Alvos Diagnósticos e Terapêuticos em Tumores Cartilaginosos

O estudo intitulado "Encontrar novos alvos de diagnóstico e terapêutica em tumores cartilagíneos" aborda problemas importantes não resolvidos no diagnóstico, avaliação prognóstica e tratamento de tumores condróides, com foco particular no condrossarcoma. O condrossarcoma representa aproximadamente 30% de todos os tumores ósseos malignos primários e é o sarcoma ósseo maligno mais comum em adultos. Apesar da sua relevância clínica, o tratamento do condrossarcoma continua a ser desafiante devido à sua heterogeneidade biológica, resistência à quimioterapia e radioterapia, e incerteza diagnóstica frequente, especialmente em lesões de baixo grau.

Um problema clínico central reside na diferenciação entre tumores benignos da cartilagem (encondromas e tumores cartilagíneos atípicos), condrossarcoma de baixo grau, condrossarcoma de grau mais elevado e outras entidades malignas como o osteossarcoma condroblástico. A avaliação histológica por si só é muitas vezes insuficiente, particularmente em pequenas amostras de biópsia, e as decisões diagnósticas frequentemente dependem de uma combinação subjetiva de critérios clínicos, radiológicos e patológicos. A classificação incorreta pode levar a subtratamento com controlo local insuficiente ou a sobretratamento com cirurgia radical desnecessária. Além disso, o condrossarcoma avançado, inoperável ou metastático tem um prognóstico muito pobre, e atualmente faltam terapias sistémicas eficazes.

Este projeto foca-se na identificação e validação de biomarcadores moleculares que poderiam melhorar significativamente a precisão diagnóstica, a estratificação prognóstica e o direcionamento terapêutico. São investigadas duas principais áreas moleculares: mutações nos genes IDH1/IDH2 e microRNAs não codificantes (miRNAs).

As mutações nos genes IDH1 e IDH2 foram identificadas como eventos moleculares característicos em tumores cartilagíneos. Estas mutações ocorrem em resíduos de aminoácidos específicos e levam a uma atividade enzimática neomórfica, resultando na produção do oncometabolito 2-hidroxiglutarato. As mutações IDH1/IDH2 são comuns em condrossarcomas centrais e nos seus precursores benignos relacionados, mas são raras ou ausentes em condrossarcomas periféricos e noutros tumores mesenquimais, incluindo osteossarcoma. Assim, o estado de mutação IDH1/IDH2 representa um marcador diagnóstico de grande valor, particularmente para distinguir o condrossarcoma do osteossarcoma condroblástico, uma distinção com grandes implicações terapêuticas. O estudo também coloca a hipótese de que as mutações IDH1/IDH2 podem estar associadas a uma maior agressividade do tumor e a um pior prognóstico, tornando-as potenciais marcadores prognósticos e alvos terapêuticos. É importante referir que os inibidores de IDH já utilizados noutras malignidades podem representar uma futura opção de tratamento para doentes selecionados com condrossarcoma.

O segundo grande foco do projeto é o papel dos microRNAs, pequenos RNAs não codificantes que regulam a expressão genética ao nível pós-transcricional. Numerosos estudos mostraram que a desregulação dos miRNAs contribui para a iniciação, progressão, angiogénese, invasão e metastização do tumor. No condrossarcoma, miRNAs específicos foram implicados na regulação de vias oncogénicas-chave, incluindo a sinalização SRC, mTOR, Wnt/β-catenina, angiogénese mediada por VEGF e remodelação da matriz. Dados preliminares de sequenciação de nova geração gerados pela equipa de investigação identificaram perfis de expressão de miRNAs distintos no condrossarcoma em comparação com a cartilagem saudável, incluindo vários miRNAs não relatados anteriormente na literatura. Estes achados apoiam a existência de assinaturas de miRNAs específicas do tumor com potencial diagnóstico e prognóstico.

O estudo está desenhado em fases exploratória e de validação. Na fase exploratória, amostras tumorais frescas congeladas recolhidas prospetivamente serão submetidas a perfis globais de expressão de miRNAs utilizando sequenciação de nova geração, juntamente com análise do estado de mutação IDH1/IDH2 baseada em NGS. Esta fase visa identificar padrões moleculares característicos ao longo do espetro de tumores condróides, incluindo lesões benignas, condrossarcoma de baixo e alto grau, variantes dediferenciadas e osteossarcoma condroblástico.

Na fase de validação, miRNAs desregulados selecionados e mutações IDH1/IDH2 serão analisados numa grande coorte retrospetiva de amostras FFPE utilizando RT-qPCR e métodos de deteção de mutações direcionados. Os resultados moleculares serão integrados com dados clinicopatológicos detalhados para desenvolver painéis robustos de miRNAs de diagnóstico capazes de classificar com precisão os tumores condróides e distinguir o condrossarcoma do osteossarcoma. Em paralelo, serão estabelecidos painéis de miRNAs prognósticos e correlacionados com a sobrevida global utilizando métodos estatísticos avançados, incluindo análise de Kaplan-Meier e modelação de riscos proporcionais de Cox.

Um componente inovador do projeto é a avaliação de biópsias líquidas, analisando miRNAs circulantes e exossomais de fluidos corporais dos doentes. Esta abordagem visa estabelecer biomarcadores não invasivos para diagnóstico, prognóstico e monitorização da doença para além do momento da cirurgia. Adicionalmente, a relevância funcional será explorada utilizando linhas celulares de condrossarcoma, nas quais miRNAs selecionados serão experimentalmente sobreexpressos para avaliar efeitos transcriptómicos a jusante e a sua relação com o estado de mutação IDH1/IDH2.

No geral, este estudo visa avançar significativamente a compreensão da biologia do condrossarcoma e traduzir os achados moleculares em ferramentas clinicamente aplicáveis. Ao melhorar a precisão diagnóstica, permitir a estratificação prognóstica e identificar novos alvos terapêuticos, o projeto aborda uma necessidade crítica não satisfeita no tratamento dos tumores cartilagíneos e estabelece as bases para futuras estratégias de tratamento direcionadas e personalizadas.