyników sugerujących wydzielanie insuliny za pośrednictwem glukozy i hamowanie insuliny w różnych badaniach(9,10), obecne dowody przemawiają za rolą kisspeptyny w wydzielaniu insuliny za pośrednictwem glukozy(11). Jeden z najwcześniejszych dowodów na związek insulinooporności ze spadkiem poziomu kisspeptyny został przedstawiony przez Panidisa i wsp. w 2006 roku.

Podczas gdy różne eksperymenty na zwierzętach sugerowały, że kisspeptyny regulują wydzielanie insuliny, nie wiemy, czy dotyczy to również ludzi. Badacze postawili hipotezę, że poziomy kisspeptyny są znacząco niskie u osób z niskim endogennym wydzielaniem insuliny.

Dlatego badacze planują to badanie, aby zrozumieć związek między endogennym wydzielaniem insuliny a poziomami kisspeptyny u osób z różnymi poziomami defektu wydzielania insuliny, obserwowanymi u diabetyków. Wierzymy, że pomoże to zrozumieć mechanizmy fizjologiczne i regulację insuliny opartą na kisspeptynie u osób z cukrzycą.

Badacze zauważyli również, że mechanizm pobudzania wydzielania insuliny wywołanego glukozą jest podobny do działania GLP1 (peptyd podobny do glukagonu).(10) Interesujące byłoby ustalenie korelacji między dwoma peptydami o potencjalnie podobnym działaniu w fizjologii insuliny. Wykazano, że leptyna zmienia ekspresję kiss-1 w modelach zwierzęcych. Ustalenie związku między poziomem leptyny a kisspeptyną u ludzi pomogłoby nam zidentyfikować dalsze potencjalne cele terapeutyczne związane z wieloukładowymi objawami cukrzycy.(12)

CELE I ZADANIA:

1: Zbadanie związku między poziomem insuliny na czczo i poziomem kisspeptyny w cukrzycy.

2. Zbadanie związku między otyłością a poziomami Kisspeptin. 3. Zbadanie związku między poziomami kisspeptyny i GLP-1. 4. Zbadanie związku między poziomami leptyny i kisspeptyny.

PYTANIE BADAWCZE:

Czy w populacji osób dorosłych uczęszczających do poradni diabetologicznej i medycznej szpitala trzeciego stopnia osoby z cukrzycą w porównaniu z osobami bez cukrzycy mają stopniowo niższe poziomy kisspeptyny i czy ten gradient poziomów Kisspeptyny jest związany z endogennym wydzielaniem insuliny na czczo . Badacze wysuwają hipotezę, że niski poziom kisspeptyny jest związany z niskim wydzielaniem insuliny.

RODZAJ BADANIA – PROJEKT BADANIA: Badanie przekrojowe Zgoda etyczna dla protokołu badania uzyskana od komisji etycznej instytutu Care Hospital, Nagpur, Indie

Pacjenci i metody Badanie zostanie przeprowadzone w szpitalu CARE w Nagpur od 1 września 2013 r. do 31 listopada 2013 r. Pacjenci zostaną wybrani do udziału w badaniu w taki sposób, że każdy pacjent zgłaszający się do poradni diabetologicznej i medycznej zostanie poddany badaniu przesiewowemu w badaniu, a pacjenci spełniający kryteria włączenia zostaną zrekrutowani do badania.

Badana populacja:

Do badania zostanie włączonych łącznie 60 pacjentów. Badacze planują włączyć diabetyków bez suplementacji egzogenną insuliną, diabetyków z suplementacją egzogenną insuliną i zdrowych kohort, po 20 w każdej grupie.

Metody:

Badacze będą sprawdzać wszystkich pacjentów, którzy zostaną do nich skierowani po spełnieniu kryteriów włączenia i wyłączenia w badaniu. Od wszystkich uczestników zostanie uzyskana pisemna świadoma zgoda. Pacjenci włączeni do badania otrzymają wystandaryzowany kwestionariusz w celu zarejestrowania cech społeczno-demograficznych, szczegółów leczenia cukrzycy, historii PCOD (choroby policystycznych jajników), historii hipogonadyzmu lub jakichkolwiek oczywistych zaburzeń seksualnych w wywiadzie. Zostanie przeprowadzone ogólne badanie BMI (wskaźnik masy ciała), wskaźnika talii i bioder oraz ciśnienia krwi. Próbki krwi zostaną następnie pobrane (8 ml: probówka 2 ml z fluorem, 2 ml EDTA (kwas etylenodiaminotetraoctowy), zwykła probówka 4 ml) po całonocnym poście w celu oznaczenia kreatyniny, glukozy we krwi na czczo, insuliny na czczo, poziomu peptydu C, HbA1C (hemoglobina glikozylowana), LH (hormon luteinizujący), FSH (hormon folikulotropowy) i poziom kisspeptyny. U pacjentek próbki będą pobierane między 3. a 6. dniem normalnego cyklu miesiączkowego. Po zwykłym posiłku, regularnie przyjmowanym przez pacjenta, zostaną pobrane próbki (8 ml: 2 ml fluorku, 4 ml EDTA i 2 ml zwykła probówka) na poziom glukozy we krwi po posiłku, poziom insuliny, poziom leptyny, poziom GLP-1 i poziom kisspeptyny . Próbki krwi na kreatyninę, glukozę (przed i po), poziomy insuliny, HbA1C, LH i FSH zostaną natychmiast przeanalizowane w laboratorium. Próbki krwi na poziomy kisspeptyny, GLP-1, poziomy leptyny zostaną pobrane do oddzielnej probówki z EDTA, wirowane przez 15 min w 4 stopniach, a osocze będzie przechowywane oddzielnie w głębokiej zamrażarce w temperaturze -70 stopni. Stężenie kisspeptyny będzie mierzone przy użyciu Kiss-peptyny-10 (Metastin [45-54]-amid) i kompetycyjnego testu immunoenzymatycznego (zestaw nr EK-048-56, Phoenix Pharmaceuticals, Inc., Burlingame, CA, USA). Protokół zestawu ELISA dla leptyny (ludzkiej) (nr kat. Nr: EK-003-12, Phoenix Pharmaceuticals) będą stosowane do oznaczania poziomów leptyny w surowicy. GLP-1 (7-36)-amid (ludzki, szczurzy, myszowy) EIA (enzymeimmunoassay) Zestaw (nr katalogowy EK-028-11, Phoenix Pharmaceuticals) zostanie użyty do testowania poziomów GLP 1. Do testów zostanie użyta metoda podana w ulotce produktu.

Analizy mocy Nie przeprowadzono podobnych badań, które pomogłyby nam przewidzieć siłę badania. Ponieważ badacze nie dysponowali wcześniejszymi szacunkami, nie przeprowadzono formalnego obliczenia mocy. Badacze losowo postanowili wziąć do badania 60 pacjentów, po 20 w każdym ramieniu.

Analiza danych Wszystkie dane zostaną wprowadzone za pomocą programu MS Excel. Naukowcy przeprowadzą opisową analizę statystyczną danych wyjściowych. Analityk, który będzie zaślepiony wynikami badań laboratoryjnych, porówna miarę wyniku przy użyciu współczynnika korelacji Pearsona. Wszystkie analizy statystyczne zostaną przeprowadzone przy użyciu oprogramowania SPSS (wersja 16.0 SPSS, Inc., Chicago, IL). Rozpowszechnianie Oczekuje się, że wyniki tego badania dostarczą dowodów i istotnych klinicznie informacji na temat związku między kisspeptyną a cukrzycą.

Ryzyko związane z udziałem Badacze uważają, że nie ma dodatkowego ryzyka dla uczestników biorących udział w badaniu.

Sprzeczne interesy Autorzy deklarują, że nie mają konkurencyjnych interesów.