Multidisciplinär analys genom morfologisk och mekanisk utvärdering av aortaväggen hos patienter som genomgår hjärtkirurgi.

1. Patienturval Alla patienter som genomgår hjärtkirurgiska ingrepp som kräver ersättning av aorta ascendens kan inkluderas i studien, förutsatt att de undertecknar det specifika informerade samtycket. I dessa patienter (Grupp A), vid operationen, efter rutinsamling av prov för standard histologisk och/eller biokemisk utvärdering, samlas alla kvarvarande prover in, lagras och skickas för anonyma mekaniska tester på Institutionen för samhällsbyggnadsteknik vid Universitetet i Pavia för hela testprotokollet). Det kommer inte att finnas några specifika kontraindikationer för patienters inkludering i studien utom i fall av hög biologisk risk (dvs. HCV+ patienter). Patienters inkludering i studien och provinsamling kommer därför inte att påverka på något sätt den diagnostiska och terapeutiska beslutsprocessen. Som en kontrollgrupp kommer vi också att inkludera, under förutsättning av specifikt samtycke, patienter som genomgår hjärttransplantation. I denna grupp patienter (Grupp B), när kardiotomin är slutförd, kommer utvalda prover av den borttagna aorta ascendens att lagras och skickas till Institutionen för teknik vid Universitetet i Pavia med samma protokoll. Grupp B kan också inkludera prover från donors hjärtan, insamlade vid tidpunkten för transplantationen.

2. Provinsamling och preparering När den utvalda delen av aorta ascendens har tagits bort, enligt det kirurgiska förfarandet, samlas prover för rutinundersökningar och prepareras för histologisk utvärdering enligt det nuvarande protokollet. Den återstående delen delas upp i prover, som kommer att identifieras enligt orientering och anatomisk position som A1, A2 och A3 (främre del respektive från ST-fogen till den tubulära delen och slutligen till den distala delen nära den namnlösa artären) och P1, P2 (bakre del respektive från den proximala delen till den distala delen).

   När alla prover är identifierade kommer de att lagras i isotonisk fysiologisk lösning och förvaras i ett kylskåp vid 4°C tills mekaniska tester utförs. De kommer alla att samlas i en enda låda identifierad med en numerisk progressiv kod (t.ex. P1, P2, etc) utan någon ytterligare information om patientens egenskaper. Patientdata och deras korrelation till den progressiva koden kommer endast att vara tillgängliga i den specifika databasen, som kommer att vara under direkt ansvar för huvudutredaren i studien.

3. Analys av mekaniska egenskaper Mekaniska uniaxiella dragprov för slutlig spänning utförs på det färska "ex vivo"-provet inom 24 timmar från insamlingen. Kortfattat, från hela cylindern förbereds ett antal prover med en hundbensform och ett längd/bredd-förhållande på minst 4:1. Prover delas upp och identifieras enligt regionen i aortaväggen (främre/större krökning och bakre/mindre krökning). Antalet prover som erhålls från varje patient är relaterat till den ursprungliga dimensionen av den insamlade aortacylindern och varierar vanligtvis från 2 till 13. Hundbensformen möjliggjorde en central smal region, identifierad av två svarta markörer. Innan mekaniska tester mäts tjockleken på varje prov av aortaväggen (awTK) noggrant med en dedikerad skjutmått. Tester utförs sedan med ett MTS insight-testningssystem 10 kN (MTS system corporation) med uniaxiell cirkumferentiell och/eller longitudinell kraft. Varje test identifieras enligt regionen i aortan där provet samlades in och riktningen av den applicerade kraften. Tre slutliga mekaniska egenskapsparametrar kommer att mätas: Topp töjning (Pstr) som den maximala töjningen före provbrott (markör för aortaväggens elasticitet); Toppspänning (PS) som den maximala spänningen före provbrott (markör för aortaväggens styrka) och Maximal elasticitetsmodul (EM) som den maximala lutningen på spänning/töjningskurvan (markör för aortaväggens styvhet eller motstånd mot deformation).
4. Statistisk analys Baserat på en tidigare serie tester och på standardavvikelsen som erhållits för de tre huvudsakliga mekaniska parametrarna som mättes: Topp töjning, Toppspänning och Elasticitetsmodul (0,11 mm, 0,756 MPa respektive 17,88 MPa) beräknade vi en urvalsstorlek på 22 patienter per grupp för att upptäcka en skillnad lika med 1sd med en styrka på (90% fel och 0,5% fel). Dessutom, baserat på antalet patienter som genomgår kirurgi på aorta ascendens på vår avdelning under de senaste tre åren (nästan 100 per år), och på patienternas egenskaper (ålder, kön, närvaro av bikuspid aortaklaff), strävar vi efter att samla in minst 60-80 patienter på ett år, och att identifiera, med signifikant statistisk styrka, potentiella mekaniska egenskapsskillnader relaterade till kön, ålder >70 år och närvaron av naturlig bikuspid klaff.

Sammanfattning av beskrivning av statistisk analys:

Statistisk analys kommer att utföras med MedCalc Statistical Software. Kontinuerliga variabler kommer att testas för normalfördelning med Kolmogorov-Smirnov-test. Enligt resultatet av normalfördelningen kommer kontinuerliga variabler sedan att sammanfattas som medelvärde plus/minus SD eller median [IQR]. Skillnader mellan två grupper (t.ex. kvinnor/män, under/över 70 år, bikuspid/trikuspid naturlig aortaklaff) kommer att jämföras genom oparad t-test och variansanalys (med Bonferroni-test) eller Mann-Whitney U-test och Kruskal-Wallis i fall av parametrisk respektive icke-parametrisk fördelning (p<0,05 ansågs statistiskt signifikant). De statistiska sambanden mellan olika kontinuerliga variabler (t.ex. mekaniska tester och ålder, utsträckning av aortadilatation, utsträckning av indexerad aortadilatation, preoperativ TTE-beräknad aortaelasticitet etc etc, kommer att utvärderas genom en linjär regressionsanalys, med Pearsons korrelationskoefficient (r) och med antagande av ett p-värde <0,005 som signifikant. Slutligen kommer en multivariat regressionsmodell (framåt stegvis) att genomföras för att identifiera prediktorer för allvarligt nedsatta mekaniska egenskaper (t.ex. Topp töjning och Toppspänning <25:e percentilen och Elasticitetsmodul >75:e percentilen).