Wpływ kurkuminy na zawartość tłuszczu w wątrobie u osób otyłych

Częstość występowania otyłości wzrasta na całym świecie. Otyłość i związane z nią powikłania stanowią ogromne obciążenie dla osób otyłych, ich rodzin, systemów opieki zdrowotnej i społeczeństw. Niealkoholowa stłuszczeniowa choroba wątroby (NAFLD) okazała się częstym i poważnym powikłaniem otyłości. Stłuszczenie, łagodna i potencjalnie odwracalna postać NAFLD, może przejść do cięższej postaci, niealkoholowego stłuszczeniowego zapalenia wątroby (NASH), które może prowadzić do zwłóknienia i ostatecznie do marskości wątroby, a rzadko do raka wątrobowokomórkowego. Większość osób otyłych ma NAFLD. Obecnie żadne środki farmakologiczne nie są zarejestrowane do zapobiegania lub leczenia NAFLD, a utrata masy ciała, która jest niezwykle trudna do uzyskania (a zwłaszcza do utrzymania), pozostaje jedyną opcją leczenia. Co ciekawe, kurkumina, związek fenolowy ekstrahowany z korzenia kurkumy, w badaniach in vitro i na zwierzętach wykazał obiecujące efekty w zapobieganiu i leczeniu NAFLD, a nieliczne dostępne dane dotyczące ludzi wskazują na ten sam kierunek; ale brakuje solidnych danych dotyczących ludzi. To badanie ma na celu zbadanie wpływu kurkuminy na leczenie NAFLD u ludzi poprzez przyjrzenie się wpływowi przyjmowania kurkuminy przez 6 tygodni u otyłego osobnika z NAFLD na metabolizm lipidów, glukozy i białek.

W tym randomizowanym, podwójnie zaślepionym, kontrolowanym placebo badaniu kwalifikujący się uczestnicy zostaną poddani podstawowym ocenom, zanim zostaną losowo przydzieleni do otrzymywania dwóch kapsułek placebo dwa razy dziennie lub dwóch kapsułek kurkuminy (co odpowiada 200 mg) dwa razy dziennie przez 6 tygodni. Pod koniec 6-tygodniowych okresów interwencji zostaną przeprowadzone oceny końcowe (podobne do ocen wyjściowych).

Spotkanie informacyjne:

Przed przystąpieniem do jakichkolwiek procedur związanych z protokołem zostanie zorganizowane spotkanie informacyjne w Centrum Klinicznych Badań Metabolicznych Szpitala Gentofte, na którym badani zostaną poinformowani o możliwości przyprowadzenia na wizytę wybranej przez siebie osoby. Podczas tego spotkania członek grupy badawczej wyjaśni cel, procedury i możliwe zagrożenia związane z badaniem w niezakłóconym i poufnym otoczeniu. Uczestnik zostanie poinformowany, że jeśli potrzebny jest dodatkowy czas na ocenę udziału, minimum 24 godziny od udzielenia ustnej informacji do momentu wyrażenia zgody i podpisania formularza świadomej zgody jest akceptowalne. Po uzyskaniu świadomej zgody planowany jest czas badania przesiewowego. Uczestnik zostanie poinformowany o możliwości wycofania pisemnej zgody w dowolnym momencie przed rozpoczęciem badania lub w jego trakcie.

Wizyta przesiewowa:

Jeżeli po spotkaniu informacyjnym dana osoba wyrazi zgodę na udział w badaniu i uzyskano ustną i pisemną świadomą zgodę, zostanie zaplanowana wizyta przesiewowa. Osobnik zostanie poinstruowany o 10-godzinnym poście przed badaniem przesiewowym (w tym lekami, ale wodę można spożywać do 2 godzin przed badaniem przesiewowym). Po tym poście badany spotka się rano w wydziale. Zostanie zmierzony wzrost i masa ciała, odnotowana zostanie lek i historia medyczna, zostanie pobrana krew w celu oceny stężenia hormonu tyreotropowego, kreatyniny, elektrolitów, aminotransferazy asparaginianowej (ASAT), aminotransferazy alaninowej (ALAT), mleczanów w osoczu/surowicy zostanie zmierzona dehydrogenaza, fosfataza alkaliczna, albumina, bilirubina, gamma-glutamylotransferaza, markery wirusowego zapalenia wątroby, liczba płytek krwi, ferrytyna i hemoglobina oraz stosunek albuminy do kreatyniny w moczu. Przeprowadzony zostanie Fibro Scan. Zostanie przeprowadzone badanie fizykalne, w tym ocena ciśnienia krwi i częstości tętna. Nawyki alkoholowe zostaną ocenione na podstawie kwestionariusza Testu Identyfikacji Zaburzeń Używania Alkoholu (AUDIT)76,77 oraz ilościowego określenia tygodniowej ilości alkoholu. Zostanie wypełniona lista kontrolna bezpieczeństwa rezonansu magnetycznego (MR) i zostanie wręczona karta informacyjna MR. Jeśli wszystkie kryteria włączenia i żadne z kryteriów wykluczenia nie są spełnione, terminy oceny wyjściowej i wizyty randomizacyjnej zostaną zaplanowane w ciągu 6 tygodni od wizyty przesiewowej. Osobnik zostanie poinstruowany, aby nie spożywał codziennie żywności zawierającej kurkuminę od badania przesiewowego do końca próby.

Oceny wyjściowe i wizyta z randomizacją:

Zakwalifikowani pacjenci zostaną poddani badaniu MRS, które zostanie zaplanowane jak najbliżej rozpoczęcia interwencji. Pacjent spotka się na Oddziale Radiologii Szpitala Herlev i zostanie umieszczony w pozycji poziomej podczas skanowania. Podczas MRS zostanie oceniona spektroskopia wątroby oraz dokonana zostanie ocena trzewnej tkanki tłuszczowej i podskórnej tkanki tłuszczowej. Podczas skanowania osoba badana zostanie ułożona w pozycji poziomej (czas trwania: około 30 minut).

Dzienniczek jedzenia i aktywności fizycznej oraz standaryzowany okres przyjmowania pokarmu: Przed rozpoczęciem interwencji iw tygodniu poprzedzającym wizytę na zakończenie badania, każdy uczestnik wypełni trzydniowy jadłospis i aktywność fizyczną. Dziennik żywności i aktywności fizycznej będzie rejestrowany ręcznie przez uczestników za pomocą kwestionariusza. Na dwa ostatnie dni przed dniami testu uczestnicy proszeni są o znormalizowane spożycie pokarmu bogatego w węglowodany, aby uzyskać najbardziej miarodajną odpowiedź w doustnym teście tolerancji glukozy (OGTT), a badany zostanie dokładnie poinstruowany w tym zakresie.

W ostatnim tygodniu przed randomizacją pacjent jest proszony o pobranie próbki kału w celu określenia liczby i podtypu bakterii jelitowych. Uczestnik otrzyma zestawy próbek składające się z torby chłodzącej, opakowań do zamrażania i probówek z próbkami kału. Próbki kału zostaną pobrane przez uczestnika w domu: Przed wypróżnieniem zostanie umieszczony w toalecie jednorazowy kolektor, skąd stolec zostanie przeniesiony do probówki, która natychmiast zostanie przeniesiona do pojemnika transportowego i umieszczona w temperaturze -20°C w gabinecie pacjenta zamrażarka. Przed transportem do szpitala Gentofte pojemnik transportowy umieszcza się w torbie chłodzącej, a po przybyciu do szpitala Gentofte pojemnik transportowy (wraz z probówką) jest natychmiast przechowywany w temperaturze -80°C do późniejszej analizy. Obejmuje to ekstrakcję DNA, przygotowanie biblioteki, sekwencjonowanie MiSeq 16S rRNA i analizę mikroflory (względna liczebność, różnorodność alfa/beta, powiązanie z interesującym fenotypem).

Na wizycie randomizacyjnej badany spotka się w laboratorium około godziny 8 rano po 10 godzinach postu (w tym leków) i powstrzymania się od używania tytoniu lub suplementów nikotynowych. Podmiotowi wolno pić wodę do 8 godzin przed spotkaniem w oddziale. Ponadto badany zostanie poproszony o unikanie spożywania dużych ilości alkoholu i forsownych ćwiczeń na dwa dni przed wizytą oraz poinstruowany o korzystaniu z nieuciążliwych metod transportu do ośrodka badawczego. Przeprowadzone zostaną następujące postępowania:

1. Zostanie pobrana próbka moczu na czczo, a uczestnik zostanie poproszony o całkowite opróżnienie pęcherza. Zostanie zmierzona objętość moczu.
2. Pomiar bioimpedancji.
3. Zostaną pobrane próbki krwi na czczo (markery genetyczne NASH, biomarkery NASH i włóknienia, czynniki wzrostu fibroblastów, trójglicerydy, cholesterol, parametry wątroby, hemoglobina A1c, markery stanu zapalnego, adipokiny, hemoglobina, kreatynina) w ilości 22 ml.
4. FibroScan: Pacjent leży w pozycji leżącej przez około 10 minut, podczas których sonda wykorzystująca fale ścinające i ultradźwięki jest przykładana w prawą stronę ciała poniżej żeber
5. Pomiar ciśnienia krwi, tętna, masy ciała oraz obwodu bioder i talii
6. Jedna kaniula zostanie wprowadzona do żyły łokciowej w celu pobrania próbek krwi; przedramię, z którego pobierana jest krew, będzie przez cały czas trwania eksperymentu owinięte kocem grzewczym (42°C) (w celu arterializacji krwi żylnej)
7. Próbki krwi zostaną pobrane zgodnie z Tabelą 1 poniżej (aminokwasy ogółem, hormony jelitowe, glukoza, glukagon, insulina, peptyd c, mocznik, wolne kwasy tłuszczowe)
8. W czasie 0 min osoba badana spożyje 75 g bezwodnej glukozy rozpuszczonej w 300 ml wody w ciągu 5 minut
9. W czasie 0, 30, 60, 90, 120, 150, 180, 210 i 240 min głód, sytość, sytość i przyszłe spożycie żywności będą mierzone za pomocą wizualnych skal analogowych (VAS). (patrz załącznik 5 „VAS”).
10. W ciągu ostatniej godziny (~180 min - ~240 min), spoczynkowy wydatek energetyczny (REE) będzie mierzony w pozycji leżącej na plecach metodą kalorymetrii pośredniej w celu określenia zużycia tlenu (V02) i produkcji dwutlenku węgla (VC02). Zastosowany zostanie przepływowy analizator gazu z baldachimem.
11. W czasie ~240 min badany zostanie poproszony o dostarczenie nowej próbki moczu do oznaczenia stężenia mocznika. Uczestnik jest proszony o całkowite opróżnienie pęcherza. Zostanie zmierzona objętość moczu.
12. W czasie 250 minut pacjent spożywa standaryzowany posiłek ad libitum składający się z mięsa mielonego, makaronu, kukurydzy, marchwi, papryki, śmietany, soli i pieprzu (50% energii (E) węglowodanów, 37% tłuszczu, 13% białka ); podmiot zostanie poinstruowany, aby jadł tak dużo, jak to możliwe, aż poczuje się komfortowo nasycony; posiłek należy spożyć w ciągu maksymalnie 30 minut, a pod koniec posiłku zostanie odnotowany czas spędzony na jedzeniu, waga posiłku i całkowita ilość zużytej energii. Dodatkowo uczestnicy oceniali wygląd, zapach, smak, nieprzyjemny smak i ogólne wrażenie posiłku ad libitum w wynikach VAS podczas posiłku ad libitum. 10 minut po zakończeniu spożywania posiłku ostatni kwestionariusz dotyczący głodu, sytości, sytości i przewidywanego spożycia pokarmu zostanie zmierzony za pomocą wizualnej skali analogowej.

Okres interwencyjny:

Interwencja rozpocznie się wkrótce po wizycie randomizacyjnej i pierwszym MRS. Podczas całego okresu interwencji każdy pacjent będzie wypełniał mleczarnię, aby śledzić wszelkie nowe leki towarzyszące, przestrzeganie zaleceń i możliwe zdarzenia niepożądane. Każdy pacjent będzie przyjmował dwie kapsułki Merivy® lub dwie kapsułki placebo każdego ranka i każdego wieczoru przez 42 dni (±3 dni) z małą szklanką wody, najlepiej w stosunku do posiłku. W przypadku pominięcia/pominięcia przyjęcia przez pacjenta dawki, można ją przyjąć do 6 godzin przed następną zaplanowaną dawką. Jeśli pacjent zapomni/pominie dawkę, a następna zaplanowana dawka przypada w ciągu następnych 6 godzin, dawkę należy podać, a pacjent musi odnotować zdarzenie w dzienniczku. Osoby badane proszone są o zachowanie nawyków związanych z alkoholem i paleniem, które mogły mieć przed badaniem przesiewowym, a tym samym o niespożywanie więcej niż 21 jednostek alkoholu tygodniowo. Ponadto do końca okresu próbnego nie wolno spożywać więcej niż 5 jednostek w ciągu jednej nocy ani codziennie spożywać pokarmów zawierających kurkuminę. W połowie okresu interwencji pacjent otrzyma telefon od badacza lub innego oddelegowanego personelu ośrodka, który sprawdzi zdarzenia niepożądane, jednocześnie stosowane leki i przestrzeganie zaleceń oraz udzieli odpowiedzi na wszelkie pytania uczestnika.

W ostatnim tygodniu interwencji uczestnicy ponownie proszeni są o wypełnienie kwestionariuszy dotyczących spożycia pokarmu i aktywności fizycznej. Rozpoczynając dwa dni przed wizytą kończącą badanie, pacjent musi ponownie przestrzegać dwóch dni standardowego przyjmowania pokarmu.

Ocena końcowa badania i wizyta:

Wizyta końcowa badania zostanie zaplanowana 42 ± 3 dni po rozpoczęciu interwencji. W ciągu jednego tygodnia przed wizytą końcową badania zostanie zaplanowane i przeprowadzone pobranie próbki kału, jak opisano powyżej w części „Oceny wyjściowe i wizyta randomizacyjna”, a ocena MRS zostanie wykonana możliwie najbliżej wizyty końcowej. Procedury podczas wizyty na zakończenie badania są podobne do tych opisanych powyżej w części „Oceny wyjściowe i wizyta z randomizacją”. Również w tym dniu, aby sprawdzić efekty interwencji kurkuminy, lekarz z zespołu badawczego przeprowadzi badanie fizykalne i pobierze dodatkowe próbki krwi (identyczne z próbkami podczas wizyty przesiewowej, z wyjątkiem markerów wirusowego zapalenia wątroby) ( co dodaje kolejne 5 ml próbek krwi w porównaniu z wizytą randomizacyjną) i zmierzony zostanie stosunek albuminy do kreatyniny w moczu.