粪便微生物群移植治疗原发性硬化性胆管炎。

背景与意义：

原发性硬化性胆管炎 (PSC) 是一种进行性慢性胆汁淤积性肝病，其特征是肝内和/或肝外胆管发生炎症和纤维化破坏。 PSC 将发展为胆汁性肝硬化、门静脉高压症和肝功能衰竭 (1) 。 这是肝移植的常见指征。 在高达 90% 的患者中，还会出现溃疡性结肠炎或克罗恩氏病 (2) 。 用于治疗溃疡性结肠炎的药物，如柳氮磺胺吡啶、皮质类固醇和硫唑嘌呤或 6-巯基嘌呤，在减轻炎症或缓解 PSC (3) 方面没有效果。 对其他抗炎药的多项研究均未证明有任何益处。 在标准剂量下，熊去氧胆酸 (UDCA) 可能有助于延缓疾病的进展，尽管最近的一项研究表明，高剂量 UDCA 不仅无效，而且可能有害 (4) 。 目前还没有药物疗法被证明对 PSC 有效，也没有疗法获得 FDA 批准用于该适应症。

据推测，细菌成分可能会刺激异常的免疫反应，导致 PSC 中所见的胆道炎症持续存在。 细菌通过易位穿过异常和发炎的肠粘膜进入门静脉系统 (5) 进入肝脏和胆管系统。 研究表明 PSC 患者发生门静脉菌血症的风险增加。 动物模型已经证明，肠道生态失调可导致具有 PSC 各种特征的肝胆炎症 (6) 。 细菌随后可能诱发 PSC 病理学特征的途径是推测性的。

细菌可能通过定殖造成直接伤害，尽管研究尚未发现任何特定的病原体或一组一致的细菌。 另一个潜在的途径可能是某些细菌产生次级胆汁酸，例如脱氧胆酸和石胆酸，它们对胆道系统有害 (7) 。 我们最近发现，与非胆汁淤积对照相比，PSC 患者的血清胆汁酸成分发生了变化。 在 PSC 患者中使用 UDCA 治疗降低了有毒的初级胆汁酸鹅去氧胆酸的浓度，但也增加了有毒的次级胆汁酸石胆酸的浓度（摘要 DDW 2014）。 肠道微生物群的改变可以最大限度地减少或消除这种伤害。

使用抗生素治疗 PSC 的经验有限。 甲硝唑已被证明可以改善肝功能测试 (8) 。 口服万古霉素也被认为是一种有潜力的疗法 (9)。 三名儿科患者的初步报告和随后对 14 名儿童进行的小型、不受控制的口服万古霉素系列显示肝功能测试和症状有所改善 (10, 11) 。 我们最近完成了一项对 10 名患有 PSC 的成人口服万古霉素的研究，发现血清碱性磷酸酶水平有轻微改善（摘要 DDW 2011）。

粪便生物疗法 (FBT) 也称为粪便移植或粪便微生物群移植——涉及将供体的粪便菌群（细菌）转移到受体的结肠。 它已被广泛接受为复发性艰难梭菌 3 感染的护理标准，累积治愈率 >90% 且不良事件最少 (12) 。 在 C. diff 感染中，先前接触抗生素会减少正常的结肠菌群，从而使 C. diff 生物体增殖并释放毒素 (13) 。 这种细菌环境类似于 IBD 患者体内微生物多样性的主要变化。 有趣的是，当 IBD 患者接受 FBT 治疗艰难梭菌时。 感染，它们的结果非常好，强化了肠道菌群在肠道免疫系统中具有强烈影响的观念 (14) 。 我们目前有一个强大的 FMT 临床计划，用于治疗复发性和难治性艰难梭菌感染，治愈率 > 90%。 我们最近还参加了一项关于使用 FMT 治疗克罗恩病的开放标签临床试验。

我们假设对于 PSC 患者，粪便微生物群移植将纠正导致肝胆炎症的生态失调，从而改善 LFT 并减缓肝硬化的进展。

具体目标：

具体目标 1：通过比较递送方式（结肠镜检查和胶囊）的 16s 核糖体 RNA 测序，确定粪便微生物群移植对患有和不患有炎症性肠病的原发性硬化性胆管炎患者肠道微生物组的影响。

假设：粪便微生物群移植将导致患者的微生物群持续重新增殖，这与供体粪便中的细菌相对应。

具体目标 2：评估接受 FMT 的 PSC 患者的临床反应，比较递送方式（结肠镜检查和胶囊）。

假设：粪便微生物群移植将导致 PSC 患者的肝脏生化指标降低 50%。

具体目标 3：评估胆汁盐代谢组学作为粪便微生物群移植临床反应的治疗性生物标志物。

假设：有毒二级胆汁酸（石胆酸和脱氧胆酸）的产生减少将与粪便微生物群治疗的临床反应相关

主要生理终点：

12

1. 接受者在 FMT 后 12 周的粪便微生物多样性，与使用 16s 核糖体 RNA 的基线相比。

主要临床终点

1. 主要研究终点是与基线相比，治疗 3 个月后血清肝脏生化指标的平均变化。 治疗成功定义为血清碱性磷酸酶、总胆红素、丙氨酸氨基转移酶 (ALT) 或天冬氨酸氨基转移酶 (AST) 改善 50% 或更多。

次要终点代谢组学：样本的胆汁盐概况和粪便微生物组的相关群落结构将被评估为宿主和肠道微生物群之间相互作用的量度。 粪便和血清将使用博德研究所的代谢组学平台进行分析，以胆汁酸为目标。 样品将被送到 Broad 研究所，在那里我们将使用液相色谱串联质谱法 (LC-MS) 来测量粪便上清液中的内源性胆汁盐及其代谢物水平。 如 Saric 等人所述，水溶性代谢物将从粪便中提取，而脂质将使用异丙醇从冻干样品中提取。 水溶性代谢物将使用离子对色谱法和亲水相互作用色谱法进行测量，脂质和胆汁酸将使用 C4 和 C18 反相色谱法进行测量。 MultiQuant 软件 (AB SCIEX) 将用于自动峰积分和在统计分析之前手动检查峰质量。 GenePattern（Broad Institute）和 IPA（Ingenuity Systems）软件将用于分析和可视化结果。

临床终点：

1. Harvey Bradshaw 指数 (HBI) 和 PBC 40 评分在第 0 周和第 1、4、8 和 12 周之间的平均变化。临床缓解患者的百分比（在第 12 周时获得 HBI 评分的患者）
2. 与基线相比，第 12 周梅奥风险评分的平均变化。 PSC 的 Mayo 风险评分 (MRS) 使用以下公式计算：风险 = (0.0295 * (年龄)) + (0.5373 * LN(总胆红素 mg/dL)) - (0.8389 * (血清白蛋白在g/dL)) + (0.5380 * LN(AST in IU/L) + (1.2426 * (静脉曲张出血分数)) 如果您的 Mayo 风险评分小于或等于 0，那么您属于“低”风险组. 如果您的 Mayo 风险评分大于 0 但小于 2，那么您属于“中等”风险组。 如果您的 Mayo 风险评分大于 2，那么您属于“高”风险组。

安全终点：第 1、4、8、12 和 24 周不良事件的数量和性质