Добавление пробиотиков у новорожденных, находящихся на грудном вскармливании

Предлагаемое клиническое исследование фазы I представляет собой плацебо-контролируемое, рандомизированное, двойное слепое исследование в параллельных группах с возрастающей дозой пищевых добавок с Bifidobacterium longum subsp. младенец (Б. infantis) у здоровых детей, находящихся на грудном вскармливании, чтобы оценить его безопасность, а также определить фармакологически эффективную дозу (ЭД) B. infantis, обеспечивающую не менее 50% колонизации кишечника в возрасте шести недель. Младенцы будут включены последовательно в группы по пять человек (трое рандомизированы для получения B. infantis и двое для получения плацебо). В каждой группе младенцам будут давать B. infantis или плацебо на 7-й и 14-й день жизни. Рассчитанная максимально рекомендуемая начальная доза (MRSD) будет использоваться для начала повышения дозы и определена ниже. Каждые две недели будет набрана дополнительная группа из пяти младенцев (рандомизированных в соотношении 3:2 для B. infantis и плацебо) для получения все более высоких доз B. infantis. Расчет соответствующего повышения дозы будет выполняться с использованием модифицированного ряда Фибоначчи, как описано ниже, с целью определения ЭД B. infantis.

После определения ED B. infantis (определяемой как доза, способная вызвать 50% колонизацию кишечника к шестинедельному возрасту) будет проведено два дополнительных последовательных повышения дозы. Цель последних двух эскалаций дозы состоит в том, чтобы определить, приводят ли последовательно более высокие дозы B. infantis к усилению колонизации кишечника или барьерной защите; или, альтернативно, если существует максимальная эффективная доза (MaxED) для B. infantis, выше которой не происходит дальнейшего увеличения колонизации кишечника или барьерной защиты. После окончательного увеличения дозы будет применено правило трех Хэнли, чтобы определить, вызваны ли менее частые нежелательные явления B. infantis. «Правило трех» Хэнли гласит, что для выявления каких-либо нежелательных явлений, возникающих с частотой 1:10 или выше с доверительным интервалом 95%, необходимо зарегистрировать не менее 30 субъектов.

Учебные визиты будут запланированы на 1, 2, 6, 24, 36, 52 и 78 недели. Родители будут заполнять анкеты во время каждого исследовательского визита, чтобы контролировать младенцев на предмет потенциальных нежелательных явлений, связанных с приемом пробиотиков, включая непереносимость кормления, лихорадку или нарушения стула, включая запор и диарею.

Образцы стула будут собираться два раза в неделю в течение первых шести недель жизни, а затем один раз в неделю на 24, 36, 52 и 78 неделе. Образцы стула будут проанализированы для определения относительной численности B. infantis с течением времени и общего разнообразия кишечной микробиоты с добавками B. infantis и без них. Стул также будет проанализирован на олигосахариды молока, чтобы проверить потребление грудного молока и сопоставить соотношение олигосахаридов грудного молока и мономеров свободного сахара, наблюдаемых в стуле младенцев при различных уровнях колонизации B. infantis.

Во время каждого исследовательского визита младенцы будут проходить полное обследование кожи для оценки признаков атопического дерматита (АД). Индекс качества жизни при дерматите у младенцев (IDQOLI) будет вводиться родителям при каждом визите в рамках исследования для выявления возможных признаков БА, таких как раздражительность у младенцев, кожная сыпь и гиперчувствительность. Если присутствует AD, для оценки тяжести будет использоваться система оценки атопического дерматита (SCORAD). Образцы мочи будут собираться при каждом посещении исследования для измерения уровней белков, связывающих жирные кислоты (FABP), и глутатион-S-трансферазы (альфа-GST), которые являются неинвазивными маркерами желудочно-кишечной проницаемости, которые могут указывать на наличие пищевой аллергии. Кровь будет собираться с помощью палочки из пальца или пятки на 6 и 52 неделе для иммунного фенотипирования (включая измерение воспалительных цитокинов и пищевых IgE). Кроме того, уровни сывороточных белков, связывающих жирные кислоты (FABPs) и глутатион-S-трансферазы (альфа-GST), будут измеряться как маркеры желудочно-кишечной проницаемости и потенциальной пищевой аллергии. Родители также будут заполнять анкеты во время каждого исследовательского визита, чтобы контролировать младенцев на предмет потенциальных нежелательных явлений, связанных с введением пробиотиков, включая непереносимость кормления, лихорадку или нарушения стула, включая запор и диарею.

Для участия в исследовании требуется намерение кормить исключительно грудью в течение как минимум шести месяцев. Если матери решат прекратить грудное вскармливание во время исследования, исследователи отметят это в карте младенца и получат дополнительную серию еженедельных проб стула в течение шести недель после прекращения грудного вскармливания. Целью этого дополнительного сбора образцов стула является определение того, влияет ли прекращение грудного вскармливания на уровень существующей колонизации B. infantis в кишечнике младенца.