Probiotisk tilskudd hos nyfødte som ammes

Den foreslåtte fase I kliniske studien er en parallellgruppe, placebokontrollert, randomisert, dobbeltblind stigende dosestudie av kosttilskudd med Bifidobacterium longum subsp. infantis (B. infantis) hos friske spedbarn som ammes for å evaluere sikkerheten, samt bestemme den farmakologisk effektive dosen (ED) av B. infantis som produserer minst 50 % tarmkolonisering ved seks ukers alder. Spedbarn vil bli registrert sekvensielt i grupper på fem (tre randomisert for å motta B. infantis og to for å motta placebo). For hver gruppe vil spedbarn bli doseret med B. infantis eller placebo på dag 7 og dag 14 av livet. En beregnet maksimalt anbefalt startdose (MRSD) vil bli brukt for å starte doseeskaleringen og er definert nedenfor. Hver annen uke vil en ekstra gruppe på fem spedbarn (randomisert 3:2 til B. infantis og placebo) bli registrert for å motta progressivt høyere doser av B. infantis. Beregning av passende doseøkning vil bli utført ved å bruke en modifisert Fibonacci-serie som beskrevet nedenfor i et forsøk på å identifisere ED av B. infantis.

Etter at ED av B. infantis er identifisert (definert som dosen som er i stand til å produsere 50 % tarmkolonisering ved seks ukers alder), vil ytterligere to sekvensielle doseeskaleringer utføres. Hensikten med de siste to doseeskaleringene er å avgjøre om suksessivt høyere doser av B. infantis resulterer i økt tarmkolonisering eller barrierebeskyttelse; eller, alternativt, hvis det eksisterer en maksimal effektiv dose (MaxED) for B. infantis over hvilken det ikke er ytterligere økning i tarmkolonisering eller barrierebeskyttelse. Etter den siste doseeskaleringen vil Hanleys tre regel bli brukt for å avgjøre om lavere frekvens bivirkninger er forårsaket av B. infantis. Hanleys regel om tre sier at for å identifisere eventuelle uønskede hendelser som oppstår med en frekvens på 1:10 eller mer med et 95 % konfidensintervall, må minst 30 forsøkspersoner registreres.

Studiebesøk vil bli planlagt i uke 1, 2, 6, 24, 36, 52 og 78. Foreldre vil fullføre undersøkelser ved hvert studiebesøk for å overvåke spedbarnene for potensielle uønskede hendelser assosiert med probiotisk administrering, inkludert fôringsintoleranse, feber eller tarm-uregelmessigheter, inkludert forstoppelse og diaré.

Avføringsprøver vil bli tatt to ganger ukentlig de første seks ukene av livet, deretter en gang ukentlig i uke 24, 36, 52 og 78. Avføringsprøver vil bli analysert for å bestemme den relative forekomsten av B. infantis over tid, og det generelle mangfoldet av tarmmikrobiota med og uten B. infantis-tilskudd. Avføring vil også bli analysert for melkeoligosakkarider for å bekrefte inntak av morsmelk og for å korrelere andelen av humane melkeoligosakkarider og frie sukkermonomerer sett i spedbarnsavføringen ved ulike nivåer av B. infantis-kolonisering.

Ved hvert studiebesøk vil spedbarn få en fullstendig hudundersøkelse for å vurdere tegn på atopisk dermatitt (AD). Infant Dermatitis Quality of Life Index (IDQOLI) vil bli administrert til foreldre ved hvert studiebesøk for å undersøke for mulige tegn på AD som spedbarns irritabilitet, hudutslett og overfølsomhet. Hvis AD er tilstede, vil graderingssystemet for atopisk dermatitt (SCORAD) bli brukt til å vurdere alvorlighetsgraden. Urinprøver vil bli samlet ved hvert studiebesøk for å måle nivåer av fettsyrebindende proteiner (FABP) og glutation-S-transferase (alfa-GST), som er ikke-invasive markører for gastrointestinal permeabilitet som kan indikere nærvær av matallergier. Blod vil bli samlet inn via finger- eller hælpinne i uke 6 og 52 for immunfenotyping (inkludert måling av inflammatoriske cytokiner og matspesifikke IgE-er). I tillegg vil nivåer av serumfettsyrebindende proteiner (FABP) og glutation-S-transferase (alfa-GST) bli målt som markører for gastrointestinal permeabilitet og potensiell matallergi. Foreldre vil også fullføre undersøkelser ved hvert studiebesøk for å overvåke spedbarn for potensielle bivirkninger forbundet med probiotisk administrering, inkludert matintoleranse, feber eller tarm-uregelmessigheter, inkludert forstoppelse og diaré.

Inngåelse i studien krever intensjon om å amme utelukkende i minimum seks måneder. Hvis mødre bestemmer seg for å avbryte ammingen i løpet av studien, vil etterforskerne merke seg det i spedbarnets diagram og få en ekstra serie med ukentlige avføringsprøver i seks uker etter seponering av amming. Hensikten med denne ekstra avføringsprøvesamlingen er å avgjøre om seponering av amming har innvirkning på nivået av eksisterende B. infantis-kolonisering i spedbarnets tarm.