Harjoittelun vaikutukset systeemiseen tulehdukseen ja lihasten korjaamiseen obstruktiivisen kroonisen keuhkosairauden (COPD) fenotyypin mukaan

TUTKIMUSPOPULAATIO: Potilaat, joilla diagnosoitiin keuhkoahtaumatauti ATS:n (American Thoracic Society) ja SEPARin (Espanjan pneumologia- ja rintakirurgiayhdistyksen) kriteereillä, joilla on keskivaikea tai vaikea hengitysteiden tukos (FEV1 <60 %) ja heidän sairautensa kliininen vaikutus. . Potilaiden tulee saada vakaata ja asianmukaista hoitoa, eivätkä he saa kärsiä taudin pahenemisesta kolmen kuukauden aikana ennen tutkimusta ja ilman oraalista kortikosteroidihoitoa vähintään saman ajanjakson ajan.

NÄYTTEKOKO: Virgen del Rocío de Sevillan sairaalan pulmonologian osastolla diagnosoitu 30 potilasta, tietoinen suostumus.

Otoskoon laskenta: Analysoidaan vaikutuskoko rasitustestissä yli 15 W:lla saavutetun työn parantumisen kustannuksella ja otetaan huomioon tämän parametrin keskihajonna + / - 10 W, mikä mahdollistaa erojen havaitsemisen aineenvaihduntamuuttujissa lihasten välillä. riskit alfa < 0,05 ja beeta < 0, 2 ja laskemalla 15 prosentin menetysprosentilla tutkijat arvioivat otoskoon 15 potilasta kussakin ryhmässä (PC-koko).

TUTKIMUKSESTA POISTUMISKRITEERIT:

• potilaan kliininen dekompensaatio
• Harjoitusohjelman 3 tai 5 peräkkäisen istunnon menetys keskeytettiin.
• Potilaan aloitteesta

RYHMIEN OMINAISUUDET JA OPINTUSUUNNITTELU:

Tämä on mahdollinen tapauskontrolli, jossa on kaksoissuuntautunut ex vivo ja in vitro.

Potilaat eroavat toisistaan ​​keuhkoahtaumatautien "dominanssikeuhkolaajennuksessa" (15 potilasta) tai keuhkoahtaumatautia ilman "pääosin emfyseemaa" (15 potilasta), jotka saavutettiin objektiivisten kriteerien mukaisesti korkean resoluution tietokonetomografian kvantitatiivisille menetelmille.

Tutkimuksessa noudatetaan 13. joulukuuta 1999 annetun lain 15/1999 edellyttämiä ihmiskokeita ja tietosuojan turvallisuustasoja koskevan Helsingin julistuksen suosituksia. Tutkimuksen hyväksyi oppilaitoksemme eettinen toimikunta, ja siihen hankitaan rekrytoitujen henkilöiden tietoinen suostumus.

VUODEN HARJOITUSOHJELMA:

Kaikille potilaille tehtiin koulutusohjelma, joka pidettiin 12 viikon ajan 60 minuutin istunnoissa:

1. .- 20 minuuttia polkupyöräergometriä, jonka alkukuormitustaso on noin 70 % lähtötilanteen huipun hapenkulutuksesta, lisäämällä kuormitusta kahden viikon välein sallitulla tavalla.
2. - Painonnosto kahdessa 6 toiston sarjassa 5 yksinkertaisella harjoituksella. Näitä pidetään multigimnastyc-asemalla (CLASSIC Fitness Center, KETTLER) ja ne sisältävät: tai yksinkertaisen käsivarren taivutuksen (vetokaapeli rintaan "Rintavetoja"): vaikutuksia selkäleveyteen, hartialihakseen ja hauislihakseen. Istu kasvot torniasemaa kohti, lähesty tangoa rintakehään ja ojenna sitten käsiäsi palattuasi lähtöasentoon.

tai yksinkertainen käsivarsien ojentaminen ("Olkalihasten painallus"): Vaikutukset hartialihaksiin ja tricepsiin. Kun istut pystyssä penkillä ja pidät painoa olkapäiden korkeudella, käsivarret ojentuvat pään yläpuolelle ja palaavat hitaasti käsien taivutuksen jälkeen lähtöasentoon.

tai käsivarren koukistus ja venyttely vastusta vastaan ​​(Butterfly "Butterfly"): Vaikutukset rinta- ja hartialihaksiin. Penkillä istuminen pystyssä kyynärvarret ja kyynärpäät vivulla vie sen keskiviivalle ja väistyy hitaasti lähtöasentoon.

tai jalkojen venyttely ("Leg Extended"): Vaikutukset nelipäiseen reisilihakseen. Jalkojen pidennyspenkillä istuminen tapahtuu vastusta vastaan.

tai kyykky ("Leg curls"): Vaikutukset hauis reisiluun ja pohkeisiin. Makaavat makuulla penkillä jalat ovat taivutettuja painoa vasten.

Vastusta nostetaan asteittain 70 %:sta enimmäispainosta, jonka voit nostaa potilaan yhdellä liikkeellä (testi 1RM). Kahden viikon välein maksimipaino arvioidaan uudelleen kunkin potilaan harjoituskuormituksen säätämiseksi.

MUUTTUJAT, NÄYTTEENOTTO JA MITTAUS:

Kaikille potilaille tehtiin lähtötilanne ja harjoitusohjelman jälkeen seuraavat testit.

• Analyyttinen elementaalinen, 12-kytkentäinen elektrokardiogrammi
• Spirometria ja keuhkoputkia laajentava testi yksinkertainen: pidetään Datospir 92:ssa lähtötilanteessa ja 200 mikrogramman salbutamolin antamisen jälkeen
• Verikaasut
• staattiset keuhkotilavuudet (FRC, RV, TLC) pletysmografialla.
• Diffuusiotutkimus (DLCO) yhden hengenvetotekniikalla (laitteisto Masterlab).
• maksimilihaspaineet sekä sisään- että uloshengitykseen käyttämällä erityistä mittaria (Micro Medical, Rochester, USA), joka on yhdistetty paineanturiin ja digitaaliseen tallennusjärjestelmään.
• rintakehän TT (vain lähtötilanteessa): Phillips Tomoscan ja Easy Vision -työaseman versio 4.2, joka mahdollistaa keuhkojen parenkyyman densitometrisen analyysin. Emfyseeman asteen kvantitatiivinen analyysi suoritettiin ohjelmistolla 3D MeVisPULMO (MeVis Research, Research Partner, University of Bremen, Saksa). Tämä on ohjelmiston prototyyppi, joka mahdollistaa toiminnallisen diagnoosin CT-kuvien perusteella ja suhteessa keuhkojen anatomisiin osiin. Sisältää hengitysteiden, keuhkojen, keuhkojen lohkojen ja segmenttien automaattisen segmentoinnin sublobar-lähestymistavan avulla. Tämä ominaisuus tekee siitä erityisen hyödyllisen diagnostiikkaprosessin tehostamiseksi vaikeassa keuhkosairaudessa. Analyysiohjelmisto tarjoaa alueellisen arvioinnin MeVisPULMO mahdollistaa oikeat parametrit mitataan CT-keuhkoissa, kuten: kokonaistilavuus, keskitiheys, pikseliindeksi tai indeksi (7.22).

• Lihasvoiman arviointi:

  1. Testi yksi toistomaksimi (1 RM-testi) mittaa maksimipainon (kg), joka voidaan nostaa yhdellä liikkeellä käyttämällä multigimnastyc-asemaa (Classic Fitness Centre, Kettler, Postfach, USA). Se voi toimia jokaisessa viidestä kehitetystä ylä- ja alaraajojen harjoituksesta (rintaveto, perhonen, olkapääpuristus, jalkojen ojennus ja jalkojen kiharat).

maksimaalinen isometrinen nelipää b.voiman hallitseva. Mukana on erityisesti tätä toimenpidettä varten valmistettu nelituoli (HUR Labs, Sanro) ja dynamometrin kaapelilla (Performance recorder). Tehdään vähintään 3 liikettä, joilla maksimi isometrinen voima kestää 5-10 sekuntia. Ne ovat kelvollisia harjoituksia, joiden vaihtelu on alle 10 %. Suurin arvo otetaan maksimivoimaksi.

• Kehon koostumus: kehon osien rasvaisuus, rasvaton ja kehon vesi arvioitu biosähköisen impedanssin teholla (Bodystat 1500, Isle of Man, Yhdistynyt kuningaskunta). BMI lasketaan jakamalla paino (kg) pituuteen (m2) rasvattomaan massaan, rasvattomaan massaan (FFM) ja rasvaan (FM) mitattuna bioimpedanssilla (). FFM-indeksin (FFMi) suhde lasketaan FFM:stä (kg) ja pituudesta (m2). Lihasmassan menetys määritellään FFM-indeksiksi <16 kg/m2 miehillä ja <15 kg/m2 naisilla.

• Harjoitustesti:

  1. Maksimaalinen kiertoergometrillä ja jo tunnetulla menetelmällä (20), mukaan lukien: hengityskaasujen, hapenkulutuksen, hiilen tuotannon ja epäsuoran anaerobisen kynnyksen, hengitysmallin (minuuttiventilaatio, hengityksen tilavuus, taajuushengitys), elektrokardiografinen seuranta ja pulssioksimetrian määrittäminen harjoitus sykesäädöllä, verenpaineella ja hengenahdistus Borgin asteikolla.
  2. Resistanssisykliergometrin submaksimaali 70 %:n kuormituksella saavutettu äärimmäisessä testissä, jossa vastuksen aikaohjaus ensisijaisesti, kävelty matka ja kyllästys (pulssioksimetria) ja syke saavutettu.
  3. 6 minuutin kävelyn testi ATS:n standardiohjeiden mukaisesti.

• Hengenahduksen ja elämänlaadun arviointi:

  1. Hengenahdistus- ja siirtymänopeusindeksit mittaavat toiminnan heikkenemistä, tehtävän suuruutta ja ponnistuksen suuruutta (Mahlerin testi).
  2. Elämänlaadun arviointi, joka perustuu Guyattin keuhkoahtaumatautipotilaille ehdottamaan erityiseen kyselyyn (CRDQ), jota on muokattu espanjankielisten aiheiden ymmärtämiseksi.
• Tulehduksen ja katabolian merkkiaineiden arviointi: Se suorittaa valkosolujen määrän virtaussytometrialla ja mittaa CRP-tasot verinäytteistä kvantitatiivisella reaaliaikaisella PCR:llä. Erilaisten sytokiinien, IL6:n, IL8:n, IL10:n, IL12:n, TNF-alfan, IGF-1:n ja MIC-A:n ja MIC-B:n havaitseminen verenkierrossa suoritetaan immunosorbenttimäärityksellä (ELISA) käyttämällä spesifistä pakkausta kullekin markkerille.
• Nelipäisen lihaksen biopsia: Biopsiat suoritettiin reiden keskeltä, jolloin otettiin näytteitä nelipäisen lihaksen vastus lateralis -lihaksesta. Näytteet otettiin avohoidossa. Osa biopsioista kiinnitettiin formaliiniin ja sisällytettiin parafiinilohkoihin, ja osa jäätyy nestemäisellä typellä ja säilytettiin -80 °C:ssa myöhempää käyttöä varten geneettisessä ja immunohistokemiallisessa tutkimuksessa.

Valittujen geenien ilmentymisen analysointia varten jatka RNA:n uuttamista kudoksista, jotka on aiemmin jäädytetty nestetypessä. Tätä käytetään Trizol-reagenssina (Invitrogen). Eristetystä RNA:sta suoritettiin käänteistranskriptio käyttämällä Superscript II RNase -kittiä käänteistranskriptaasia (Invitrogen) ja saatua cDNA:ta käytettiin reaaliaikaiseen kvantitatiiviseen PCR:ään. PCR-reaktio suoritettiin käyttämällä fluorokromeja, kuten SYBR Green- tai Taqman-koettimia (Applied Biosystems). Seuraavat arvioidaan niiden geenien perusteella lihastranskriptomiin:

• TNF-alfa ja sen kaksi reseptoria (TNFR-I ja TNFR-II), kaksi isoformia lihaksen IGF-1 (IGF-1EA ja FGM) ja sen spesifinen reseptori (IGF-1R).
• Biogeneesiin liittyvät geenit: Parillinen laatikkogeeni 7 (Pax7), M-kadheriini ja Myo-D.
• Markkerit-solustressivaurio: aikuiset isomuodot demiosina raskaan ketjun, sekä alkion (MyHC-emb) että perinataalisen (MyHC-peri).

Immunohistokemialliset tutkimukset suoritettiin aiemmin 5 um:n parafiinikudoslohkoista. Nämä tutkimukset havaitsevat markkereita, kuten myosiinin raskaat ketjut (MyHC) I ja II (tyypitykseen ja morfometriseen tutkimukseen fibrillaarinen), N-CAM/CD 56 ja Met (satelliittisolujen kvantifiointiin lihaskudoksessa) ja desmiinin (lihasten alkuperän määrittämiseen). ). Toteamiseen käyttämällä standarditekniikkaa immunoperoksidaasi-biotiini.avidiinit (DakoCytomation, Dako Tanska) kullekin markkerille spesifisten vasta-aineiden kanssa.

TILASTOLLINEN ANALYYSI:

Numeeristen muuttujien vertailuun ryhmien välillä käytettiin ei-parametrisia tai parametrisiä testejä niiden jakautumisesta riippuen (varianssianalyysi, Studentin t-testi ja Mann-Whitney). Harjoittelun vaikutuksen analysoimiseksi funktionaalisiin ja morfometrisiin muuttujiin suoritettiin myös prosentuaalisen muutoksen analyysi [(post arvo - arvo ennen / pre-arvo) x 100]. Tarkastellaan eri muuttujien välistä suhdetta Pearson-korrelaatiokertoimien tai Spearmanin avulla niiden jakauman mukaan. Mukana on myös monimuuttujaanalyysi, moninkertainen regressio. Tilastollisesti merkitseväksi katsotaan p < 0,05. Keskiarvon hajonta ilmaistaan ​​keskiarvona ± keskihajonta.