Probiotisk tilskud hos ammede nyfødte spædbørn

Det foreslåede kliniske fase I-forsøg er et placebokontrolleret, randomiseret, dobbeltblindt, stigende dosisstudie af kosttilskud med Bifidobacterium longum subsp. infantis (B. infantis) hos raske ammede spædbørn for at evaluere dets sikkerhed samt bestemme den farmakologisk effektive dosis (ED) af B. infantis, der producerer mindst 50 % tarmkolonisering ved seks ugers alderen. Spædbørn vil blive tilmeldt sekventielt i grupper på fem (tre randomiseret til at modtage B. infantis og to til at modtage placebo). For hver gruppe vil spædbørn blive doseret med B. infantis eller placebo på dag 7 og dag 14 i livet. En beregnet maksimalt anbefalet startdosis (MRSD) vil blive brugt til at påbegynde dosisoptrapningen og er defineret nedenfor. Hver anden uge vil en yderligere gruppe på fem spædbørn (randomiseret 3:2 til B. infantis og placebo) blive indskrevet til at modtage progressivt højere doser af B. infantis. Beregning af den passende dosiseskalering vil blive udført ved hjælp af en modificeret Fibonacci-serie som beskrevet nedenfor i et forsøg på at identificere ED af B. infantis.

Efter at ED af B. infantis er blevet identificeret (defineret som den dosis, der er i stand til at producere 50 % tarmkolonisering ved seks ugers alderen), vil der blive udført yderligere to sekventielle dosisoptrapninger. Formålet med de sidste to dosiseskalationer er at bestemme, om successivt højere doser af B. infantis resulterer i øget tarmkolonisering eller barrierebeskyttelse; eller alternativt, hvis der findes en maksimal effektiv dosis (MaxED) for B. infantis, over hvilken der ikke er nogen yderligere stigning i tarmkolonisering eller barrierebeskyttelse. Efter den endelige dosisoptrapning vil Hanleys tredieregel blive anvendt for at bestemme, om lavere frekvens bivirkninger er forårsaget af B. infantis. Hanleys regel om tre siger, at for at identificere eventuelle uønskede hændelser, der forekommer med en frekvens på 1:10 eller mere med et 95 % konfidensinterval, skal mindst 30 forsøgspersoner være tilmeldt.

Studiebesøg vil blive planlagt til uge 1, 2, 6, 24, 36, 52 og 78. Forældre vil gennemføre undersøgelser ved hvert studiebesøg for at overvåge spædbørnene for potentielle bivirkninger forbundet med probiotisk administration, herunder fodringsintolerance, feber eller tarm-uregelmæssigheder, herunder forstoppelse og diarré.

Afføringsprøver vil blive indsamlet to gange om ugen i de første seks uger af livet og derefter en gang om ugen i uge 24, 36, 52 og 78. Afføringsprøver vil blive analyseret for at bestemme den relative mængde af B. infantis over tid og den overordnede mangfoldighed af tarmmikrobiotaen med og uden B. infantis-tilskud. Afføring vil også blive analyseret for mælkeoligosaccharider for at verificere forbrug af modermælk og for at korrelere andelen af ​​human mælkeoligosakkarider og frie sukkermonomerer set i spædbørns afføring ved forskellige niveauer af B. infantis kolonisering.

Ved hvert studiebesøg vil spædbørn modtage en fuldstændig hudundersøgelse for at evaluere for tegn på atopisk dermatitis (AD). Infant Dermatitis Quality of Life Index (IDQOLI) vil blive administreret til forældre ved hvert studiebesøg for at screene for mulige tegn på AD såsom spædbørns irritabilitet, hududslæt og overfølsomhed. Hvis AD er til stede, vil SCORAD-graderingssystemet blive brugt til at vurdere sværhedsgraden. Urinprøver vil blive indsamlet ved hvert studiebesøg for at måle niveauer af fedtsyrebindende proteiner (FABP'er) og glutathion-S-transferase (alfa-GST), som er ikke-invasive markører for gastrointestinal permeabilitet, der kan indikere tilstedeværelsen af ​​fødevareallergi. Blod vil blive opsamlet via finger- eller hælpind i uge 6 og 52 til immunfænotypning (inklusive måling af inflammatoriske cytokiner og fødevarespecifikke IgE'er). Derudover vil niveauer af serumfedtsyrebindende proteiner (FABP'er) og glutathion-S-transferase (alfa-GST) blive målt som markører for gastrointestinal permeabilitet og potentiel fødevareallergi. Forældre vil også gennemføre undersøgelser ved hvert studiebesøg for at overvåge spædbørnene for potentielle bivirkninger forbundet med probiotisk administration, herunder fødeintolerance, feber eller tarm-uregelmæssigheder, herunder forstoppelse og diarré.

Deltagelse i undersøgelsen kræver intentionen om udelukkende at amme i minimum seks måneder. Hvis mødre beslutter at afbryde amningen under undersøgelsen, vil efterforskerne bemærke det i spædbarnets skema og få en yderligere serie af ugentlige afføringsprøver i seks uger efter afbrydelse af amning. Formålet med denne ekstra afføringsprøvesamling er at bestemme, om afbrydelse af amning har en indvirkning på niveauet af eksisterende B. infantis-kolonisering i spædbarnets tarm.