Recherche sur les effets de la consommation aiguë de noix chez les femmes diabétiques obèses (REACT-NUT)

L'obésité est une maladie multifactorielle dans laquelle une accumulation excessive de graisse corporelle entraîne des effets négatifs sur la santé. Elle est considérée comme un problème de santé publique mondial, principalement en raison de son association avec un risque accru de développer d'autres maladies chroniques non transmissibles (MNT). Au Brésil, on estime qu'un quart de la population est obèse, ce qui en fait un facteur de risque important de vieillissement pathologique.

La principale cause de l’obésité est le déséquilibre énergétique entre les calories consommées et dépensées, et sa forte prévalence est associée à l’inactivité physique et au comportement sédentaire. Une alimentation équilibrée, composée d’aliments naturels et peu transformés, est connue pour être essentielle au contrôle du poids. Cependant, dans le scénario actuel, il y a eu une augmentation significative de la consommation d’aliments ultra-transformés et une diminution de la consommation d’aliments naturels et peu transformés, ce qui a eu un impact majeur sur la prévalence de l’obésité.

L'obésité est l'un des facteurs de risque les plus importants du diabète de type 2, une maladie de plus en plus répandue dans le monde et considérée comme l'une des urgences sanitaires du 21e siècle. Le diabète a un impact sur la morbidité et la mortalité et constitue un facteur de risque majeur d'accident vasculaire cérébral, de dysfonctionnement rénal, de maladies cardiovasculaires, de perte de vision et de neuropathie. Les stratégies non pharmacologiques pour contrôler le diabète comprennent généralement une intervention nutritionnelle, une activité physique régulière, l'arrêt du tabac et le maintien d'un poids santé.

Un apport aigu en macronutriments peut induire des réactions indésirables, même chez les individus en bonne santé, pouvant entraîner des effets chroniques au fil du temps. Dans ce contexte, la consommation d'un repas riche en graisses saturées (HSFM) joue un rôle important, car la consommation chronique d'un HSFM est connue pour contribuer au développement de l'obésité, du diabète de type 2, du cancer et des maladies cardiovasculaires, ainsi qu'exacerber inflammation chronique induite par la résistance à l’insuline et le surpoids. De plus, des études montrent que HSFM peut également induire une endotoxémie métabolique et moduler les profils de microARN en circulation. Les microARN sont des molécules d'ARN non codantes d'environ 22 nucléotides de long qui régulent l'expression des gènes au niveau post-transcriptionnel en dégradant l'ARNm ou en inhibant la traduction des gènes cibles. Ainsi, les microARN peuvent contribuer aux effets indésirables du HSFM.

Compte tenu des effets néfastes du HSFM sur la santé, des études ont été menées sur une supplémentation aiguë en aliments aux propriétés anti-inflammatoires et antioxydantes, tels que le jus d'orange et le thé vert, afin de minimiser les effets négatifs d'une alimentation malsaine. Une étude menée par notre groupe de recherche a montré qu'une supplémentation aiguë en thé vert inhibait l'expression de 62 microARN induits par la consommation de HSFM. L'analyse bioinformatique a révélé que ces microARN régulaient les gènes associés aux voies TGF-bêta, CARM1, RSK et BMP. L'identification de ces miARN et de leurs voies moléculaires peut améliorer la compréhension des avantages des composés alimentaires sur la santé et la maladie.

La consommation régulière de noix (Juglans regia) est associée à une meilleure santé cardiovasculaire et à une meilleure réponse insulinique, potentiellement due à la régulation de la réponse insulinique en réduisant l'activité des enzymes digérant les glucides. Cependant, la littérature sur les effets des noix sur les réponses inflammatoires et antioxydantes reste limitée et peu concluante. En outre, il existe un nombre limité d’études portant sur les effets aigus des noix, avec certaines preuves de réponses positives. À cet égard, l’atténuation postprandiale de la résistance à l’insuline, l’amélioration de la fonction endothéliale, le stress oxydatif et la satiété ont été démontrés dans certaines études, mais pas dans toutes. Il est intéressant de noter que Torabian et al. observé que la consommation aiguë de noix augmentait les concentrations plasmatiques de polyphénols, augmentait la capacité antioxydante totale et réduisait la peroxydation lipidique plasmatique.

Outre les preuves limitées concernant les effets aigus des noix, leurs effets en conjonction avec HSFM sur les profils métabolomique et microARN doivent encore être étudiés. La métabolomique a été initialement définie comme la mesure quantitative de la réponse métabolique multiparamétrique dynamique des systèmes vivants à des stimuli physiopathologiques ou à une modification génétique. Ainsi, il reflète directement le phénotype d'un système biologique particulier au niveau métabolique moléculaire, permettant la détection d'altérations de métabolites jusqu'alors inconnus, non caractérisés ou rarement signalés. La métabolomique peut donc générer des connaissances importantes sur les mécanismes des noix dans la prévention et le traitement des maladies. Il en va de même pour l’étude des microARN, qui peuvent aider à identifier les voies intracellulaires liées aux effets bénéfiques de la consommation de noix.

À la lumière de cela, cette étude générera de nouvelles preuves concernant les effets aigus des noix dans l'atténuation des effets indésirables du HSFM. De plus, atténuer les effets indésirables du HSFM pourrait apporter des avantages significatifs, en particulier pour les patients présentant une résistance à l'insuline, tels que les obèses et les diabétiques.

Évaluer si la supplémentation aiguë en noix (Juglans regia) atténue les marqueurs inflammatoires, le stress oxydatif, la métabolomique et les microARN circulants induits par HSFM chez les femmes obèses et diabétiques.

Le projet a été approuvé par le Comité d'Éthique de la Faculté de Médecine de Botucatu. L'étude sera randomisée et croisée, incluant des femmes obèses (indice de masse corporelle [IMC] ≥ 30) et diabète non insulino-dépendant âgées de plus de 18 ans, recrutées lors de consultations ambulatoires à la Faculté de Médecine de Botucatu. Les critères d'exclusion comprendront : l'utilisation de compléments alimentaires, l'utilisation de corticostéroïdes au cours des 3 derniers mois, le cancer, l'insuffisance cardiaque, les maladies rénales, les maladies du foie, les maladies pulmonaires, les maladies neurologiques, l'allergie à l'un des composants du HSFM ou des noix et la consommation habituelle de noix. (≤ 3 fois par semaine) au cours du mois dernier.

La taille de l'échantillon a été estimée sur la base d'une étude précédente qui a montré une réduction de 60 % des niveaux d'IL-6 après des repas HSFM associés au jus d'orange par rapport au groupe témoin (sans jus d'orange). Compte tenu de cette réduction, d'une erreur de type 1 de 5 % et d'une puissance de 90 %, cette étude comprendra 15 individus.

Les patients qui signent le formulaire de consentement éclairé (ICF) seront évalués à deux moments, séparés par une période de sevrage minimale d'une semaine. Lors du premier rendez-vous, après un jeûne de 10 heures, le HSFM sera proposé avec ou sans 30g de noix. Dans le second cas, la condition sera inversée. Ce dosage de noix fait référence à la recommandation de consommation quotidienne de noix proposée par diverses directives diététiques. Une randomisation simple sera effectuée par une infirmière non impliquée dans la recherche. Le HSFM sera fourni dans la clinique externe de l'hôpital et les patients devront consommer tout le repas et toutes les noix. Pendant le protocole d'étude, il sera conseillé aux patients d'éviter la consommation de noix pendant 2 semaines avant la première visite d'étude.

Des échantillons de sang seront prélevés aux points 0 (immédiatement avant le repas), 15 min, 30 min, 60 min et 150 min après les interventions. L'insuline sérique et le glucose seront mesurés aux instants 0 à 60 min, tandis que les biomarqueurs sériques de l'inflammation, du stress oxydatif, des microARN circulants et de la métabolomique seront mesurés aux instants 0 et 150 min. De plus, les enquêteurs évalueront la satiété à l'aide d'une échelle visuelle analogique (EVA) à tout moment après le repas.

Analyse métabolomique Les analyses seront effectuées par chromatographie liquide sur un système Thermo Dionex Ultimate 3000 couplé à un spectromètre de masse Thermo QExactive Plus haute résolution et précis avec ionisation par électrospray fonctionnant en modes d'analyse positif et négatif.

Analyse des microARN circulants Après l'extraction des ARN, les enquêteurs utiliseront le réseau de miARN humains 4.0 Affymetrix GeneChip® (ThermoFisher Scientific), en suivant les instructions du fabricant. Cette matrice contient 2 578 jeux de sondes pour les miARN humains matures et 2 025 jeux de sondes pour les pré-miARN humains (tige-boucle). Des sondes permettant de détecter la présence de snoRNA et de scaRNA (un total de 1 996) sont également incluses dans cette matrice. Les GeneChips seront analysés à l'aide du scanner Affymetrix GeneChip G3000 7G, configuré pour capturer les intensités de signal des miARN. Les données brutes d'intensité seront importées dans la console d'expression Affymetrix (v1.4.1.46) pour le prétraitement du signal, qui comprend la correction de l'arrière-plan à l'aide de l'algorithme robuste de moyenne multi-matrice (RMA), le résumé de polissage médian des sondes pour obtenir les valeurs du signal et la normalisation quantile sur plusieurs matrices. Un appel de détection pour la force du signal miARN sera effectué à l'aide de l'algorithme Affymetrix « Detection Above Background » (DABG), qui génère une valeur p pour chaque signal au-dessus de la probabilité de fond. Cette méthode suivra le protocole recommandé par le fabricant. Les analyses seront menées à Monash chez Hudson Genomics.

Les données d'analyse statistique seront présentées sous forme de moyenne et d'écart type lorsqu'elles sont normalement distribuées, médianes et percentiles de 25 à 75 % lorsqu'elles ne sont pas normalement distribuées, ou sous forme de pourcentages. Pour comparer les deux groupes (avec et sans noix), les enquêteurs utiliseront le test t de Student pour les données normalement distribuées, le test de Mann-Whitney pour les données non normalement distribuées et le test du chi carré pour les comparaisons de variables catégorielles. De plus, les enquêteurs appliqueront des équations d'estimation généralisées (GEE) pour évaluer des mesures répétées. Les analyses de données seront effectuées à l'aide de JAMOVI v 2.3.21, avec un niveau de signification fixé à 5 %.