Hyperglykemia ja mitokondrioiden toiminta ihmisten endoteelissä
Tutkimuksen yleiskatsaus
Yksityiskohtainen kuvaus
Koehenkilöt rekrytoidaan mukaanotto-/poissulkemiskriteeriemme mukaisesti. Tutkijat käyttävät monipuolista lähestymistapaa rekrytointiin, mukaan lukien lentolehtiset, yhteisön sanomalehtimainokset, Internet-mainokset ja suora rekrytointi Froedtert Memorial Lutheran Hospital/Medical College of Wisconsinin sisätautiklinikoista, jossa tehtiin noin 50 000 ainutlaatuista avohoitokäyntiä viime vuoden aikana. Sähköistä sairauskertomusta hyödynnetään mahdollisten aiheiden tunnistamiseen HIPAA:n ohjeiden ja Medical College of Wisconsinin käytäntöjen mukaan. Mahdollisille koehenkilöille tehdään fenotyypitys, joka sisältää yksityiskohtaisen sairaushistorian, antropomorfiset mittaukset, verenpaine- ja sykemittaukset sekä verinäytteen mittauksista, jotka sisältävät paastolipidien, glukoosin ja glykosyloidun hemoglobiinin, kreatiniinin ja maksan toimintakokeita. Terveet, ei-DM-potilaat, jotka läpäisevät seulonnan taulukon 2 mukaan luettuna/poissulkemiskriteerien mukaisesti, kirjataan tutkimuspöytäkirjaan.
Yön yli paaston (12 tuntia) jälkeen koehenkilöt tulevat aamulla aikuisten käännöstutkimusyksikköömme (A-TRU), joka on osa Kaakkois-Wisconsinin kliinistä translaatiotutkimusta (8UL1TR000055). Antecubitaalinen suonensisäinen linja asetetaan helpottamaan verensokerinäytteen ottamista hyperglykeemisen altistuksen aikana. Antecubitaalinen suonensisäinen katetri asetetaan helpottamaan endoteelisolujen saamista laskimosta J-lankabiopsialla mitokondrioiden testausta varten. Päätutkija on julkaissut kokemusta J-lanka endoteelisolujen biopsiatekniikasta, ja tekniikka on laajasti validoitu. Ensimmäinen laskimoglukoosinäyte otetaan kyynärpäälaskimosta ja ensimmäinen J-lankabiopsia säteittäisen valtimon endoteelistä tehdään säteittäisen valtimolinjan kautta. Tämän jälkeen koehenkilöitä pyydetään juomaan standardoitua 75 g:n glukoosijuomaa, jonka A-TRU:n ravitsemusterapeutti on luonut – tavallinen oraalinen glukoosihaaste kliinisesti käytettynä. Verensokerinäytteet otetaan tämän jälkeen tunnin välein, kunnes juoman nauttimisen jälkeen on kulunut 4 tuntia. Yksi ja neljä tuntia nauttimisen jälkeen toistetaan J-lanka endoteelibiopsia säteittäisestä valtimosta. Neljä erillistä J-johtoa johdetaan säteittäiseen valtimoon jokaista mittausajankohtaa (0, 1 ja 4 tuntia) kohti.
Ei-diabeettisilla henkilöillä 75 g:n oraalinen altistus indusoi systeemisen glukoosin huipputason nousun 1 tunnin kuluttua annosta, jolloin endoteelin toimintahäiriö on samanaikaisesti havaittavissa. Endoteelisoluja saadaan J-wire-sieppaustekniikalla. Osaa J-langoista eristetyistä endoteelisoluista käytetään mitokondrioverkoston monimutkaisuuden mittaamiseen ennen hyperglykeemistä altistusta, 1 tunti altistuksen jälkeen ja 4 tuntia altistuksen jälkeen. Tutkijat visualisoivat näiden solujen mitokondrioverkostot käyttämällä aiemmin raportoitua ja validoitua immunofluoresenssimenetelmäämme käyttämällä sytokromi c -vasta-aineita mitokondrioiden merkitsemiseen. Verkon pirstoutuminen (suuri luku = suurempi pirstoutuminen ja fissio) kvantifioidaan ImageJ:llä (NIH, Bethesda) lasketulla verkon fragmentaatiomäärällä validoitua protokollaa käyttäen.
Opintotyyppi
Ilmoittautuminen (Todellinen)
Yhteystiedot ja paikat
Opiskelupaikat
-
-
Wisconsin
-
Milwaukee, Wisconsin, Yhdysvallat, 53226
- Medical College of Wisconsin
-
-
Osallistumiskriteerit
Kelpoisuusvaatimukset
Opintokelpoiset iät
Hyväksyy terveitä vapaaehtoisia
Näytteenottomenetelmä
Tutkimusväestö
Kuvaus
Sisällyttämiskriteerit:
- Aikuisten ikä 21-70
- Ei näyttöä metabolisesta oireyhtymästä tai diabeteksesta, verenpaineesta (BP≥140/90) tai korkeasta kolesterolista (LDL≥160) seulonnan aikana.
Poissulkemiskriteerit:
- Aiemmin aivohalvaus, ääreisvaltimotauti tai sepelvaltimotauti (määriteltynä vähintään yhden sepelvaltimon ahtauman esiintymisenä, joka on ≥ 40 % angiografiassa tai vahvistetun sydäninfarktin historian perusteella vakiokriteereillä).
- Verenvuotohäiriöiden historia.
- Todisteita muista ilmeisistä vakavista sairauksista, mukaan lukien krooninen munuaisten vajaatoiminta (plasman kreatiniini > 1,4 naisilla tai 1,5 miehillä), maksasairaus (maksaentsyymit yli 2,5 x normaalit) ja syöpä
- jotka ovat parhaillaan terapiassa tai jotka ovat saaneet hoitoa syöpään vuoden sisällä ilmoittautumisesta.
- Raskaus virtsan koriongonadotropiinin beetatestillä määritettynä
- Tienopyridiini-, anti-trombiini/Xa- tai varfariinihoito seulonnan aikana
- Kolesteroli- tai verenpainelääkkeillä
Opintosuunnitelma
Miten tutkimus on suunniteltu?
Suunnittelun yksityiskohdat
Kohortit ja interventiot
Ryhmä/Kohortti |
Interventio / Hoito |
|---|---|
|
Terveet aiheet
Terveille koehenkilöille, jotka täyttävät sisällyttämiskriteerit, annetaan 75 g glukoosiliuosta kerran (suun kautta).
Koehenkilöt ovat 21–70-vuotiaita, joilla ei ole näyttöä diabeteksesta, verenpaineesta, metabolisesta oireyhtymästä tai korkeasta kolesterolista seulonnan aikana.
Potentiaaliset koehenkilöt, joilla on ollut ateroskleroottinen sairaus, krooninen munuaisten vajaatoiminta (plasman kreatiniini > 1,5 miestä, > 1,5 naista), maksaentsyymiarvot > 2,5x normaalit, raskaana seulonnan aikana, suljetaan pois.
|
Tämä on sama kuin normaali oraalinen glukoosialtistusannos ja kliinisesti annettu reitti
|
Mitä tutkimuksessa mitataan?
Ensisijaiset tulostoimenpiteet
Tulosmittaus |
Toimenpiteen kuvaus |
Aikaikkuna |
|---|---|---|
|
Muutos endoteelisolujen mitokondriaalisen verkon monimutkaisuudessa mitokondriaalisen verkon fragmenttisuhteella mitattuna
Aikaikkuna: Mitattu 0, 1 ja 2 tunnin kuluttua annosta
|
Tutkijat visualisoivat mitokondrioverkoston monimutkaisuuden näissä soluissa käyttämällä aiemmin raportoitua ja validoitua immunofluoresenssimenetelmäämme, jossa käytetään sytokromi c -vasta-aineita mitokondrioiden merkitsemiseen.
Verkon pirstoutuminen (fragmenttien kokonaismäärä / fluoresoivien pikselien kokonaismäärä*100) kvantifioidaan verkon fragmentaatiomäärällä, joka lasketaan ImageJ:llä (NIH, Bethesda) validoitua protokollaa käyttäen.
|
Mitattu 0, 1 ja 2 tunnin kuluttua annosta
|
Yhteistyökumppanit ja tutkijat
Sponsori
Tutkijat
- Päätutkija: Micahel E Widlansky, MD, Medical College of Wisconsin
Opintojen ennätyspäivät
Opi tärkeimmät päivämäärät
Opiskelun aloitus (Todellinen)
Ensisijainen valmistuminen (Todellinen)
Opintojen valmistuminen (Todellinen)
Opintoihin ilmoittautumispäivät
Ensimmäinen lähetetty
Ensimmäinen toimitettu, joka täytti QC-kriteerit
Ensimmäinen Lähetetty (Arvioitu)
Tutkimustietojen päivitykset
Viimeisin päivitys julkaistu (Todellinen)
Viimeisin lähetetty päivitys, joka täytti QC-kriteerit
Viimeksi vahvistettu
Lisää tietoa
Tähän tutkimukseen liittyvät termit
Muita asiaankuuluvia MeSH-ehtoja
Muut tutkimustunnusnumerot
- PRO26013
Yksittäisten osallistujien tietojen suunnitelma (IPD)
Aiotko jakaa yksittäisten osallistujien tietoja (IPD)?
IPD-suunnitelman kuvaus
Nämä tiedot haettiin suoraan verkkosivustolta clinicaltrials.gov ilman muutoksia. Jos sinulla on pyyntöjä muuttaa, poistaa tai päivittää tutkimustietojasi, ota yhteyttä register@clinicaltrials.gov. Heti kun muutos on otettu käyttöön osoitteessa clinicaltrials.gov, se päivitetään automaattisesti myös verkkosivustollemme .