COVID-19 粘膜免疫反应分析方法的开发和鉴定 (MUCOVID)

SARS-CoV-2 最初是导致上呼吸道空气传播感染的原因，这种感染到达肺部后会引起严重的急性呼吸道疾病，称为 COVID-19。

生物体对这种病毒侵袭的反应最初是针对呼吸道粘膜的。

这种粘膜反应很复杂，具有不同水平的活动相互作用：机械活动，分泌粘液作为传染原的屏障；物理化学活性，产生有助于病毒颗粒降解的酶和细胞因子；和特异性体液免疫活性，在粘膜水平产生分泌型 IgA 型免疫球蛋白，具有阻止病毒进入宿主细胞的中和活性。

这些先天性和适应性免疫机制及其体液和细胞成分在粘膜屏障功能中发挥着重要作用。 因此，粘膜免疫对于针对呼吸道病毒感染的充分、早期和长期免疫反应至关重要。

SARS-CoV-2 是一种有包膜病毒，具有螺旋衣壳和由大约 30,000 个核苷酸组成的基因组。 该基因组编码病毒粒子形成所必需的几种蛋白质，包括刺突的 S 蛋白和核衣壳的 N 蛋白。

病毒 S 蛋白与宿主细胞的血管紧张素转换酶 2 (ACE2) 结合。 因此，ACE2 作为病毒受体介导病毒进入细胞并触发宿主的免疫反应。 该蛋白 S 是中和抗体反应的主要目标。 蛋白 S 的突变导致了 SARS-CoV-2 变体的出现，这些变体具有不同的表型，影响传播和对抗体的敏感性。

N蛋白是一种高度免疫原性的糖蛋白，也参与病毒复制和细胞信号传导途径的调节。 在病毒体组装过程中，N 蛋白与病毒 RNA 结合并导致螺旋核衣壳的形成。 这种 N 蛋白在所有 SARS-CoV-2 变体中都高度保守，因此可能是针对这种病毒的普遍防御的一个有趣的靶点。

当发生呼吸道感染时，粘膜免疫系统的刺激一方面会引发体液反应，释放分泌性免疫球蛋白，主要是分泌性 IgA。 IgA的主要作用是防止病毒在全身传播。

另一方面，呼吸道感染也会引发主要由T淋巴细胞介导的粘膜细胞反应。

SARS-CoV-2 感染会引发免疫反应，包括血液中抗体的产生（血清抗体）、血液淋巴细胞的刺激以及上呼吸道抗体的产生（粘膜抗体）。 血液中的定量抗 SARS-CoV-2 体液反应（血清抗体）已通过各种测试进行了评估。 然而，目前它主要依赖于 EIA 类型的测试，即抗 S IgG（针对刺突蛋白）和抗 N IgG（针对核衣壳蛋白）的血液水平。 这种反应的定性分析是基于这些抗体具有中和活性（中和抗体）的能力。

抗 SARS-CoV-2 T 淋巴细胞反应似乎对于控制感染也很重要。 评估这种 T 淋巴细胞反应的最快速测试是 ELISPOT IFN-γ

至于粘膜体液反应，一些研究已经证明感染者的鼻咽分泌物或唾液中存在病毒特异性抗 S IgA 抗体（针对刺突蛋白）。 迄今为止，还没有常规测试来测量 SARS-CoV-2 粘膜抗体，特别是分泌性抗 S IgA，并分析其中和活性。

因此，我们的研究将使我们能够开发和鉴定分析 SARS-CoV-2 粘膜免疫的方法。 这些方法对于分析对该病毒的粘膜反应至关重要。

一旦这些分析方法得到验证，它们将能够研究对感染的粘膜反应，以及由 SARS-CoV-2 疫苗接种引起的粘膜反应，特别是在使用鼻疫苗时。

事实上，目前用于对抗 SARS-CoV-2 的疫苗可诱导针对蛋白 S（Spike）的血清中和活性。 它们的肌肉注射途径将诱导全身免疫，提供针对严重形式感染的保护。 然而，当前疫苗诱导的粘膜免疫仍然很低。 鼻腔疫苗的开发是一个有趣的途径，因为它将提供更完整的保护，特别是通过控制病毒在上呼吸道的复制，从而诱导上呼吸道，从而诱导群体免疫并减少病毒的传播。