重度急性栄養失調後の中等度急性栄養失調（SAM MAM後）の子供の管理のための、地元で入手可能な食品成分で作られた微生物叢指向の補完食品（MDCF）を使用したコミュニティベースの臨床試験

バックグラウンド：

主要な世界的な健康問題である中程度の急性栄養失調 (MAM) は、消耗と定義されています (つまり、 WHO Child Growth Standards の <-2 から -3 Z スコアの間の高さに対する体重) および/または上腕周囲 (MUAC) が 115 mm 以上 125 mm 未満。 Global Nutrition Report 2017 によると、2016 年には 5 歳未満の子どもの 8% (5,200 万人) が急性栄養失調に陥り、23% (1 億 5,500 万人) の子どもが発育阻害または慢性栄養失調に陥っています。 2013 年には、南アジアの 5 歳未満の子供の約 6 人に 1 人が MAM を患っていました (つまり、 17%)。 これらの子供たちは、重度の急性栄養失調 (SAM) のリスクが高く、一般的な伝染病による死亡のリスクは、十分に栄養を与えられた子供たちよりも 3 倍高くなっています。 バングラデシュは、世界で最も子どもの栄養失調の負担が大きい国の 1 つです。 バングラデシュ人口健康調査 2014 によると、5 歳未満の子供の発育阻害の有病率は 36% で、そのうち 12% が重度の発育阻害 (LAZ <-3) に苦しんでいます。長さ、WLZ <-2); 200 万人以上の子供が MAM に苦しんでいますが、3% または 450,000 人の子供が致命的な形の SAM に苦しんでいます。 栄養失調により、バングラデシュは推定で年間 10 億ドルの損失を被っています。

WHOの推奨事項によると、MAMの6〜59か月の乳児と子供は、体重と身長の増加と機能回復のための余分なニーズを満たすために、栄養豊富な食品を摂取する必要があります. 現在、MAM の子供を治療するために使用される補助食品の組成に関するエビデンスに基づいた推奨事項はありません。 したがって、低栄養に対処するための介入には、MAM 管理の強力な要素を含める必要があります。 食料不安が蔓延している集団では状況が危機的状況になるため、食料安全保障やその他の開発戦略においてMAMの予防を考慮に入れる必要があります。 したがって、乳児や子供の成長に対する腸内微生物叢の有益な力を少量でも活用できる、地元で入手可能な食品成分に依存する介入を開発することが重要です。

栄養介入の影響を制限する主な要因の 1 つは、栄養失調の子供たちが代謝要求の増加に対応するために摂取量を増やすことができないことです。 Breast Milk, Microbiota and Immunity (BMMI) Project の Jumpstart Phase における icddr,b とセントルイスのワシントン大学の Gordon Lab との共同研究で、細菌の 16S rRNA (リボ核酸) データセットにランダム フォレストを適用しました。バングラデシュのダッカの都市スラムに住む子供たちの出生コホートから得られた毎月の糞便サンプルから生成されます。 これらの子供たちは一貫して健全な成長を示しました (WLZ -0.32+0.98)。 細菌株は、生後 2 ～ 3 年の間に集合するため、その比例表現が健康な腸内微生物叢を定義することが特定されました。 バングラデシュの重度の急性栄養失調の子供たち（SAM ）、微生物叢の未熟性は不完全であり、一時的にのみ改善されることが観察され、追跡期間中、子供たちは著しく発育不全で低体重のままでした. バングラデシュの MAM の子供たちも、SAM の子供たちほど深刻ではありませんが、微生物叢の未熟さを示しました。 したがって、微生物叢の未熟性は、低栄養のリスクがある乳児を特定し、治療および予防戦略を監視するための潜在的なバイオマーカーとして機能します。 ERC によって承認された以前の研究 (PR-09023) では、Mirpur のスラム街に住む健康な子供たちの腸内微生物叢を、重度の急性栄養失調の治療のために入院した子供たちと比較しました。 微生物叢は、16S リボソーム RNA シーケンスによって評価されました。 SAM の子供の腸内細菌叢は、健康な子供の腸内細菌叢よりも時系列的に遅れていることがわかりました。 たとえば、SAM の 2 歳の子供は、1 歳の健康な子供と同様の腸内微生物叢を持っている可能性があります。 これは、腸内細菌叢の未熟性として知られています。 この腸の未熟さを表す2つの指標を開発しました - 相対微生物叢成熟度指数と微生物叢の年齢Zスコアです。 SAM は、栄養介入後に部分的にしか改善されない重大な相対微生物叢の未熟性と関連しています。 .

私たちは最近、文化的に関連性があり受け入れられる米、レンズ豆、ひよこ豆など、地元で入手可能な食品成分を使用して、すぐに使用できる治療用食品を開発しました。 私たちが開発したバングラデシュのひよこ豆ベースと米レンズ豆ベースの RUTF (Ready To Use Therapeutic Food) は、市販のピーナッツ ベースの RUTF と同じくらい効果的であり、子供たちによく受け入れられていることが、二重盲検 RCT (無作為化対照試験) を通じてわかりました。サムで。 上記のRCTと過去7〜8年間に実施された臨床トランスレーショナル研究の組み合わせにより、成長を促進する年齢差別的な有益な微生物叢と、これらの有益な微生物叢の増殖をサポートする地元で入手可能な食品成分を特定しました. さらに、ワシントン大学ゲノム科学センターで行われたノトバイオート動物に関する以前の研究では、ダッカで行われた研究から得られた食品成分 (ひよこ豆、大豆粉、ピーナッツ、緑のバナナ) の組み合わせは、敬意を持って研究する価値があることを示唆しています。成長を差別する微生物叢の増殖を刺激すること、およびコストと持続可能性に対する食事の影響に。

最近、IRB が承認した研究、「微生物叢の未熟性を修復し、官能的な受容性を確立する能力について、主要な微生物叢指向の補完食品 (MDCF) プロトタイプを最適化するための概念実証前の臨床試験」(PR-16099) を成功裏に完了しました。 このパイロット研究の主な目的は、特定の補完食品が、成長促進効果で知られている腸内微生物叢の特定のメンバーの増殖を刺激することにより、MAM に苦しむ幼児に有益な効果をもたらすという概念の事前証明を実証することでした。 . そのパイロット研究では、微生物叢-年齢 Z (MAZ) スコアと、特定の身体システムに対する腸内細菌叢の良好なメンバーの増殖の影響を調査しました。 この研究は、地元で生産された 3 つの MDCF プロトタイプ (MDCF-1、MDCF-2、および MDCF-3) と、地元で生産された米レンズ豆ベースの RUSF の効果をテストするために設計されました。 Pre POC パイロット試験の結果は、3 つの MDCF の 1 つ (すなわち MDCF-2) が、長骨の発達、脳の発達、および生産の増加に重要な役割を果たす特定のアミノ酸のレベルの増加と関連していることを最終的に示しました。 IGF-1 (インスリン様成長因子-1) は、子供の成長の生物学における重要な要素です。 また、腸内微生物叢の成長促進メンバー、例えばフェカリバクテリウム・プラウスニッツィーの成長を刺激するのにも効果的です。 この Pre-POC パイロット試験の結果に基づいて、最も有望な MDCF-2 を使用して Post-SAM MAM 子供の管理に関するより大規模な臨床試験を計画しており、主要エンドポイントは直線的な成長です。

研究のデザインと方法 私たちは、ポスト SAM MAM (WLZ <-2 ～ -3) の生後 12 ～ 18 か月の子供を対象に、約 2 年間にわたって臨床試験を実施します。 この試験は、ダッカ市のミルプール地区にあるバウニアバッドと RADDA MCH-FP クリニック、およびクリグラムのテレ デ オム (TdH) が運営する特別栄養ユニット (SNU) で実施されます。 TdH SNU が選択されたのは、登録を迅速に行いたいためであり、そこでの作業実績が良好です。ローカル RUTF で実施した最後の有効性試験も、部分的にそこで実施されました。 子供は、事前に指定された包含基準に従って、フィールドリサーチアシスタント（FRA）による世帯調査を通じてスクリーニングおよび登録されます。 登録基準を満たし、両親または法定後見人から研究参加の同意を受け取った時点で、それぞれの母親/保護者と一緒に子供が登録され、コンピューターで生成された乱数に従って 2 つのアームのいずれかにランダムに割り当てられます。 割り当てられた食事タイプのコードは、個人ごとに密閉された不透明な封筒に保管され、介護者が同意書に署名した場合にのみ開封されます。 この試験は、一般的な薬物試験には該当しません。 ただし、この試験をいずれかのフェーズで検討する場合は、フェーズ II に分類されます。これは、微生物叢の年齢 Z スコアへの影響と悪影響を調べるパイロット試験を既に行っているためです。

まず第一に、4-8 日間の安定期があり、その間、各子供は SAM の管理に関する WHO (世界保健機関) / icddr,b ガイドラインに従って管理されます。 これには、プログラムされた給餌、微量栄養素の補給、賢明な水分補給、広範囲の抗生物質治療、合併症の迅速な認識と管理が含まれます. 安定期からの回復後、栄養リハビリテーションは約 2 週間継続され、その間、地元の食事であるハルワとキチュリに基づく icddr,b 標準ケア食事プロトコルが提供されます。 SAM から MAM に卒業すると (浮腫のない WLZ <-2)、子供は 2 つのアーム (ライスレンズ豆ベースの RUSF および MDCF-2) のいずれかにランダムに割り当てられます。

無作為化後の栄養リハビリテーション コンポーネントには 3 つのフェーズがあります。 第 1 段階では、ミルプールとクリグラムに設置された栄養センターで 1 か月間、1 日 2 回のオンサイト給餌が行われます。 第 2 段階では、栄養センターで 1 回、家庭で 1 回子供たちに食事を与えます。 第 3 段階では、子供たちは自宅で 1 日 2 回食事を与えられます。 子供たちは、介入後の段階で4週間観察されます。 研究期間全体を通して、人体測定データ、食物多様性データ、およびサンプル (血液、便、尿) が収集されます。 すべての研究参加者の食事介入中に食物頻度アンケートを使用して、過去24時間にわたる毎週の質的な食事摂取データを収集します。

無作為化 子供たちがMAM状態に達する安定化および栄養リハビリテーション段階の後、2つのアーム（ライスレンズ豆ベースのRUSFおよびMDCF-2）のいずれかにランダムに割り当てられます。 割り当てられた治療の種類のコードは、登録された子供に割り当てられるまで、閉じた不透明な封筒に保管されます。

アーム 1- 米レンズ豆ベースの RUSF (理論的根拠: ポスト SAM、MAM のケアの参照標準; 子供の成長と腸内微生物叢への影響に関する知識に基づく) アーム 2- MDCF-2 プロトタイプで、粉末化されていない 4 つの補完的な食品成分を含む牛乳 (理論的根拠: 最近完了した成長促進微生物叢と成長へのプラスの効果に関する POC 前の臨床試験から得られた証拠を提示してください)。

リクルート、スクリーニング、および同意 SAM の子供は、icddr,b ダッカ病院、ミルプールの RADDA-MCH-FP クリニック、クリグラムの TdH の SNU での直接の観察とスクリーニング、およびミルプールとミルプールのコミュニティでのスクリーニングを通じて特定されます。クリグラム地区のサダル、ウリプール、チルマリ ウパジラ。 安定化ケアが必要な人は、SAM の急性期治療の標準治療が提供される上記の施設に入院します。 簡単に言えば;この安定化ケアは、プログラムされた給餌、微量栄養素の補給、賢明な水分補給、広範囲の抗生物質治療、および合併症の迅速な認識と管理に基づいています。 その後、栄養リハビリテーションのための標準的な食事プロトコルで治療されます。 MAMを卒業すると、SAM後のMAM試験のMAM基準を満たす子供の親は、研究への登録についてアプローチされます。 訓練を受けたフィールド リサーチ アシスタント (FRA) が研究について詳細に説明し、保護者からの質問に答え、子供を研究に登録するよう保護者に勧めます。

研究の開始時に、人口統計学的特徴に関する情報が求められ、FRA は、2 g 精度のデジタル スケール (Seca、モデル 728、ドイツ)、長さ (インファントメーター、Seca、モデル 416、ドイツを使用) を使用して子供の体重を記録します。 ）、および上腕の周囲を最も近い mm まで（非ストレッチ挿入テープを使用）。 人体測定は、標準的な手順に従って行われます。 MDCF / RUSFの摂取を確実にするために、研究参加者は栄養療法のために指定された栄養センターに来るように求められます。 彼らには診療所のスタッフに連絡するための電話番号が提供され、スタッフのメンバーは、必要に応じて事前に手配して、栄養療法を直接観察するために家族の家庭を訪問することができます. 栄養リハビリテーション後の 3 か月間の MDCF-2 または RUSF のプログラムされた給餌を図に示します。

MDCF-2 と RUSF の準備:

上記の Pre-POC 研究で特定された補完的な食品成分の互換性のある組み合わせに基づいて、臨床研究に十分な量の Mirpur および Kurigram の icddr,b 食品加工施設で、MDCF-2 および RUSF を準備します。 2 つの食事は、エネルギー密度と微量栄養素の含有量が一致します。 MDCF-2 のエネルギー密度は 125 kcal/25 g (1 食分あたり) を目標とし、カロリー分布は脂肪から 45 ～ 50 パーセント、タンパク質から 8 ～ 10 パーセントを目標としています。 MDCF-2またはRUSFの2食分は、有益な微生物叢の増殖のための基質を提供することに加えて、250 Kcalと必要な微量栄養素を提供します. サービングは、これらの子供たちが自宅で受ける通常の食事に追加することを目的としています. 母親/主介護者は、子供の現在の食事と母乳育児の慣行を維持するようにアドバイスされます.

MDCF-2 プロトタイプの開発実験と官能特性の評価は、Pre-POC 臨床試験で行われました。

調理中に予想外の汚染や栄養素の損失が発生しないように、食品は毎日調理されます。 生の食材は地元の市場から慎重に調達し、合理的な量で保管しますが、MDCF-2 と RUSF が準備されるのと同じ日に準備、分配、子供たちへの給餌を行います。

原料（お米・レンズ豆・ひよこ豆）をお預かり後、異物・雑穀・種（あれば）を取り出し、素焼きのフライパンで焙煎いたします。 120～130℃で焙煎温度を保ちます。 通常、各原料100gを焙煎するのに8〜10分かかります。 単一の種子/穀物を確実に焙煎するには、継続的な攪拌が不可欠です。 焙煎が終わったら、冷ましてから挽いていきます。 粉末を取り、ストレーナーを使用して濾します。 4～5回濾した後、微粉末を他の材料（粉乳・油）と混ぜ合わせます。 砂糖もすりつぶし、微粉末を混ぜ合わせます。 最後に、事前に計量したプレミックス パウダーを追加します。 丸ごとグリーンバナナの加工は、他の原料とは異なります。 皮付きの青バナナを深鍋に入れ、沸騰したお湯（100℃～110℃）に入れ、柔らかくなるまで約17～20分茹でます。 緑のバナナは皮をむき、白い部分を取り、小さくすりおろします。 次に、鍋に入れ、冷まします。 バナナの小片をスプーン/ハンドクラッシャーで粉砕します。 他のすべての成分の重量が記録されます。 潜在的なレシピは、電気ブレンダーですべての材料を混合することにより、小さなバッチで作成されます。 さまざまな段階での食品の準備、つまり、焙煎、粒子サイズの縮小、均一な混合、および栄養センターへの供給は、icddr,b 調査員によって監視されます。 調理中に予想外の汚染や栄養素の損失が発生しないように、食品は毎日調理されます。 生の食材は地元の市場から慎重に調達し、適度な量を保管しますが、MDCF と RUSF が準備されるのと同じ日に準備、調剤、子供たちへの給餌を行います。

給餌セッション:

子供と母親/保護者は、できれば最初の 1 か月間、できれば毎日午前 9 時から 11 時と午後 3 時から 5 時の間に、サイトに設置された栄養センターに来るように求められます。 母親は、観察された食事時間の 2 時間前に食物と母乳を与えないように要求されます。 子供には、無作為化によって決定された 1 回分あたり 25 グラムの MDCF-2 または RUSF が提供されます。 母親は、以下で説明するように、子供が食べることを拒否するまで、子供に事前に計量した食事をスプーンで与えるように求められます. 2 分間休止した後、再度拒否するまで、同じ食事をもう一度提供します。 2 回目の 2 分間の休止の後、再度拒否されるまで、3 回目の食事が提供されます。 この 3 回目の拒否の後、給餌エピソードは「終了」と見なされます。 摂食時間（間にある「休憩時間」を除く）をストップウォッチで記録し、摂食時間の合計を記録します。 この給餌エピソードは最大 60 分間続きます。 測定された量の普通の水も与えられ、この 60 分間の食事時間中に摂取された水の量が測定されます。 給餌エピソードは、訓練を受けた研究担当者の直接監督の下で行われます。 子供が食べ物から頭を離したり、泣いたり、口を挟んだり、歯を食いしばったり、動揺したり、食べ物を吐き出したり、飲み込むことを拒否したりすると、それ以上の摂取を拒否したとみなされます. 実際に摂取した MDCF-2/RUSF の量は、提示された量から残りを差し引いて計算するか、自宅で食事をしたときに母親に尋ねて計算します。 登録された子供たちは、可能性のある副作用/有害事象（例： 発疹、食物アレルギーによる蕁麻疹または臨床状態の重大な変化）を1週間。 副作用/有害事象が観察された場合は、標準治療に従って治療されます。 RUSF と MDCF-2 の品質を管理するために、標準化された製造手順に従います。 すべての子供は、最初の 4 週間、栄養センターで 1 日 2 回 25 グラムの食事を提供されます。 翌月、子供は栄養センターで 25g の食事を提供され、さらに 25g が自宅で給餌するために清潔な容器で提供されます。 3 か月目は、25 グラムの食事が入った 2 つの別々の容器が、参加者の家で登録された各子供に毎日提供されます。 母親から摂食情報を収集し、残されたものから摂取量を測定します。 食品は無菌容器に保管し、給餌セッションの間は室温に保ちます。 食品の品質は、調理済み食品のサンプルを icddr,b で 2 か月ごとに微生物とカビについて検査することによって保証されます。 テスト用に選択されたサンプルには、調理後 2 時間および 6 時間保存された食品が含まれます。 サンプルは、デリーの SGS ラボラトリーズで 6 か月ごとにアフラトキシンの検査も行われます。

この研究では、WHOの成長参照基準と比較して、人体測定によって栄養状態が評価されます。 研究の開始時に、人口統計学的特徴（家族の富、住居の基準、家族構成、親の特徴など）に関する情報が求められ、FRAは2g精度のデジタル体重計を使用して子供の体重を記録します（Seca、モデル 728、ドイツ)、長さ (インファントメーター、Seca、モデル 416、ドイツを使用)、および上腕の円周中央部を最も近い mm まで (非ストレッチ挿入テープを使用)。 人体測定は標準的な手順に従って行われ、すべての測定は 3 回行われ、平均値が記録されます。

糞便サンプルの収集 安定化の急性期では、糞便サンプルは隔日で収集されます。 リハビリ段階では、毎週の糞便サンプル (1 ～ 2 g) は、最近使用された窒素乾燥荷送人検体収集 SOP (標準操作手順) を使用して、生産から 30 分以内に収集されます (自宅で、icddr に戻されます)。 Pre-POC 臨床試験 (付録 A)。 標本は、微生物叢の成熟度（MDCF-2およびRUSFによる治療の中止前、中止中、中止後に測定）およびPCRに基づく評価のために、各研究の終わりにゴードン研究所に送られる前に-80℃で保存されます。糞便サンプル中の腸内病原体負荷 (MDCF-2 処理の前後に測定)。 全研究期間中の異なる時点で、合計12の糞便サンプルが各子供から収集されます。 62 人の研究参加者/アームを想定すると、合計 1488 の糞便検体がこの研究で収集されます。 それに加えて、安定期の開始時に母親から 2 gm の糞便サンプルを採取します。

尿サンプルの収集 合計 7 つの尿サンプル (各 2 ml) が、研究期間全体の異なる時点で各子供から収集されます。 62 人の研究参加者/アームを想定すると、合計 868 の尿サンプルがこの研究で収集されます。 それに加えて、安定期の開始時に母親から 5 ml の尿サンプルを採取します。

血液サンプルの収集 合計 4 つの血液サンプル (各 2 ml) が、研究期間全体の異なる時点で収集されます。 それぞれが、介入前の安定化段階の開始時にすべての子供から収集されます。介入の最初の月の終わりと介入が完了した直後。

62 人の研究参加者/アームを想定すると、合計 496 の血漿サンプルがこの研究で収集されます。 それに伴い、安定期の開始時に母親から 5 ml の血液サンプルを採取します。

母親の栄養状態は、子どもの栄養状態と関連していることが、8 か国の MAL-ED 研究の結果で示されています。 さらに、出生前および母体の要因は、年齢に対する身長の低下の初期の決定要因であり、それらの寄与は生後 24 か月を通して重要なままでした。 そのため、母親の身長と体重を記録します。 母親の生物学的な栄養状態を理解するために、便、血液、尿の登録サンプルを母親に尋ねます。 これらのサンプルは、腸内細菌叢とプロテオミクスについて分析され、結果は登録された子供たちの結果と相関します。

人体測定 お子様の年齢は、書類 (出生証明書または予防接種カードがある場合) またはお子様の生年月日に関する保護者の報告書と照らし合わせて確認されます。 長さは 0.1 cm 感度のインファントメーターで測定されます。 体重は、2gに敏感な天秤（SECA 7281321009、ハンブルグ、ドイツ）によって測定されます。 年齢に対する長さ (LAZ)、長さに対する体重 (WLZ)、および年齢に対する体重 (WAZ) の Z スコアは、Multicenter Growth Reference Study (MGRS) WHO の成長基準に従って計算されます。 浮腫は、両足の甲側を 3 秒間押して検査します。 TALC MUACテープ（英国）を使用して上腕周囲（MUAC）を測定します。 測定機器の定期的な標準化は、訓練を受けたフィールド リサーチ アシスタントによって標準を使用して毎日行われます。

血漿および糞便サンプルの分析 この試験で収集された血漿サンプルは、セントルイスのワシントン大学のゲノム科学およびシステム生物学センターにある Jeffrey Gordon 博士の研究室に送られます。 高度な質量分析法およびイムノアッセイベースの方法を使用して、腸内微生物叢の未成熟の役割と、この未熟性を鉛微生物叢指向の補完食品（MDCF-2）で急性修復しようとすることのバイオマーカーおよびメディエーターに対する影響についての新しい知識を得る。健全な成長。 対照群（すなわち、参照RUSF標準を消費するもの）との比較が行われます。 胆汁酸や短鎖脂肪酸 (SCFA) などの血漿および/または糞便サンプル中の特定の分析対象物をプロファイリングするために、ターゲット超高速液体クロマトグラフィー - 質量分析 (UPLC-MS) およびガスクロマトグラフィー - 質量分析 (GC-MS) が使用されます。 );ミトコンドリア機能のマーカー（例：β-ヒドロキシブチレート、アシルカルニチン/アシルCoAs、TCAサイクル中間体）;血清および糞便サンプル中のアミノ酸 [分岐鎖アミノ酸、細菌のトリプトファン代謝によって生成されるものを含む、成長および炎症状態に関連するトリプトファンおよびトリプトファン代謝物 (例: インドール酢酸誘導体）］。 さらに、直線的な成長 (成長ホルモンや IGF-1 など)、エネルギー利用 (インスリン、レプチン)、および骨生物学 [IL-6 (インターロイキン-6)、オステオプロテゲリン、 I型コラーゲン（CTX、破骨細胞活性/骨吸収のマーカー）、およびI型プロコラーゲンのアミノ末端プロペプチド（P1NP、骨芽細胞活性/骨形成のマーカー）]、および全身性炎症（CRP、AGP）確立された ELISA/Luminex アッセイを使用して定量化されます。 血液中のタンパク質は、1300 以上の異なるタンパク質の識別を可能にする SOMAlogic スキャンを使用して識別されます。 ダッカで行われた以前の Pre-POC 試験で、SAM の子供の血漿サンプルで行われたプロテオミクス研究では、SOMAlogic スキャンを使用して、特定のタンパク質と臨床表現型との間に多くの重要で臨床的に関連する関連性がすでに実証されています。

収集された情報は、無菌動物に移植するためのヒトの糞便サンプルを選択するために使用されます。これらの動物は、人間の微生物叢のドナーの食事を与えられ、MDCF-2 プロトタイプ、腸内微生物叢、および宿主の生理学/代謝を結びつけるメカニズムをさらに特徴付けるために使用されます。 さらに、これらの血漿および糞便のバイオマーカーは、MDCF-2 が微生物叢の未熟性の修復を促進し、子供の生物学的状態を改善することを決定するために使用されます。

サンプルサイズの計算 さまざまな MDCF の POC 前の試験では、MDCF2 (微生物叢指向の補完食品 2) を摂取した子供のベースライン体重対体長 Z スコアは -2.2 で、1 か月の補給後は -1.7 でした。 ベースラインで WLZ -2、エンドラインで -1.7、プールされた SD (標準偏差) を 0.53 と考えると、サンプル サイズは 80% の検出力と 5% の有意水準で各アームで 49 です。 20% の減少で、62 人の子供が各アームに登録する必要があります。 したがって、この試験では、62 人の子供が MDCF-2 を受け取り、62 人の子供が米レンズ豆 RUSF を受け取ります。

データ分析：

Post SAM-MAMの子供の2つのグループは、試験デザインの図に示すように、ベースラインと異なる時点で比較されます。 比較のための臨床転帰変数には、体重増加率、人体測定指数、および罹患率が含まれます。 「血漿および糞便サンプルの分析」セクションで言及されているすべての分析物は、MDCF-2 グループと RUSF グループの間で比較されます。

人権保護のための倫理的保証 IRB (Institutional Review Board) icddr,b Research Review Committee および Ethical Review Committee による承認を得て、研究を開始しました。 研究に登録する前に、研究参加者の法定後見人からインフォームド・書面による同意を得ている。 入学手続きやその他の学習手続きの際に取得した個人識別情報は、厳重に保管されています。

このプロトコルで予想されるリスク/有害事象は、血液サンプルの収集、糞便サンプルの収集、および微生物叢向けの補完食品の供給に関連するものです。 これらのいずれも、重大な有害事象 (SAE) とは見なされません。 採血に関連して予想される有害事象 (EAE) は次のとおりです。

• 不快感
• 痛み
• 感染症の導入
• 出血

• 失神またはあざ

  • 静脈穿刺部位を消毒し、滅菌器具を使用することにより、感染の導入を避けるための予防措置が講じられます
  • 出血やあざのリスクは、静脈穿刺後すぐに圧力をかけることで最小限に抑えられます。
  • 参加者（子供）は、失神による怪我を避けるために、採血中は座位または仰臥位になります

考えられるすべての有害事象は適切に治療されます。 これらには以下が含まれます。

• 嘔吐
• 下痢
• 皮膚発疹
• 食物アレルギーによる蕁麻疹
• 腹部膨満
• 腹部痛 有害事象の評価 重篤な有害事象と重篤でない有害事象の両方について、重症度が評価されます。研究参加との関係;行った活動;そして結果。 すべての SAE は、サイトがイベントを認識してから 24 時間以内に icddr,b の ERC (倫理審査委員会) に報告する必要があり、それがスポンサーに配布されます。 これは、直通電話、ファックス、または電子メールによって行われます。

icddr,b 有害事象が発生した場合、IRB 推奨ガイドラインに従って、有害事象の等級付けを行います。

重大度：

1. 軽度
2. 適度
3. ひどい

治験参加との関係：

1. 確実に関連:明確な一時的関連、他に考えられる原因なし
2. 関連の可能性: 一時的な関連付けが明確でない、他の原因が考えられる
3. 無関係: 研究とは無関係に、イベントが別の病因に確実に関連しているという証拠が存在する

行動：

なし 治療（複数回の投薬が必要） 研究への参加を永久に中止 入院 その他

結果:

解決済み 継続中の未知の共同協定 このプロジェクトは、ワシントン大学医学部の研究者とバングラデシュの国際下痢症研究センター (icddr,b) との間の共同作業です。 臨床研究、フィールド活動はバングラデシュのダッカとクリグラムで主任研究者の直接の監督の下で行われ、実験室での分析はセントルイスのワシントン大学のゴードン研究所で行われます。 すべての研究ユニットと共同研究者は、国際協力の長い歴史を持っています。 すべての研究者は、このプロジェクトの開発中に連絡を取り、その実装の成功に取り組んでいます。

利用可能な設備 icddr,b には設備の整った食品加工ラボがあり、ダイエット レシピの実験を容易にします。 Mirpur の Baoniabad 地域で進行中の調査があります。 多くのプロジェクトオフィスがそこにあります。 さらに重要なことは、コミュニティとの良好な関係を築いていることです。 裁判の一部が行われるKurigramでSNUを運営するTerre des Hommes。 過去にSNUの開発に協力し、そこで研究を行ってきました. SNU はコミュニティで高い評価を得ています。

セントルイスのワシントン大学ゲノム科学センター:

糞便サンプルは icddr,b で等分されます。 糞便サンプルは、ハイスループット 16S リボソーム RNA 遺伝子配列決定のために、セントルイスの Jeffery Gordon 教授の研究室に送られます。 MDCF-2治療前後の便サンプル中の広範囲の腸内病原体の存在/存在量は、PCR（ポリメラーゼ連鎖反応）ベースのアッセイを使用して決定されます。 糞便サンプルは、Gordon Lab のノトバイオート マウスでの将来の研究で使用するために、構成細菌株を培養するためにも使用できます。 ここで言及することは、それらを実行するためのアッセイと機器が現在、セントルイスのラボを含む世界のいくつかのラボでのみ利用可能であることを言及するのに適切です. センターは、比較ゲノミクス、統計ゲノミクス、およびシステム生物学に焦点を当てた複数の学校からの学際的、多部門、多世代の研究者チームの本拠地です。生物科学、物理学、計算科学、および工学科学の境界で働きたいと考えています。