중증 급성 영양실조 후 중등도 급성 영양실조(Post-SAM MAM) 어린이 관리를 위해 현지에서 구할 수 있는 식품 성분으로 만든 미생물군 지향 보완 식품(MDCF)을 사용한 지역사회 기반 임상 시험

배경:

중등도급성영양실조(MAM)는 세계적인 주요 건강 문제로, 소모성(즉, WHO 아동 성장 표준의 <-2와 -3 Z-점수 사이의 키에 대한 체중) 및/또는 115mm 이상 125mm 미만의 중간 상완 둘레(MUAC). 2017년 글로벌 영양 보고서(Global Nutrition Report 2017)에 따르면 2016년 전 세계적으로 8%인 5200만 명의 5세 미만 아동이 급성 영양실조에 걸렸고 발육부진 또는 만성 영양실조에 걸린 아동은 23%인 1억 5500만 명이었습니다. 2013년 남아시아의 5세 미만 어린이 6명 중 약 1명이 MAM으로 고통 받았습니다(즉, 17%). 이 아이들은 심각한 급성 영양실조(SAM) 위험이 높으며 영양 상태가 좋은 또래 아이들보다 일반적인 전염병으로 사망할 위험이 3배 더 높습니다. 방글라데시는 세계에서 아동 영양실조 부담이 가장 높은 국가 중 하나입니다. 2014년 방글라데시 인구통계학적 건강 설문조사에 따르면 5세 미만 아동의 발육부진 유병률은 36%이며, 그 중 12%는 심각한 발육부진(LAZ <-3)을 앓고 있습니다.1 약 15%의 아동이 쇠약해지고 있습니다(체중- for-length, WLZ <-2); 200만 명 이상의 어린이가 MAM을 앓고 있으며, 3%인 450,000명의 어린이가 치명적인 SAM을 앓고 있습니다. 영양실조로 인해 방글라데시는 연간 약 10억 달러의 손실을 입습니다.

WHO 권장 사항에 따르면 MAM이 있는 6-59개월 영유아는 체중 및 키 증가와 기능 회복에 대한 추가 요구를 충족하기 위해 영양이 풍부한 식품을 섭취해야 합니다. 현재 MAM이 있는 어린이를 치료하는 데 사용되는 보충 식품의 구성에 대한 증거 정보에 입각한 권장 사항은 없습니다. 따라서 영양결핍을 해결하기 위한 개입에는 강력한 MAM 관리 요소가 포함되어야 합니다. 식량 불안이 만연한 인구에서 상황이 심각해짐에 따라 식량 안보 및 기타 개발 전략에서 MAM 예방을 고려해야 합니다. 따라서 소량으로 영유아 성장에 장내 미생물의 유익한 힘을 활용할 수 있는 현지에서 구할 수 있는 식품 성분에 의존하는 개입을 개발하는 것이 중요합니다.

영양 개입의 영향을 제한하는 주요 요인 중 하나는 영양 실조 아동이 증가하는 대사 요구를 충족시키기 위해 섭취량을 늘릴 수 없다는 것입니다. 모유, 미생물군 및 면역(BMMI) 프로젝트의 점프스타트 단계 동안 icddr,b와 세인트루이스에 있는 워싱턴 대학의 Gordon Lab 간의 공동 연구에서 우리는 Random Forests를 박테리아 16S rRNA(ribosomal RiboNucleic Acid) 데이터 세트에 적용했습니다. 방글라데시 다카의 도시 빈민가에 살고 있는 어린이의 출생 코호트에서 얻은 월별 대변 샘플에서 생성되었습니다. 이 아이들은 지속적으로 건강한 성장을 보였습니다(WLZ -0.32+0.98). 출생 후 처음 2-3년 동안 조립될 때 건강한 장내 미생물군을 정의하는 비례적 표현을 정의하는 박테리아 균주가 확인되었습니다. 중증 급성 영양실조(SAM ), 미생물군 미성숙이 불완전하고 일시적으로만 개선되는 것으로 관찰되었으며, 아동은 추적 관찰 기간 동안 눈에 띄게 발육 부진과 저체중 상태를 유지했습니다. MAM이 있는 방글라데시 어린이는 SAM 어린이보다 덜 심각하지만 상당한 미생물군 미성숙도를 보였습니다. 따라서 미생물군 미성숙은 영양결핍의 위험이 있는 유아를 식별하고 치료 및 예방 전략을 모니터링하는 잠재적인 바이오마커 역할을 합니다. ERC(PR-09023)에서 승인한 이전 연구에서 우리는 미르푸르 빈민가에 사는 건강한 어린이의 장내 미생물을 심각한 급성 영양실조 치료를 위해 입원한 어린이와 비교했습니다. microbiota는 16S Ribosomal RNA 시퀀싱에 의해 평가되었습니다. 우리는 SAM을 가진 어린이의 장내 미생물군이 건강한 어린이의 미생물군보다 연대순으로 뒤처져 있음을 발견했습니다. 예를 들어, SAM이 있는 2세 아동은 1세 건강한 아동과 유사한 장내 미생물군을 가질 수 있습니다. 이것은 장내 미생물의 미성숙으로 알려져 있습니다. 우리는 이 장 미성숙을 나타내기 위해 상대적인 미생물군 성숙도 지수와 연령별 미생물군 Z 점수라는 두 가지 지표를 개발했습니다. SAM은 영양 개입 후에 부분적으로만 개선되는 상당한 상대적 미생물군 미성숙과 관련이 있습니다. .

우리는 최근 현지에서 구할 수 있는 음식 재료인 쌀, 렌즈콩, 병아리콩을 사용하여 문화적으로 적절하고 수용 가능한 즉석 치료 식품을 개발했습니다. 이중 맹검 RCT(Randomized Controlled Trial)를 통해 우리가 개발한 방글라데시 병아리콩 기반 및 쌀 렌즈콩 기반 RUTF(Ready To Use Therapeutic Food)가 상업용 땅콩 기반 RUTF만큼 효과적이며 어린이들에게 잘 받아들여지는 것을 발견했습니다. SAM과 함께. 위에서 언급한 RCT와 지난 7-8년 동안 수행된 임상 중개 연구의 조합을 통해 우리는 나이에 따른 유익한 미생물군과 이러한 유익한 미생물군의 증식을 지원하는 지역에서 사용할 수 있는 식품 성분을 촉진하는 성장을 확인했습니다. 게다가, 워싱턴 대학 게놈 과학 센터에서 수행된 노토바이오틱 동물에 대한 이전 연구는 다카에서 수행된 연구에서 정보를 얻은 식품 성분(병아리콩, 콩가루, 땅콩 및 녹색 바나나)의 조합이 존경심을 가지고 연구할 가치가 있을 것이라고 제안하도록 이끌었습니다. 비용 및 지속 가능성뿐만 아니라 성장 차별 미생물의 증식 촉진에 대한 식단의 영향에 대해 설명합니다.

최근 우리는 IRB 승인 연구인 '미생물무리 미성숙을 복구하고 관능적 수용성을 확립하는 능력에 대한 납 미생물무리 지향 보완 식품(MDCF) 프로토타입을 최적화하기 위한 사전 개념 증명 임상 시험'(PR-16099)을 성공적으로 완료했습니다. 이 예비 연구의 주요 목적은 특정 보완 식품이 성장 촉진 효과로 알려진 장내 미생물의 특정 구성원의 증식을 자극함으로써 MAM으로 고통받는 어린 아이들에게 유익한 효과가 있다는 개념의 사전 증명을 입증하는 것이었습니다. . 그 파일럿 연구에서 우리는 Microbiota-for-age Z(MAZ) 점수와 장내 미생물의 좋은 구성원의 증식이 특정 신체 시스템에 미치는 영향을 조사했습니다. 이 연구는 현지에서 생산된 세 가지 MDCF 프로토타입(MDCF-1, MDCF-2 및 MDCF-3)과 현지에서 생산된 쌀 렌즈콩 기반 RUSF의 효과를 테스트하도록 설계되었습니다. Pre POC 파일럿 시험의 결과는 3개의 MDCF 중 하나(즉, MDCF-2)가 긴 뼈의 발달, 뇌의 발달 및 증가된 생산에 중요한 역할을 하는 특정 아미노산의 증가된 수준과 관련이 있다는 것을 결정적으로 보여주었습니다. IGF-1(Insulin like Growth Factor-1)은 어린이 성장 생물학에서 중요한 요소입니다. 또한 장내 미생물총의 성장 촉진 구성원, 예를 들어 Faecalibacterium prausnitzii의 성장을 자극하는 데 효과적입니다. 이 Pre-POC 파일럿 시험의 결과를 기반으로 이제 우리는 선형 성장이 일차 종료점인 Post-SAM MAM 어린이 관리에 대해 가장 유망한 MDCF-2를 사용하여 더 큰 규모의 임상 시험을 수행할 계획입니다.

연구 설계 및 방법 우리는 약 2년에 걸쳐 Post-SAM MAM(WLZ <-2 ~ -3)이 있는 12-18개월 어린이를 대상으로 임상 시험을 수행할 것입니다. 시험은 Dhaka시 Mirpur 지역의 Bauniabadh 및 RADDA MCH-FP 클리닉과 Kurigram의 Terre des Hommes(TdH)가 운영하는 SNU(Special Nutrition Unit)에서 실시됩니다. TdH SNU를 선택한 이유는 등록을 신속하게 처리하고 싶고 그곳에서 일한 좋은 실적이 있기 때문입니다. 우리가 지역 RUTF에서 수행한 마지막 효능 시험도 부분적으로 그곳에서 수행되었습니다. 아이들은 미리 지정된 포함 기준에 따라 Field Research Assistants(FRA)의 가구 조사를 통해 선별 및 등록됩니다. 등록 기준을 충족하고 부모 또는 법적 보호자로부터 연구 참여에 대한 동의를 받으면 각 어머니/보호자가 있는 아동이 등록되고 컴퓨터 생성 난수에 따라 두 팔 중 하나에 무작위로 할당됩니다. 배정된 식단 유형의 코드는 개인별로 밀폐된 불투명 봉투에 보관되며, 보호자가 동의서에 서명한 경우에만 개봉됩니다. 이 시험은 일반적인 약물 시험에 속하지 않습니다. 그러나 어떤 단계에서든 이 실험을 고려한다면 그것은 2단계에 속하게 될 것입니다. 왜냐하면 우리는 부작용뿐만 아니라 연령별 미생물군 Z 점수에 대한 영향을 조사하는 시범 실험을 이미 수행했기 때문입니다.

우선, 4-8일 동안 안정화 단계가 있을 것입니다. 이 기간 동안 각 어린이는 SAM 관리를 위한 WHO(세계 보건 기구)/icddr,b 지침에 따라 관리됩니다. 여기에는 계획된 급식, 미량영양소 보충, 신중한 재수화, 광범위한 항생제 치료 및 합병증의 즉각적인 인식 및 관리가 포함됩니다. 안정화 단계에서 회복되면 영양 재활이 약 2주 동안 계속되며, 그 동안 지역 식단 Halwa 및 Khichuri에 기반한 icddr,b 표준 치료 식이 프로토콜이 제공됩니다. SAM에서 MAM(부종이 없는 WLZ <-2)으로 졸업하면 어린이는 두 팔(Rice-lentil 기반 RUSF 및 MDCF-2) 중 하나에 무작위로 배정됩니다.

무작위 배정 후 영양 재활 구성요소는 3단계로 구성됩니다. 첫 번째 단계는 Mirpur와 Kurigram에 설립된 영양 센터에서 한 달 동안 하루에 두 번 식단을 현장에서 공급하는 것입니다. 두 번째 단계는 영양 센터에서 한 번, 집에서 한 번 아이들에게 먹이를 주는 것입니다. 세 번째 단계에서 아이들은 집에서 하루에 두 번 식단을 먹일 것입니다. 아이들은 개입 후 단계에서 4주 동안 관찰될 것입니다. 전체 연구 기간 동안 인체 측정 데이터, 식품 다양성 데이터 및 샘플(혈액, 대변 및 소변)이 수집됩니다. 우리는 모든 연구 참여자를 위한 식이 개입 동안 음식 빈도 설문지를 사용하여 지난 24시간 동안의 주간 질적 식이 섭취 데이터를 수집할 것입니다.

무작위화 안정화 및 영양 재활 단계 후 어린이가 MAM 상태에 도달하면 두 팔(Rice-lentil 기반 RUSF 및 MDCF-2) 중 하나에 무작위로 할당됩니다. 배정된 치료 유형의 코드는 등록된 아동에게 배정될 때까지 닫힌 불투명 봉투에 보관됩니다.

1군 - 쌀-렌즈콩 기반 RUSF(근거: SAM, MAM 이후 관리 기준 참조; 아동 성장 및 장내 미생물에 미치는 영향에 대한 지식 기반) 우유(이유: 최근 완료된 POC 전 임상 시험에서 성장 촉진 미생물총 및 성장에 대한 긍정적 효과에 대한 증거를 제시함).

SAM이 있는 아동의 모집, 선별 및 동의는 icddr,b Dhaka 병원, Mirpur의 RADDA-MCH-FP 클리닉, Kurigram에 있는 TdH의 SNU에서 직접 관찰 및 선별을 통해 식별될 뿐만 아니라 Mirpur 및 Kurigram 지역의 Sadar, Ulipur 및 Chilmari Upazilas. 안정화 치료가 필요한 사람은 위에서 언급한 SAM의 급성기 치료 표준 치료가 제공되는 시설에 입원합니다. 간단히 말해서; 이 안정화 관리는 프로그램된 영양 공급, 미량 영양소 보충, 신중한 재수화, 광범위한 항생제 치료 및 합병증의 신속한 인식 및 관리를 기반으로 합니다. 이후 영양 재활을 위한 표준 치료 식이 프로토콜로 치료를 받게 됩니다. MAM에 졸업하면 SAM MAM 후 시험에 대한 MAM 기준을 충족하는 아동의 부모에게 연구 등록에 대해 연락을 취할 것입니다. 훈련된 현장 연구 조교(FRA)가 연구에 대해 자세히 설명하고, 부모의 질문에 답하고, 부모를 초대하여 자녀를 연구에 등록시킵니다.

연구 시작 시 인구통계학적 특성에 대한 정보를 찾고 FRA는 2g 정밀도의 디지털 저울(Seca, 모델 728, 독일), 길이(유아 측정기, Seca, 모델 416, 독일 사용)를 사용하여 아동의 체중을 기록합니다. ), 중간 상완 둘레를 가장 가까운 mm까지(비신축 삽입 테이프 사용). 인체 측정은 표준 절차에 따라 수행됩니다. 연구 참가자는 MDCF/RUSF 섭취를 보장하기 위해 영양 치료를 위해 지정된 영양 센터로 오도록 요청받을 것입니다. 클리닉 직원에게 연락할 수 있는 전화번호가 제공되며 직원 중 한 명이 필요한 경우 사전 협의를 통해 직접 관찰 영양 치료를 위해 가족의 가정을 방문할 수 있습니다. 영양 재활 후 3개월 동안 프로그램된 MDCF-2 또는 RUSF의 급식은 그림에 설명되어 있습니다.

MDCF-2 및 RUSF의 준비:

위에서 언급한 Pre-POC 연구에서 확인된 보완 식품 성분의 호환 가능한 조합을 기반으로 Mirpur 및 Kurigram의 icddr,b 식품 가공 시설에서 MDCF-2와 RUSF를 임상 연구에 충분한 양으로 준비할 것입니다. 두 가지 식단은 에너지 밀도와 미량 영양소 함량이 일치합니다. MDCF-2의 에너지 밀도는 1회 제공량당 125kcal/25g을 목표로 하고 칼로리 분포는 지방에서 45-50%, 단백질에서 8-10%를 목표로 합니다. MDCF-2 또는 RUSF의 2인분은 유익한 미생물 증식을 위한 기질을 제공하는 것 외에도 250Kcal 및 필수 미량 영양소를 제공합니다. 서빙은 집에서 이 아이들이 받는 일반적인 식단에 추가되는 것입니다. 어머니/일차 보호자는 자녀의 현재 식단 및 모유 수유 관행을 유지하도록 조언을 받습니다.

Pre-POC 임상 시험에서 MDCF-2 프로토타입 개발 실험과 관능 특성 평가가 수행되었습니다.

음식은 준비하는 동안 예기치 않은 오염과 영양소 손실이 발생하지 않도록 매일 준비됩니다. 생식 재료는 현지 시장에서 매우 신중하게 조달하고 합리적인 양으로 보관하지만 MDCF-2 및 RUSF가 준비되는 당일에 준비, 분배 및 어린이들에게 먹일 것입니다.

원재료(쌀/렌즈콩/병아리콩)를 수령한 후 이물질/곡물 또는 씨앗(있는 경우)을 제거한 다음 열린 팬에서 원재료를 볶습니다. 로스팅을 위해 온도를 120-130°C로 유지합니다. 보통 각 원료 100g을 볶는 데 8-10분이 소요됩니다. 단일 씨앗/곡물을 로스팅하려면 계속 저어주는 것이 필수적입니다. 로스팅이 끝나면 식히기 위해 따로 보관한 다음 분쇄합니다. 우리는 가루를 가져다가 스트레이너를 사용하여 걸러냅니다. 4~5회 거른 후 고운 가루를 다른 재료(분유/기름)와 섞습니다. 우리는 또한 설탕을 갈아서 고운 가루를 혼합에 사용할 것입니다. 마지막으로 사전 계량된 프리믹스 분말을 추가합니다. 전체 녹색 바나나의 가공은 다른 재료와 다릅니다. 껍질이 있는 녹색 바나나를 끓는 물(100°C-110°C)에 담긴 깊은 팬에 넣고 부드러워질 때까지 약 17-20분 동안 끓입니다. 녹색 바나나의 껍질을 벗기고 식용 가능한 흰색 부분을 취하여 작은 조각으로 갈아줍니다. 그런 다음 냄비에 담아 식힐 것입니다. 스푼/핸드 크러셔로 작은 바나나 조각을 부술 것입니다. 다른 모든 성분의 중량이 기록됩니다. 잠재적인 레시피는 전기 믹서기에서 모든 재료를 혼합하여 소량으로 생산됩니다. icddr,b 조사관은 로스팅, 입자 크기 감소, 균일한 블렌딩 및 영양 센터 공급과 같은 다양한 단계에서 식품 준비를 모니터링합니다. 음식은 준비하는 동안 예기치 않은 오염과 영양소 손실이 발생하지 않도록 매일 준비됩니다. 생식 재료는 현지 시장에서 매우 신중하게 조달하고 합리적인 양으로 보관하지만 MDCF와 RUSF가 준비되는 당일에 준비, 분배 및 어린이들에게 먹일 것입니다.

수유 세션:

어린이와 어머니/간병인은 첫 달 동안 매일 오전 9-11시와 오후 3-5시 사이에 현장에 설치된 영양 센터에 오도록 요청받을 것입니다. 어머니는 관찰된 식사 시간 2시간 전에는 음식과 모유를 주지 않도록 요청받을 것입니다. 아이는 무작위 배정에 따라 1회 제공량당 25g의 MDCF-2 또는 RUSF를 제공받게 됩니다. 어머니는 아래에 설명된 대로 자녀가 식사를 거부할 때까지 미리 계량한 식단을 숟가락으로 떠서 먹여야 합니다. 2분의 휴지 후, 다시 거부할 때까지 동일한 식단이 두 번째 제공됩니다. 두 번째 2분 정지 후 다시 거부할 때까지 다이어트가 세 번째로 제공됩니다. 이 세 번째 거부 후에는 수유 에피소드가 '종료'된 것으로 간주됩니다. 수유 시간(중간 '휴식 시간' 제외)은 스톱워치로 기록되며 총 수유 시간이 기록됩니다. 이 수유 에피소드는 최대 60분 동안 지속됩니다. 일반 물의 측정량도 제공되며 이 식사 시간 60분 동안 섭취한 물의 양을 측정합니다. 수유 에피소드는 훈련된 연구 인력의 직접적인 감독하에 진행됩니다. 어린이가 음식에서 머리를 떼거나 울거나 입을 다물거나 이를 악물거나 동요하거나 음식을 뱉거나 삼키기를 거부하는 경우 추가 섭취를 거부하는 것으로 간주됩니다. 실제로 섭취한 MDCF-2/RUSF의 양은 제공된 양에서 남은 양을 빼거나 집에서 먹일 때 산모에게 물어서 계산합니다. 등록된 어린이는 가능한 부작용/부작용(예: 음식 알레르기로 인한 발진, 두드러기 또는 임상 상태의 중대한 변화)를 일주일 동안 부작용/부작용이 관찰되는 경우 표준 치료에 따라 치료됩니다. RUSF 및 MDCF-2의 품질을 제어하기 위해 표준화된 생산 절차를 따를 것입니다. 모든 어린이는 처음 4주 동안 수유 센터에서 하루에 두 번 25gm의 식단을 제공받게 됩니다. 다음 달에 아이는 급식 센터에서 25gm의 식단을 제공받게 되며 추가로 25gm은 깨끗한 용기에 담아 집에서 먹일 것입니다. 세 번째 달에는 25gm 다이어트가 포함된 별도의 용기 두 개가 참가자의 집에서 등록된 각 어린이에게 매일 제공됩니다. 어머니로부터 수유 정보를 수집하고 남은 양부터 섭취량을 측정합니다. 음식은 수유 세션 사이에 멸균 용기에 실온에 보관됩니다. icddr,b에서 2개월마다 준비된 식품 샘플에 미생물 및 곰팡이 검사를 하여 식품의 품질을 보장합니다. 테스트를 위해 선택된 샘플에는 요리 후 2시간 및 6시간 동안 저장된 음식이 포함됩니다. 샘플은 또한 델리의 SGS 연구소에서 6개월마다 아플라톡신에 대해 테스트됩니다.

이 연구에서 영양 상태는 WHO 성장 참조 표준과 비교하여 인체 측정법을 통해 평가됩니다. 연구 초기에 인구학적 특성(가족의 재산, 주택 수준, 가족 구조 및 부모의 특성 등)에 대한 정보를 찾고 FRA는 2g 정밀도의 디지털 저울(Seca, 모델 728, 독일), 길이(infantometer 사용, Seca, 모델 416, 독일), 가장 가까운 mm까지의 중간 위팔 둘레(비신축 삽입 테이프 사용). 인체 측정은 표준 절차에 따라 수행되며 모든 측정은 세 번 수행되고 평균값이 기록됩니다.

배설물 수집 안정화의 급성기에는 격일로 배설물 샘플을 수집합니다. 재활 단계 동안 매주 배설물 샘플(1-2g)은 생산 후 30분 이내에 수집됩니다(집에서 다시 icddr,b로 이송). 사전 POC 임상 시험(부록-A). 표본은 미생물 성숙도 분석(MDCF-2 및 RUSF 치료 중단 전, 도중 및 종료 후 측정)과 대변 ​​샘플의 장병원균 부담(MDCF-2 처리 전후 측정). 전체 연구 기간 동안 서로 다른 시점에서 각 어린이로부터 총 12개의 대변 샘플을 수집합니다. 62명의 연구 참여자/팔을 가정하면 총 1488개의 배설물 표본이 이 연구에서 수집될 것입니다. 그와 함께 2gm의 배설물 샘플이 안정화 단계가 시작될 때 어머니로부터 수집됩니다.

소변 샘플 수집 총 7개의 소변 샘플(각 2ml)이 전체 연구 기간 동안 서로 다른 시점에서 각 어린이로부터 수집됩니다. 62명의 연구 참가자/팔을 가정하면 총 868개의 소변 샘플이 이 연구에서 수집될 것입니다. 그와 함께 5ml의 소변 샘플이 안정화 단계 초기에 어머니로부터 수집됩니다.

혈액 샘플 수집 전체 연구 기간 동안 서로 다른 시점에서 총 4개의 혈액 샘플(각각 2ml)을 수집합니다. 각각은 개입 전 안정화 단계 초기에 모든 어린이로부터 수집됩니다. 개입 첫 달 말과 개입이 완료된 직후.

62명의 연구 참여자/팔을 가정하면 총 496개의 혈장 샘플이 이 연구에서 수집될 것입니다. 이와 함께 안정화 단계가 시작될 때 산모로부터 5ml의 혈액 샘플을 채취합니다.

8개국 MAL-ED 연구 결과를 통해 알 수 있듯이 산모의 영양 상태는 자녀의 영양 상태와 관련이 있습니다. 또한 산전 및 모성 요인은 연령 대비 낮은 길이의 초기 결정 요인이었으며 이들의 기여도는 생후 첫 24개월 동안 계속 중요했습니다. 따라서 산모의 키와 몸무게를 기록합니다. 산모의 생물학적 영양 상태를 이해하기 위해 대변, 혈액 및 소변의 등록 샘플을 산모에게 요청합니다. 이 샘플은 장내 미생물 및 프로테오믹스에 대해 분석되며 등록된 어린이의 결과와 상관 관계가 있습니다.

신체 측정 아동의 나이는 문서(출생 증명서 또는 예방 접종 카드, 가능한 경우) 또는 아동의 생년월일에 대한 보호자의 보고서를 통해 확인됩니다. 길이는 0.1cm에 민감한 유아계로 측정됩니다. 체중은 2g에 민감한 저울(SECA 7281321009, Hamburg, Germany)로 측정한다. 연령 대비 길이(LAZ), 길이 대비 무게(WLZ) 및 연령 대비 무게(WAZ) Z-점수는 MGRS(Multicentre Growth Reference Study) WHO 성장 표준에 따라 계산됩니다. 양 발의 윗부분을 3초간 눌러 부종을 검사합니다. 팔 중간 둘레(MUAC)는 TALC MUAC 테이프(UK)를 사용하여 측정합니다. 측정 장비의 정기적인 표준화는 숙련된 현장 연구 조교가 매일 표준을 사용하여 수행합니다.

혈장 및 분변 샘플 분석 이 시험에서 수집된 혈장 샘플은 세인트루이스에 있는 워싱턴 대학교의 게놈 과학 및 시스템 생물학 센터에 있는 Jeffrey Gordon 박사의 연구실로 보내질 것입니다. 고급 질량 분광법 및 면역분석 기반 방법을 사용하여 장내 미생물 미성숙의 역할과 납 미생물군 지시 보완 식품(MDCF-2)을 사용하여 이러한 미성숙의 급성 복구를 시도하는 효과에 대한 새로운 지식을 얻는 데 사용할 예정입니다. 건강한 성장. 통제 그룹(즉, 참조 RUSF 표준을 소비하는 그룹)과 비교가 이루어집니다. 타겟 초고성능 액체 크로마토그래피-질량 분석법(UPLC-MS) 및 가스 크로마토그래피-질량 분석법(GC-MS)은 담즙산 및 단쇄 지방산(SCFA)을 포함한 혈장 및/또는 분변 샘플에서 특정 관심 대상 분석물을 프로파일링하는 데 사용됩니다. ); 미토콘드리아 기능의 마커(예: β-하이드록시부티레이트, 아실카르니틴/아실CoAs, TCA 주기 중간체); 혈청 및 분변 샘플의 아미노산[세균의 트립토판 대사(예: 인돌 아세트산 유도체)]. 또한 선형 성장(예: 성장 호르몬 및 IGF-1), 에너지 이용(인슐린, 렙틴) 및 뼈 생물학[IL-6(인터루킨-6), 오스테오프로테게린, I형 콜라겐(CTX, 파골세포 활성/골흡수 마커), Type 1 프로콜라겐의 아미노말단 프로펩티드(P1NP, 조골세포 활성/골형성 마커)], 전신 염증(CRP, AGP) 확립된 ELISA/Luminex 분석을 사용하여 정량화되었습니다. 혈액 내 단백질은 1300개 이상의 서로 다른 단백질을 식별할 수 있는 SOMAlogic 스캔을 사용하여 식별됩니다. Dhaka에서 수행된 이전 Pre-POC 시험에서 SAM을 가진 어린이의 혈장 샘플에 대해 수행된 단백질체 연구는 이미 SOMAlogic 스캔을 사용하여 특정 단백질과 임상 표현형 사이의 많은 중요하고 임상적으로 관련된 연관성을 입증했습니다.

수집된 정보는 무균 동물에 이식할 인간 배설물 샘플을 선택하는 데 사용됩니다. 인간 미생물군 공여자의 식단을 먹게 될 이 동물들은 MDCF-2 프로토타입, 장내 미생물군 및 숙주 생리/대사를 연결하는 메커니즘을 추가로 특성화하는 데 사용될 것입니다. 또한, 이러한 혈장 및 분변 바이오마커는 MDCF-2가 미생물군 미성숙의 복구를 촉진하고 어린이의 생물학적 상태를 개선하는지 확인하는 데 사용될 것입니다.

샘플 크기 계산 다른 MDCF의 사전 POC 시험에서 MDCF2(Microbiota Directed Complementary Food 2)를 받은 어린이의 길이 대비 체중 기준 Z 점수는 -2.2였으며 보충 1개월 후 -1.7이었습니다. 베이스라인에서 WLZ -2, 종료 라인에서 -1.7, 풀링된 SD(표준 편차)를 0.53으로 고려하면 샘플 크기는 80% 검정력 및 5% 유의 수준에서 각 부문에서 49입니다. 20% 감소로 62명의 어린이가 각 부문에 등록되어야 합니다. 따라서 이 실험에서 62명의 어린이는 MDCF-2를, 62명의 어린이는 Rice-lentil RUSF를 받게 됩니다.

데이터 분석:

Post SAM-MAM이 있는 어린이의 두 그룹은 시험 디자인의 그림에 표시된 대로 기준선과 다른 시점에서 비교됩니다. 비교를 위한 임상 결과 변수에는 체중 증가율, 인체 측정 지수 및 이환율이 포함됩니다. '혈장 및 분변 샘플 분석' 섹션에서 언급된 모든 분석물은 MDCF-2 그룹과 RUSF 그룹 간에 비교됩니다.

인권보호를 위한 윤리적 검증 본 연구는 icddr,b 연구심사위원회와 윤리심사위원회의 IRB(Institutional Review Board) 승인을 받아 본 연구를 시작하였다. 연구에 등록하기 전에 연구 참가자의 법적 보호자로부터 정보에 입각한 서면 동의를 받습니다. 등록 및 기타 학습 절차 중에 찍은 개인 신분증은 잠금 및 열쇠로 보관됩니다.

이 프로토콜에 대해 예상되는 위험/부작용은 혈액 샘플 수집, 분변 샘플 수집 및 미생물상 지시 보완 식품의 공급과 관련된 것입니다. 이들 중 어느 것도 심각한 유해 사례(SAE)로 간주되지 않습니다. 채혈과 관련된 예상 부작용(EAE)은 다음과 같습니다.

• 불편감
• 통증
• 감염의 도입
• 출혈

• 실신 또는 타박상

  • 정맥 천자 부위를 소독하고 멸균 장비를 사용하여 감염이 유입되지 않도록 예방 조치를 취합니다.
  • 정맥 천자 후 즉시 압력을 가하면 출혈과 멍의 위험이 최소화됩니다.
  • 참가자(어린이)는 기절로 인한 부상을 방지하기 위해 채혈하는 동안 앉거나 앙와위 자세로 있게 됩니다.

가능한 모든 부작용은 적절하게 처리됩니다. 여기에는 다음이 포함됩니다.

• 구토
• 설사
• 피부 발진
• 음식 알레르기로 인한 두드러기
• 복부팽만
• 부작용의 복부 통증 평가 심각한 부작용과 심각하지 않은 부작용 모두 심각도에 대해 평가됩니다. 연구 참여와의 관계; 취한 조치; 그리고 결과. 모든 SAE는 스폰서에게 배포될 이벤트에 대한 사이트의 인식 후 24시간 이내에 icddr,b의 ERC(윤리 검토 위원회)에 보고되어야 합니다. 이는 직접 전화 통신, 팩스 또는 이메일로 이루어집니다.

icddr,b 부작용이 발생할 경우 등급을 매기기 위해 IRB 권장 지침을 따를 것입니다.

심각성:

1. 경증
2. 보통의
3. 극심한

연구 참여와의 관계:

1. 확실히 관련됨:명백한 단절된 시간적 연관성, 다른 가능한 원인 없음
2. 관련 가능성 있음:명확하지 않은 시간적 연관성, 다른 원인이 있을 수 있음
3. 관련 없음: 연구와 독립적으로, 사건이 다른 병인과 확실히 관련되어 있다는 증거가 존재합니다.

행위:

없음 치료 요법(한 번 이상의 약물 투여 필요) 연구 참여 영구 중단 입원 기타

결과:

미지의 지속되는 협력 관계 해결 이 프로젝트는 워싱턴 대학교 의과 대학의 조사관과 방글라데시의 국제 설사병 연구 센터(icddr,b) 사이의 공동 노력입니다. 임상 작업, 현장 활동은 수석 연구원의 직접 감독하에 방글라데시 다카와 쿠리그람에서 수행되는 반면, 실험실 분석은 세인트루이스에 있는 워싱턴 대학교의 고든 랩에서 수행됩니다. 모든 연구 단위와 협력 조사자들은 국제 협력의 오랜 역사를 가지고 있습니다. 모든 조사관은 이 프로젝트를 개발하는 동안 의사소통을 했으며 성공적인 구현을 위해 최선을 다하고 있습니다.

이용 가능한 시설 icddr,b에는 다이어트 레시피에 대한 실험을 용이하게 할 잘 갖추어진 식품 가공 실험실이 있습니다. 우리는 Mirpur의 Baoniabad 지역에서 지속적인 연구를 진행하고 있습니다. 여러 프로젝트 사무소가 있습니다. 더 중요한 것은 커뮤니티와 훌륭한 관계를 유지하고 있다는 것입니다. 시험의 일부가 진행될 쿠리그람에서 서울대학교를 운영하는 Terre des Hommes. 과거에 우리는 서울대학교의 발전을 도왔고 그곳에서 연구를 수행했습니다. SNU는 지역 사회에서 큰 평판을 얻고 있습니다.

세인트루이스에 있는 워싱턴 대학교 게놈 과학 센터:

대변 ​​샘플은 icddr,b에서 분주됩니다. 대변 ​​샘플은 높은 처리량의 16S 리보솜 RNA 유전자 시퀀싱을 위해 St Louis에 있는 Jeffery Gordon 교수의 연구실로 보내질 것입니다. MDCF-2 처리 전후의 대변 샘플에서 광범위한 장 병원체의 존재/풍부함은 PCR(중합 효소 연쇄 반응) 기반 분석을 사용하여 결정됩니다. 대변 ​​샘플은 또한 Gordon Lab의 노토바이오틱 마우스에 대한 향후 연구에 사용하기 위해 구성 박테리아 균주를 배양하는 데 사용될 수 있습니다. 이를 수행하기 위한 분석 및 장비는 현재 St Louis에 있는 실험실을 포함하여 세계의 일부 실험실에서만 사용할 수 있다는 점을 여기서 언급하는 것이 타당합니다. 이 센터는 비교 유전체학, 통계 유전체학 및 시스템 생물학에 중점을 둔 여러 학교의 학제간, 다부서, 다세대 연구자 팀의 본거지입니다. 생물학, 물리, 전산 및 공학 과학의 인터페이스에서 일하고 싶습니다.