Essai clinique communautaire avec des aliments complémentaires dirigés contre le microbiote (MDCF) composés d'ingrédients alimentaires disponibles localement pour la prise en charge des enfants atteints de malnutrition aiguë post-sévère Malnutrition aiguë modérée (MAM post-MAS)

Arrière-plan:

La malnutrition aiguë modérée (MAM), un problème de santé mondial majeur, est définie comme une émaciation (c.-à-d. poids pour taille entre <-2 et -3 Z-scores des normes de croissance de l'enfant de l'OMS) et/ou circonférence du bras (MUAC) supérieure ou égale à 115 mm et inférieure à 125 mm. Selon le Rapport mondial sur la nutrition 2017, 8 % ou 52 millions d'enfants de moins de cinq ans souffraient de malnutrition aiguë dans le monde en 2016 et le retard de croissance ou la malnutrition chronique touchait 23 % ou 155 millions d'enfants. Environ un enfant sur 6 de moins de 5 ans en Asie du Sud souffrait de MAM en 2013 (c'est-à-dire 17 %). Ces enfants sont exposés à un risque accru de malnutrition aiguë sévère (MAS) et ont un risque trois fois plus élevé de mortalité par maladies transmissibles courantes que leurs pairs bien nourris. Le Bangladesh a l'un des fardeaux de malnutrition infantile les plus élevés au monde. Selon l'enquête démographique et sanitaire du Bangladesh de 2014, la prévalence du retard de croissance dans le pays chez les enfants de moins de cinq ans est de 36 %, parmi eux 12 % souffrent d'un retard de croissance sévère (LAZ <-3).1 Environ 15 % des enfants souffrent d'émaciation (poids- pour-longueur, WLZ <-2); plus de 2 millions d'enfants souffrent de MAM, tandis que 3% ou 450 000 enfants souffrent de la forme mortelle de SAM. La malnutrition coûte au Bangladesh environ 1 milliard de dollars américains par an.

Selon les recommandations de l'OMS, les nourrissons et les enfants âgés de 6 à 59 mois atteints de MAM doivent consommer des aliments riches en nutriments pour répondre à leurs besoins supplémentaires de gain de poids et de taille et de récupération fonctionnelle. Il n'existe actuellement aucune recommandation fondée sur des données probantes concernant la composition des aliments complémentaires utilisés pour traiter les enfants atteints de MAM. Les interventions visant à lutter contre la dénutrition devraient donc inclure une forte composante de gestion de la MAM. La prévention de la MAM doit être prise en compte dans la sécurité alimentaire et d'autres stratégies de développement car la situation devient critique dans les populations où l'insécurité alimentaire est endémique. Il est donc important de développer des interventions qui dépendent des ingrédients alimentaires disponibles localement qui, en petites quantités, sont capables d'exploiter le pouvoir bénéfique du microbiote intestinal sur la croissance du nourrisson et de l'enfant.

L'un des principaux facteurs limitant l'impact des interventions nutritionnelles est l'incapacité des enfants malnutris à augmenter leur apport alimentaire pour répondre aux besoins métaboliques accrus. Dans des études collaboratives entre l'icddr,b et le Gordon Lab de l'Université de Washington à St. Louis pendant la phase Jumpstart du projet Breast Milk, Microbiota and Immunity (BMMI), nous avons appliqué des forêts aléatoires à des ensembles de données d'ARNr 16S bactérien (acide ribonucléique ribosomal) générée à partir d'échantillons fécaux mensuels obtenus à partir d'une cohorte de naissance d'enfants vivant dans un bidonville urbain de Dhaka, au Bangladesh. Ces enfants ont présenté une croissance saine et constante (WLZ -0,32+0,98). Des souches bactériennes ont été identifiées dont la représentation proportionnelle définit un microbiote intestinal sain lors de son assemblage au cours des 2-3 premières années postnatales. Dans un essai clinique randomisé à l'icddrb de deux aliments thérapeutiques (aliments thérapeutiques prêts à l'emploi importés [RUTF, Plumpy'Nut] versus Khichuri et Halwa à base de riz/lentilles préparés localement) chez des enfants bangladais souffrant de malnutrition aiguë sévère (MAS ), il a été observé que l'immaturité du microbiote est améliorée de manière incomplète et seulement transitoire, les enfants restant nettement rabougris et en insuffisance pondérale tout au long de la période de suivi. Les enfants bangladais atteints de MAM présentaient également une importante immaturité du microbiote, bien que moins grave que les enfants atteints de MAS. L'immaturité du microbiote sert ainsi de biomarqueur potentiel pour identifier les nourrissons à risque de dénutrition et pour suivre les stratégies de traitement et de prévention. Dans notre précédente étude approuvée par l'ERC (PR-09023), nous avons comparé le microbiote intestinal d'enfants sains vivant dans le bidonville de Mirpur avec des enfants hospitalisés pour le traitement de la malnutrition aiguë sévère. Le microbiote a été évalué par séquençage de l'ARN ribosomique 16S. Nous avons constaté que le microbiote intestinal des enfants atteints de MAS est chronologiquement en retard par rapport au microbiote des enfants en bonne santé. Par exemple, un enfant de deux ans atteint de MAS peut avoir un microbiote intestinal similaire à celui d'un enfant en bonne santé d'un an. C'est ce qu'on appelle l'immaturité du microbiote intestinal. Nous avons développé deux mesures pour représenter cette immaturité intestinale - l'indice de maturité relative du microbiote et le score Z du microbiote pour l'âge ; La MAS est associée à une immaturité relative importante du microbiote qui n'est que partiellement améliorée à la suite d'interventions nutritionnelles. .

Nous avons récemment développé des aliments thérapeutiques prêts à l'emploi en utilisant des ingrédients alimentaires disponibles localement - riz, lentilles et pois chiches - qui sont culturellement pertinents et acceptables. Nous avons découvert grâce à un ECR (essai contrôlé randomisé) en double aveugle que les ATPE (aliments thérapeutiques prêts à l'emploi) à base de pois chiches et de lentilles de riz du Bangladesh que nous avons développés étaient aussi efficaces que les ATPE commerciaux à base d'arachides et bien acceptés par les enfants. avec SAM. Grâce à une combinaison des ECR mentionnés ci-dessus et des études cliniques translationnelles menées au cours des 7 à 8 dernières années, nous avons identifié un microbiote bénéfique favorisant la croissance et des ingrédients alimentaires disponibles localement qui favorisent la prolifération de ce microbiote bénéfique. En outre, des études antérieures effectuées sur des animaux gnotobiotiques au Washington University Center for Genome Science nous ont amenés à suggérer qu'une combinaison d'ingrédients alimentaires (pois chiche, farine de soja, arachide et banane verte) informée par des études menées à Dhaka mériterait d'être étudiée avec respect. à l'impact du régime alimentaire sur la stimulation de la prolifération du microbiote discriminant la croissance ainsi que sur le coût et la durabilité.

Récemment, nous avons terminé avec succès une étude approuvée par l'IRB, "Essais cliniques de pré-preuve de concept pour optimiser les prototypes d'aliments complémentaires dirigés par le microbiote (MDCF) pour leur capacité à réparer l'immaturité du microbiote et à établir leur acceptabilité organoleptique" (PR-16099). L'objectif principal de cette étude pilote était de démontrer une pré-preuve de concept que certains aliments complémentaires auraient un effet bénéfique sur les jeunes enfants souffrant de MAM, en stimulant la prolifération de membres particuliers du microbiote intestinal connus pour leurs effets favorisant la croissance. . Dans cette étude pilote, nous avons étudié le score Microbiota-for-age Z (MAZ) ainsi que l'impact de la prolifération de bons membres du microbiote intestinal sur certains systèmes corporels. Cette étude a été conçue pour tester les effets de trois prototypes de MDCF produits localement (MDCF-1, MDCF-2 et MDCF-3) et d'un RUSF à base de riz et de lentilles produit localement. Les résultats de l'essai pilote Pre POC ont montré de manière concluante que l'un des trois MDCF (à savoir MDCF-2) était associé à des niveaux accrus de certains acides aminés qui jouent un rôle clé dans le développement des os longs, le développement du cerveau et l'augmentation de la production de IGF-1 (Insulin like Growth Factor-1) qui sont des facteurs critiques dans la biologie de la croissance de l'enfant. Il est également efficace pour stimuler la croissance des membres favorisant la croissance du microbiote intestinal, par exemple Faecalibacterium prausnitzii. Sur la base des résultats de cet essai pilote pré-POC, nous prévoyons maintenant de réaliser un essai clinique plus vaste en utilisant le MDCF-2 le plus prometteur sur la prise en charge des enfants MAM post-MAS, le critère principal étant la croissance linéaire.

Conception et méthodes de recherche Nous mènerons un essai clinique auprès d'enfants âgés de 12 à 18 mois atteints de MAM post-MAS (WLZ <-2 à -3) sur une période d'environ deux ans. L'essai sera mené à la clinique Bauniabadh et RADDA MCH-FP dans le quartier Mirpur de la ville de Dhaka, et à l'Unité spéciale de nutrition (SNU) gérée par Terre des Hommes (TdH) à Kurigram. Le TdH SNU a été sélectionné parce que nous voulons accélérer l'inscription et nous avons une bonne expérience de travail là-bas ; le dernier essai d'efficacité que nous avons mené sur nos RUTF locaux y a également été réalisé en partie. Les enfants seront sélectionnés et inscrits dans le cadre d'une enquête auprès des ménages par des assistants de recherche sur le terrain (FRA) selon des critères d'inclusion prédéfinis. En remplissant les critères d'inscription et après avoir reçu le consentement à la participation à l'étude des parents ou tuteurs légaux, les enfants avec la mère/tutrice respective seront inscrits et assignés au hasard à l'un des deux bras selon des nombres aléatoires générés par ordinateur. Le code du type de régime attribué sera conservé dans des enveloppes opaques fermées pour chaque individu et ne sera ouvert que lorsque le soignant aura signé le formulaire de consentement. Cet essai ne relèvera d'aucun essai de médicament typique. Cependant, si nous devons considérer cet essai dans n'importe quelle phase, il relèverait de la phase II, car nous avons déjà réalisé un essai pilote examinant l'impact sur le score Z du microbiote pour l'âge ainsi que les effets indésirables.

Tout d'abord, il y aura la phase de stabilisation, qui durera 4 à 8 jours, pendant cette période, chaque enfant sera pris en charge conformément aux directives de l'OMS (Organisation mondiale de la santé) / icddr,b pour la prise en charge de la MAS. Cela comprend une alimentation programmée, une supplémentation en micronutriments, une réhydratation judicieuse, un traitement antibiotique à large spectre et une reconnaissance et une prise en charge rapides des complications. Après le rétablissement de la phase de stabilisation, la réhabilitation nutritionnelle se poursuivra pendant environ 2 semaines au cours desquelles le protocole diététique standard de soins icddr,b basé sur les régimes alimentaires locaux Halwa et Khichuri sera servi. Une fois passés de SAM à MAM (WLZ sans œdème <-2), les enfants seront assignés au hasard à l'un des deux bras (RUSF à base de lentilles de riz et MDCF-2).

La composante de réhabilitation nutritionnelle post-randomisation comportera 3 phases. La première phase impliquera l'alimentation sur place de l'alimentation deux fois par jour pendant 1 mois dans les centres de nutrition établis à Mirpur et Kurigram. La deuxième phase consistera à nourrir les enfants une fois au centre de nutrition et une fois à la maison. Au cours de la troisième phase, les enfants seront nourris deux fois par jour à la maison. Les enfants seront observés pendant 4 semaines dans la phase post-intervention. Pendant toute la durée de l'étude, des données anthropométriques, des données sur la diversité alimentaire et des échantillons (sang, selles et urine) seront collectés. Nous collecterons des données qualitatives hebdomadaires sur l'apport alimentaire au cours des dernières 24 heures en utilisant des questionnaires sur la fréquence des aliments pendant l'intervention alimentaire pour tous les participants à l'étude.

Randomisation Après les phases de stabilisation et de réhabilitation nutritionnelle, lorsque les enfants atteindront l'état MAM, ils seront assignés au hasard à l'un des deux bras (RUSF à base de riz-lentilles et MDCF-2). Le code du type de traitement attribué sera conservé dans des enveloppes opaques fermées jusqu'à ce qu'il soit attribué à un enfant inscrit.

Bras 1- RUSF à base de lentilles de riz (justification : norme de référence de soins pour post-MAS, MAM ; basé sur la connaissance de ses effets sur la croissance de l'enfant et le microbiote intestinal) Bras 2- Prototype MDCF-2 avec quatre ingrédients alimentaires complémentaires sans poudre le lait (justification : avancez avec les preuves de l'essai clinique pré-POC récemment achevé sur la promotion du microbiote favorisant la croissance et les effets positifs sur la croissance).

Recrutement, dépistage et consentement Les enfants atteints de MAS seront identifiés par l'observation directe et le dépistage à l'hôpital icddr,b Dhaka, la clinique RADDA-MCH-FP à Mirpur, le SNU de TdH à Kurigram, ainsi que par le dépistage dans les communautés de Mirpur et Sadar, Ulipur et Chilmari Upazilas du district de Kurigram. Ceux qui ont besoin de soins de stabilisation seront admis dans les établissements mentionnés ci-dessus où la norme de soins pour le traitement de la phase aiguë de la MAS sera fournie. En bref; ces soins de stabilisation reposent sur une alimentation programmée, une supplémentation en micronutriments, une réhydratation judicieuse, un traitement antibiotique à large spectre et une reconnaissance et une prise en charge rapides des complications. Ils seront ensuite traités avec le protocole diététique standard de soins pour la réhabilitation nutritionnelle. Après avoir obtenu leur diplôme en MAM, les parents d'enfants qui répondent aux critères MAM pour l'essai MAM post-SAM seront approchés pour s'inscrire à l'étude. Un assistant de recherche sur le terrain (FRA) qualifié expliquera l'étude en détail, répondra à toutes les questions du ou des parents et invitera le ou les parents à inscrire l'enfant à l'étude.

Au début de l'étude, des informations seront recherchées sur les caractéristiques démographiques et les FRA enregistreront le poids des enfants à l'aide d'une balance numérique avec une précision de 2 g (Seca, modèle 728, Allemagne), la longueur (à l'aide d'un infantomètre, Seca, modèle 416, Allemagne ) et la circonférence de la partie supérieure du bras au millimètre près (à l'aide d'un ruban d'insertion non extensible). L'anthropométrie sera effectuée selon les procédures standard. Les participants à l'étude seront invités à se rendre au centre de nutrition désigné pour une thérapie nutritionnelle afin d'assurer la prise du MDCF/RUSF. Ils recevront un numéro de téléphone pour joindre le personnel de la clinique, et un membre du personnel peut visiter le foyer d'une famille pour une thérapie nutritionnelle directement observée avec un arrangement préalable si nécessaire. L'alimentation programmée du MDCF-2 ou RUSF pendant trois mois après la réhabilitation nutritionnelle est illustrée dans la figure.

Préparation de MDCF-2 et RUSF :

Sur la base de combinaisons compatibles d'ingrédients alimentaires complémentaires identifiés dans l'étude pré-POC mentionnée ci-dessus, nous préparerons MDCF-2 ainsi que RUSF à l'installation de transformation alimentaire icddr,b à Mirpur et à Kurigram en quantités suffisantes pour l'étude clinique. Les deux régimes seront assortis en termes de densité énergétique et de teneur en micronutriments. La densité énergétique du MDCF-2 est ciblée à 125 kcal/25 g (par portion) et la distribution calorique est ciblée à 45-50 % de matières grasses et 8 à 10 % de protéines. Les deux portions de MDCF-2 ou RUSF fourniront 250 Kcal et les micronutriments nécessaires en plus de fournir le substrat pour la prolifération bénéfique du microbiote. Les portions sont destinées à compléter le régime alimentaire habituel de ces enfants à la maison. Il sera conseillé aux mères/gardiens principaux de maintenir les pratiques alimentaires et d'allaitement actuelles de leur enfant.

Des expériences de développement des prototypes MDCF-2 et d'évaluation des propriétés organoleptiques ont été réalisées dans le cadre de l'essai clinique pré-POC.

Les aliments seront préparés tous les jours pour s'assurer qu'aucune contamination et perte de nutriments inattendues ne se produisent pendant la préparation. Bien que les ingrédients alimentaires crus soient très soigneusement achetés sur le marché local et stockés en quantités raisonnables, nous préparerons, distribuerons et nourrirons les enfants le même jour que le MDCF-2 et le RUSF sont préparés.

Après avoir reçu les matières premières (riz/lentilles/pois chiches), nous retirerons les matières étrangères/céréales ou graines (s'il y en a) qui peuvent être jetées, puis dans une casserole ouverte, les matières premières seront torréfiées. Nous maintiendrons la température à 120-130°C pour la torréfaction. Habituellement, il faut 8 à 10 minutes pour rôtir 100 g de chaque matière première. Une agitation continue est essentielle pour assurer la torréfaction des graines/grains uniques. Une fois la torréfaction terminée, nous la garderons de côté pour la refroidir, puis nous la broierons. Nous allons prendre la poudre et la filtrer à l'aide d'une passoire. Après avoir passé 4 à 5 fois, on prélèvera la poudre fine pour la mélanger avec les autres ingrédients (poudre de lait/huile). Nous moudreons également le sucre et la poudre fine servira au mélange. Enfin, nous ajouterons la poudre de prémélange pré-pesée. Le traitement de la banane verte entière est différent des autres ingrédients. La banane verte avec la peau sera placée dans une casserole profonde dans de l'eau bouillante (100°C-110°C) et bouillie pendant environ 17-20 minutes jusqu'à ce qu'elle soit cuite et tendre. La peau de la banane verte sera pelée et la partie blanche comestible sera prise et râpée en petits morceaux. Ensuite, ils seront pris dans un pot et laissés refroidir. Nous écraserons les petits morceaux de banane avec une cuillère/un broyeur à main. Le poids de tous les autres ingrédients sera enregistré. Les recettes potentielles seront produites en petits lots en mélangeant tous les ingrédients dans un mélangeur électrique. La préparation des aliments en différentes étapes, c'est-à-dire la torréfaction, la réduction de la taille des particules, le mélange homogène et l'approvisionnement des centres de nutrition, sera surveillée par les enquêteurs de l'icddr,b. Les aliments seront préparés tous les jours pour s'assurer qu'aucune contamination et perte de nutriments inattendues ne se produisent pendant la préparation. Bien que les ingrédients alimentaires crus soient très soigneusement achetés sur le marché local et stockés en quantités raisonnables, nous préparerons, distribuerons et nourrirons les enfants le même jour que le MDCF et le RUSF sont préparés.

Séances de nourrissage :

Les enfants et les mères/gardiennes d'enfants seront priés de se présenter aux centres de nutrition établis sur les sites de préférence entre 9h-11h et 15h-17h tous les jours pendant le premier mois. Il sera demandé aux mères de ne donner ni nourriture ni lait maternel dans les 2 heures précédant l'heure du repas observé. L'enfant se verra offrir 25 grammes de MDCF-2 ou RUSF par portion, comme décidé par randomisation. Les mères seront invitées à donner à leurs enfants les aliments prépesés à la cuillère jusqu'à ce qu'ils refusent de manger, comme décrit ci-dessous. Après une pause de deux minutes, le même régime lui sera proposé une deuxième fois jusqu'à ce qu'il refuse à nouveau. Après une deuxième pause de deux minutes, le régime sera proposé une troisième fois jusqu'à ce qu'il soit à nouveau refusé. Après ce troisième refus, l'épisode d'alimentation sera considéré comme « terminé ». La durée de l'alimentation (à l'exclusion des « périodes de repos » intermédiaires) sera enregistrée par un chronomètre, et la durée totale de l'alimentation sera notée. Cet épisode d'alimentation durera au maximum 60 minutes. Des volumes mesurés d'eau ordinaire seront également donnés et la quantité d'eau prise pendant cette période de repas de 60 minutes sera mesurée. L'épisode d'alimentation aura lieu sous la supervision directe du personnel d'étude qualifié. Les enfants seront considérés comme refusant de continuer à manger s'ils éloignent la tête de la nourriture, pleurent, serrent la bouche ou serrent les dents, ou deviennent agités, recrachent la nourriture ou refusent d'avaler. La quantité de MDCF-2/RUSF réellement ingérée sera calculée en soustrayant le reste de la quantité offerte, ou en demandant à la mère lorsqu'elle est nourrie à la maison. Les enfants inscrits seront surveillés quotidiennement par des assistants de recherche sur le terrain pour tout effet secondaire/événement indésirable (par ex. éruption cutanée, urticaire due à une allergie alimentaire ou tout changement significatif de l'état clinique) pendant une semaine. Si des effets secondaires/événements indésirables sont observés, ils seront traités conformément aux normes de soins. Une procédure de production normalisée sera suivie pour contrôler la qualité des RUSF et MDCF-2. Chaque enfant se verra offrir 25 g de nourriture deux fois par jour au centre d'alimentation pendant les 4 premières semaines. Au cours du mois suivant, l'enfant se verra offrir 25 g de l'alimentation au centre d'alimentation et 25 g supplémentaires seront fournis dans un récipient propre à nourrir à la maison. Au cours du troisième mois, deux récipients séparés contenant un régime alimentaire de 25 g seront fournis chaque jour à chaque enfant inscrit au domicile du participant. Les informations sur l'alimentation seront recueillies auprès des mères et la quantité consommée sera mesurée à partir des laissés pour compte. Les aliments seront conservés dans des récipients stériles et à température ambiante entre les séances d'alimentation. La qualité de la nourriture sera assurée en faisant tester des échantillons des aliments préparés pour les microbes et les moisissures tous les 2 mois à l'icddr,b. Les échantillons sélectionnés pour les tests comprendront des aliments stockés pendant 2 et 6 heures après la cuisson. Les échantillons seront également testés pour l'aflatoxine tous les six mois dans les laboratoires SGS de Delhi.

Dans cette étude, l'état nutritionnel sera évalué par anthropométrie, en comparaison avec les normes de référence de croissance de l'OMS. Au début de l'étude, des informations seront recherchées sur les caractéristiques démographiques (richesse des familles, niveau de logement, structure familiale et caractéristiques parentales, etc.), et les FRA enregistreront le poids des enfants à l'aide d'une balance numérique de précision 2g (Seca, modèle 728, Allemagne), la longueur (à l'aide de l'infantomètre, Seca, modèle 416, Allemagne) et la circonférence de la partie supérieure du bras au millimètre près (à l'aide d'un ruban d'insertion non extensible). L'anthropométrie sera effectuée selon les procédures standard et toutes les mesures seront prises trois fois et la valeur moyenne sera enregistrée.

Collecte d'échantillons fécaux En phase aiguë de stabilisation, des échantillons fécaux seront collectés tous les deux jours. Pendant la phase de réhabilitation, des échantillons fécaux hebdomadaires (1-2g) seront prélevés dans les 30 minutes suivant la production (à domicile et ramenés à l'icddr,b) à l'aide de la SOP (Standard Operating Procedure) de collecte d'échantillons d'expéditeur sec d'azote utilisée dans la récente Essai clinique pré-POC (Annexe-A). Les échantillons seront stockés à -80◦C avant d'être envoyés au Gordon Lab à la fin de chaque étude pour l'analyse de la maturité du microbiote (mesurée avant, pendant et après l'arrêt du traitement avec MDCF-2 et RUSF) et l'évaluation par PCR de charge d'entéropathogènes dans les échantillons fécaux (mesurée avant et après le traitement au MDCF-2). Un total de 12 échantillons fécaux seront prélevés sur chaque enfant à différents moments pendant toute la période d'étude. En supposant 62 participants à l'étude / bras, un total de 1488 échantillons fécaux seront collectés dans cette étude. Parallèlement à cela, 2 g d'échantillon fécal seront prélevés chez les mères au début de la phase de stabilisation.

Collecte d'échantillons d'urine Un total de 7 échantillons d'urine (2 ml chacun) seront prélevés sur chaque enfant à différents moments pendant toute la durée de l'étude. En supposant 62 participants à l'étude / bras, un total de 868 échantillons d'urine seront collectés dans cette étude. Parallèlement à cela, 5 ml d'échantillons d'urine seront prélevés chez les mères au début de la phase de stabilisation.

Prélèvement d'échantillons sanguins Un total de 4 échantillons sanguins (2 ml chacun) seront prélevés à différents moments pendant toute la durée de l'étude. Chacun sera collecté auprès de chaque enfant au début de la phase de stabilisation, avant l'intervention ; fin du premier mois d'intervention et juste après la fin de l'intervention.

En supposant 62 participants à l'étude / bras, un total de 496 échantillons de plasma seront collectés dans cette étude. Parallèlement à cela, 5 ml d'échantillons de sang seront prélevés sur les mères au début de la phase de stabilisation.

L'état nutritionnel de la mère est associé à l'état nutritionnel de l'enfant, comme le montrent les résultats de notre étude MAL-ED dans huit pays. De plus, les facteurs anténatals et maternels étaient des déterminants précoces d'un rapport longueur-âge plus faible, et leur contribution est restée importante tout au long des 24 premiers mois de vie. Ainsi, nous enregistrerons la taille et le poids maternels. Afin de comprendre l'état biologique de nutrition de la mère, des échantillons de selles, de sang et d'urine seront demandés à la mère. Ces échantillons seront analysés pour le microbiote intestinal et la protéomique, et les résultats seront corrélés avec ceux des enfants inscrits.

Anthropométrie L'âge de l'enfant sera vérifié par rapport à la documentation (certificat de naissance ou carte de vaccination, si disponible) ou au rapport du soignant indiquant la date de naissance de l'enfant. La longueur sera mesurée par un infantomètre sensible à 0,1 cm. Le poids corporel sera mesuré par une balance sensible à 2g (SECA 7281321009, Hambourg, Allemagne). Les scores Z de la longueur pour l'âge (LAZ), du poids pour la taille (WLZ) et du poids pour l'âge (WAZ) seront calculés conformément aux normes de croissance de l'OMS de l'étude de référence sur la croissance multicentrique (MGRS). L'œdème sera examiné en appuyant sur le dessus des deux pieds pendant 3 secondes. La circonférence du bras à mi-hauteur (MUAC) sera mesurée à l'aide de la bande TALC MUAC (Royaume-Uni). Une standardisation régulière des équipements de mesure sera effectuée quotidiennement à l'aide de normes par un assistant de recherche sur le terrain formé.

Analyses d'échantillons de plasma et de matières fécales Les échantillons de plasma prélevés lors de cet essai seront envoyés au laboratoire du Dr Jeffrey Gordon au Centre des sciences du génome et de la biologie des systèmes de l'Université de Washington à St. Louis. Des méthodes avancées basées sur la spectroscopie de masse et les immunoessais seront utilisées pour obtenir de nouvelles connaissances sur le rôle de l'immaturité du microbiote intestinal et les effets de la tentative de réparation aiguë de cette immaturité avec un aliment complémentaire dirigé par le microbiote (MDCF-2) sur les biomarqueurs et les médiateurs de croissance saine. Des comparaisons seront faites avec le groupe témoin (c'est-à-dire ceux qui consomment la norme RUSF de référence). La chromatographie liquide ultra performante ciblée-spectrométrie de masse (UPLC-MS) et la chromatographie en phase gazeuse-spectrométrie de masse (GC-MS) seront utilisées pour profiler les analytes d'intérêt spécifique dans le plasma et/ou les échantillons fécaux, y compris les acides biliaires et les acides gras à chaîne courte (SCFA). ); marqueurs de la fonction mitochondriale (par exemple, β-hydroxybutyrate, acylcarnitines/acylCoAs, intermédiaires du cycle TCA); acides aminés dans le sérum et les échantillons fécaux [acides aminés à chaîne ramifiée, tryptophane et métabolites du tryptophane liés à la croissance et à l'état inflammatoire, y compris ceux produits par le métabolisme bactérien du tryptophane (par ex. dérivés de l'acide indole acétique)]. De plus, les médiateurs/biomarqueurs clés de la croissance linéaire (p. le collagène de type I (CTX, un marqueur de l'activité des ostéoclastes/résorption osseuse), et le propeptide amino-terminal du procollagène de type 1 (P1NP, un marqueur de l'activité des ostéoblastes/formation osseuse)], et l'inflammation systémique (CRP, AGP) seront quantifié à l'aide des dosages ELISA/Luminex établis. Les protéines dans le sang seront identifiées à l'aide du scan SOMAlogic qui permet d'identifier plus de 1300 protéines différentes. L'étude protéomique réalisée sur des échantillons de plasma d'enfants atteints de MAS dans notre précédent essai pré-POC réalisé à Dhaka a déjà démontré un certain nombre d'associations significatives et cliniquement pertinentes entre certaines protéines et des phénotypes cliniques à l'aide du scan SOMAlogic.

Les informations recueillies seront utilisées pour sélectionner des échantillons de matières fécales humaines à transplanter dans des animaux exempts de germes ; ces animaux, qui seront nourris avec les régimes de leurs donneurs de microbiote humain, seront utilisés pour caractériser davantage les mécanismes qui lient les prototypes MDCF-2, le microbiote intestinal et la physiologie/métabolisme de l'hôte. De plus, ces biomarqueurs plasmatiques et fécaux seront utilisés pour déterminer que le MDCF-2 favorise la réparation de l'immaturité du microbiote et améliore l'état biologique chez les enfants.

Calcul de la taille de l'échantillon Dans l'essai pré-POC de différents MDCF, le score Z poids/taille initial des enfants ayant reçu le MDCF2 (Microbiota Directed Complementary Food 2) était de -2,2 et après un mois de supplémentation était de -1,7. Si nous considérons la WLZ -2 au départ et -1,7 à la fin de l'étude, l'écart-type groupé (écart type) étant de 0,53, la taille de l'échantillon est de 49 dans chaque bras à une puissance de 80 % et un niveau de signification de 5 %. Avec 20% d'attrition, 62 enfants devront être inscrits dans chaque bras. Par conséquent, pour cet essai, 62 enfants recevront MDCF-2 et 62 enfants Rice-lentille RUSF.

L'analyse des données:

Les deux groupes d'enfants avec Post SAM-MAM seront comparés au départ et à différents moments, comme indiqué dans l'illustration sur la conception de l'essai. Les variables des résultats cliniques à comparer comprendront le taux de gain de poids, les indices anthropométriques et la morbidité. Tous les analytes mentionnés dans la section "Analyses d'échantillons plasmatiques et fécaux" seront comparés entre les groupes MDCF-2 et RUSF.

Assurance éthique pour la protection des droits de l'homme L'étude a été lancée après l'obtention de l'approbation de l'IRB (Institutional Review Board) par le comité d'examen de la recherche et le comité d'examen éthique de l'icddr,b. Avant l'inscription à l'étude, un consentement écrit éclairé est recueilli auprès du tuteur légal des participants à l'étude. Les identifications personnelles prises lors de l'inscription et d'autres procédures d'étude sont conservées sous clé.

Les risques/événements indésirables attendus pour ce protocole sont ceux liés à la collecte d'échantillons sanguins, à la collecte d'échantillons fécaux et à l'alimentation d'aliments complémentaires dirigés par le microbiote. Aucun de ceux-ci n'est qualifié d'événement indésirable grave (EIG). Les événements indésirables attendus (EAE) liés à la prise de sang sont les suivants :

• inconfort
• douleur
• introduction de l'infection
• saignement

• évanouissement ou ecchymose

  • Des précautions seront prises pour éviter l'introduction d'infections en désinfectant le site de ponction veineuse et en utilisant du matériel stérile
  • Le risque de saignement et d'ecchymose sera minimisé par l'application immédiate d'une pression après la ponction veineuse
  • Le participant (enfant) sera en position assise ou couchée pendant les prises de sang pour éviter les blessures dues à l'évanouissement

Tous les événements indésirables possibles seront traités de manière appropriée. Celles-ci comprendront :

• Vomissement
• Diarrhée
• Démangeaison de la peau
• Urticaire d'allergie alimentaire
• Distension abdominale
• Douleur abdominale Évaluation des événements indésirables Les événements indésirables graves et non graves seront évalués quant à leur gravité ; relation avec la participation à l'étude; les mesures prises; et les résultats. Tous les SAE doivent être signalés à l'ERC (Ethical Review Committee) de l'icddr,b dans les 24 heures suivant la prise de conscience du site de l'événement qui sera à son tour distribué au sponsor. Cela se fera par communication directe par téléphone, fax ou e-mail.

icddr,b Les directives recommandées par l'IRB seraient suivies pour classer les événements indésirables, le cas échéant.

Gravité:

1. Bénin
2. Modéré
3. Grave

Relation avec la participation à l'étude :

1. Définitivement lié : association temporelle claire, pas d'autre cause possible
2. Peut-être lié : association temporelle moins nette, autres causes possibles
3. Sans rapport : Indépendamment de l'étude, il existe des preuves que l'événement est définitivement lié à une autre étiologie

Actions:

Aucun Traitement curatif (plus d'une dose de médicament nécessaire) Abandon définitif de la participation à l'étude Hospitalisation Autre

Résultats :

Arrangements de collaboration résolus et inconnus Ce projet est un effort de collaboration entre les chercheurs de l'École de médecine de l'Université de Washington et le Centre international de recherche sur les maladies diarrhéiques du Bangladesh (icddr,b). Les travaux cliniques et les activités de terrain seront entrepris à Dhaka et à Kurigram, au Bangladesh, sous la supervision directe du chercheur principal, tandis que les analyses de laboratoire seront effectuées au Gordon Lab de l'Université de Washington à St. Louis. Toutes les unités de recherche et les chercheurs collaborateurs ont une longue histoire de collaborations internationales. Tous les chercheurs ont communiqué pendant le développement de ce projet et se sont engagés à sa mise en œuvre réussie.

Installations disponibles L'icddr,b dispose d'un laboratoire de transformation des aliments bien équipé qui facilitera les expériences sur les recettes diététiques. Nous avons des études en cours dans la région de Baoniabad à Mirpur. Plusieurs bureaux de projets y sont implantés. Plus important encore, nous avons une excellente relation avec la communauté. La Terre des Hommes qui gère le SNU à Kurigram où se déroulera une partie de l'essai. Dans le passé, nous avons contribué au développement du SNU et y avons mené des études. Le SNU a une grande réputation dans la communauté.

Center for Genome Sciences, Université de Washington à St. Louis :

Les échantillons de selles seront aliquotés à icddr,b. Des échantillons de selles seront envoyés au laboratoire du professeur Jeffery Gordon à St Louis pour le séquençage à haut débit du gène de l'ARN ribosomique 16S. La présence/l'abondance d'un large éventail d'entéropathogènes dans les échantillons de selles avant et après le traitement au MDCF-2 sera déterminée à l'aide d'un test basé sur la PCR (Polymerase Chain Reaction). Des échantillons de selles peuvent également être utilisés pour cultiver des souches bactériennes constitutives à utiliser dans de futures études sur des souris gnotobiotiques au Gordon Lab. Il est pertinent de mentionner ici que les tests et l'équipement pour les réaliser ne sont actuellement disponibles que dans quelques laboratoires dans le monde, dont celui de St Louis. Le Centre abrite une équipe interdisciplinaire, multidépartementale et multigénérationnelle de chercheurs de plusieurs écoles qui se concentrent sur la génomique comparative, la génomique statistique et la biologie des systèmes. souhaitent travailler à l'interface des sciences biologiques, physiques, informatiques et de l'ingénierie.