微生物群定向辅助食品 (MDCF) 的基于社区的临床试验，该食品由当地可用的食品成分制成，用于管理患有严重急性营养不良后中度急性营养不良 (Post-SAM MAM) 的儿童

背景：

中度急性营养不良 (MAM) 是一个主要的全球健康问题，被定义为消瘦（即 身高别体重在 <-2 和 -3 的 WHO 儿童生长标准 Z 分数之间）和/或中上臂周长 (MUAC) 大于或等于 115 毫米且小于 125 毫米。 根据 2017 年全球营养报告，2016 年全球有 8% 或 5200 万五岁以下儿童严重营养不良，发育迟缓或慢性营养不良影响了 23% 或 1.55 亿儿童。 2013 年，南亚约有六分之一的 5 岁以下儿童患有 MAM（即 17%）。 这些儿童患严重急性营养不良 (SAM) 的风险增加，并且死于常见传染病的风险是营养良好的同龄人的三倍。 孟加拉国是世界上儿童营养不良负担最重的国家之一。 根据 2014 年孟加拉国人口健康调查，该国 5 岁以下儿童的发育迟缓率为 36%，其中 12% 严重发育迟缓（LAZ <-3）。1 大约 15% 的儿童消瘦（体重-对于长度，WLZ <-2);超过 200 万儿童患有 MAM，而 3% 或 450,000 名儿童患有致命的 SAM。 据估计，营养不良每年给孟加拉国造成 10 亿美元的损失。

根据世界卫生组织的建议，患有 MAM 的 6-59 个月婴儿和儿童需要食用营养丰富的食物，以满足他们对体重和身高增加以及功能恢复的额外需求。 目前还没有关于用于治疗 MAM 儿童的辅助食品成分的循证建议。 因此，解决营养不良的干预措施应包括 MAM 管理的重要组成部分。 在粮食安全和其他发展战略中，应考虑 MAM 预防，因为粮食不安全现象猖獗的人口情况变得危急。 因此，重要的是制定依赖于当地可获得的食物成分的干预措施，这些食物成分少量就能够利用肠道微生物群对婴儿和儿童生长的有益力量。

限制营养干预影响的主要因素之一是营养不良的儿童无法增加摄入量以满足增加的代谢需求。 在 icddr,b 和圣路易斯华盛顿大学戈登实验室之间的合作研究中，在母乳、微生物群和免疫 (BMMI) 项目的快速启动阶段，我们将随机森林应用于细菌 16S rRNA（核糖体核糖核酸）数据集由生活在孟加拉国达卡城市贫民窟的出生队列儿童每月的粪便样本生成。 这些孩子表现出始终如一的健康成长 (WLZ -0.32+0.98)。 确定了细菌菌株，其比例代表定义了健康的肠道微生物群，因为它在出生后的前 2-3 年内聚集。 在 icddr 的一项随机临床试验中，b 对患有严重急性营养不良 (SAM) 的孟加拉国儿童进行了两种治疗性食品（进口即食治疗性食品 [RUTF, Plumpy'Nut] 与本地制备的大米/扁豆基 Khichuri 和 Halwa）的随机临床试验)，据观察，微生物群的不成熟性并未完全改善，只是暂时得到改善，在整个随访期间，儿童仍然明显发育迟缓和体重不足。 患有 MAM 的孟加拉国儿童也表现出显着的微生物群不成熟，尽管不如患有 SAM 的儿童严重。 因此，微生物群不成熟可以作为一种潜在的生物标志物来识别有营养不良风险的婴儿并监测治疗和预防策略。 在我们之前获得 ERC 批准的研究 (PR-09023) 中，我们比较了生活在米尔布尔贫民窟的健康儿童与因严重急性营养不良而住院治疗的儿童的肠道微生物群。 通过 16S 核糖体 RNA 测序评估微生物群。 我们发现患有 SAM 的儿童的肠道微生物群在时间上落后于健康儿童的微生物群。 例如，患有 SAM 的两岁儿童的肠道微生物群可能与一岁健康儿童的肠道微生物群相似。 这被称为肠道微生物群的不成熟。 我们开发了两个指标来表示这种肠道不成熟——相对微生物群成熟度指数和微生物群年龄别 Z 分数； SAM 与显着的相对微生物群不成熟有关，这种不成熟在营养干预后只能部分改善。 .

我们最近使用当地可用的食品原料——大米、扁豆和鹰嘴豆，开发了即用型治疗食品，这些食品与文化相关且可以接受。 我们通过双盲 RCT（随机对照试验）发现，我们开发的以孟加拉鹰嘴豆为基础和以大米扁豆为基础的 RUTF（即食治疗食品）与商业花生为基础的 RUTF 一样有效，深受儿童欢迎与山姆。 通过结合上述随机对照试验和过去 7-8 年进行的临床转化研究，我们已经确定了促进生长的年龄歧视性有益微生物群和支持这些有益微生物群增殖的当地可用食品成分。 此外，早期在华盛顿大学基因组科学中心对无菌动物进行的研究使我们认为，在达卡进行的研究中，食物成分（鹰嘴豆、大豆粉、花生和绿色香蕉）的组合值得认真研究饮食对刺激生长歧视性微生物群增殖以及成本和可持续性的影响。

最近，我们成功完成了一项 IRB 批准的研究，“概念临床试验的预验证，以优化先导微生物群导向的补充食品 (MDCF) 原型，使其能够修复微生物群不成熟并建立其感官可接受性”(PR-16099)。 这项试点研究的主要目的是通过刺激肠道微生物群特定成员的增殖来证明某些补充食品对患有 MAM 的幼儿具有有益作用的概念预验证，这些微生物群以其促进生长的作用而闻名. 在那项试点研究中，我们研究了适合年龄的微生物群 Z (MAZ) 评分以及肠道微生物群良好成员增殖对某些身体系统的影响。 本研究旨在测试三种本地生产的 MDCF 原型（MDCF-1、MDCF-2 和 MDCF-3）和本地生产的基于大米扁豆的 RUSF 的效果。 Pre POC 试点试验的结果最终表明，三种 MDCF 中的一种（即 MDCF-2）与某些氨基酸水平升高有关，这些氨基酸在长骨发育、大脑发育和增加生产中起着关键作用IGF-1（胰岛素样生长因子-1）是儿童生长生物学的关键因素。 它还能有效刺激肠道微生物群中促生长成员的生长，例如 Faecalibacterium prausnitzii。 根据这项 POC 前试点试验的结果，我们现在计划使用最有希望的 MDCF-2 对 SAM 后 MAM 儿童的管理进行更大规模的临床试验，主要终点是线性生长。

研究设计和方法 我们将在大约两年的时间里对患有 Post-SAM MAM（WLZ <-2 至 -3）的 12-18 个月大的儿童进行临床试验。 该试验将在达卡市米尔布尔地区的 Bauniabadh 和​​ RADDA MCH-FP 诊所以及库里格拉姆的 Terre des Hommes (TdH) 运营的特殊营养部门 (SNU) 进行。 之所以选择 TdH SNU，是因为我们希望加快注册速度，而且我们在那里工作的记录良好；我们对本地 RUTF 进行的最后一次功效试验也部分在那里进行。 实地研究助理 (FRA) 将按照预先指定的纳入标准，通过家庭调查对儿童进行筛选和登记。 满足入组标准并获得父母或法定监护人同意参与研究后，将入组具有各自母亲/看护人的儿童，并根据计算机生成的随机数将其随机分配到两个组中的一个。 指定饮食类型的代码将保存在每个人的封闭不透明信封中，只有在护理人员签署同意书后才会打开。 该试验不属于任何典型的药物试验。 但是，如果我们要在任何阶段考虑该试验，那么它将属于第二阶段，因为我们已经进行了一项试点试验，研究对年龄别微生物群 Z 评分的影响以及不利影响。

首先，将是稳定阶段，持续 4-8 天，在此期间，每个孩子都将按照 WHO（世界卫生组织）/icddr,b SAM 管理指南进行管理。 这包括程序化喂养、微量营养素补充、明智的补液、广谱抗生素治疗以及及时识别和处理并发症。 从稳定阶段恢复后，营养康复将持续约 2 周，在此期间将提供基于当地饮食 Halwa 和 Khichuri 的 icddr,b 护理标准饮食方案。 从 SAM 毕业到 MAM（无水肿 WLZ <-2）后，儿童将被随机分配到两个臂之一（基于米扁豆的 RUSF 和 MDCF-2）。

随机化后营养康复部分将分为 3 个阶段。 第一阶段将包括在米尔布尔和库里格拉姆建立的营养中心每天两次现场喂养这种饮食，为期一个月。 第二阶段将需要在营养中心和家中一次给孩子们喂食。 在第三阶段，孩子们将在家中每天两次接受这种饮食。 在干预后阶段，孩子们将被观察 4 周。 在整个研究期间，将收集人体测量数据、食物多样性数据和样本（血液、粪便和尿液）。 我们将在所有研究参与者的饮食干预期间使用食物频率问卷收集过去 24 小时内每周的定性饮食摄入数据。

随机化 在稳定和营养康复阶段之后，当孩子们达到 MAM 状态时，他们将被随机分配到两个组之一（基于米扁豆的 RUSF 和 MDCF-2）。 分配的治疗类型的代码将保存在封闭的不透明信封中，直到分配给注册的孩子。

第 1 臂 - 基于米扁豆的 RUSF（基本原理：SAM 后护理的参考标准，MAM；基于其对儿童生长和肠道微生物群的影响的知识）第 2 臂 - MDCF-2 原型，包含四种不含粉末的免费食品成分牛奶（理由：以最近完成的促进生长促进微生物群和对生长的积极影响的预 POC 临床试验的证据为主导）。

SAM 儿童的招募、筛查和同意将通过在 icddr,b 达卡医院、米尔布尔的 RADDA-MCH-FP 诊所、库里格拉姆的 TdH SNU 以及通过在米尔布尔和Kurigram 区的 Sadar、Ulipur 和 Chilmari Upazilas。 那些需要稳定护理的人将入住上述设施，这些设施将提供 SAM 急性期治疗的标准护理。 简单来说;这种稳定护理基于计划喂养、微量营养素补充、明智的补液、广谱抗生素治疗以及及时识别和处理并发症。 随后，他们将接受标准的营养康复饮食方案治疗。 毕业后进入 MAM，将联系符合 SAM 后 MAM 试验的 MAM 标准的儿童的父母参加该研究。 训练有素的实地研究助理 (FRA) 将详细解释研究，回答家长的任何问题，并邀请家长让孩子参加研究。

在研究开始时，将寻求有关人口统计特征的信息，FRA 将使用精度为 2 g 的数字秤（Seca，型号 728，德国）记录儿童的体重，长度（使用婴儿计，Seca，型号 416，德国), 和中上臂周长精确到毫米（使用非拉伸插入胶带）。 人体测量学将按照标准程序进行。 研究参与者将被要求到指定的营养中心进行营养治疗，以确保摄入 MDCF/RUSF。 他们将获得一个联系诊所工作人员的电话号码，如果需要，工作人员可以在事先安排的情况下访问家庭，直接观察营养治疗。 营养康复后三个月的 MDCF-2 或 RUSF 程序化喂养如图所示。

MDCF-2 和 RUSF 的制备：

基于上述 Pre-POC 研究中确定的辅助食品成分的相容组合，我们将在米尔布尔和库里格拉姆的 icddr,b 食品加工厂准备足够数量的 MDCF-2 和 RUSF 用于临床研究。 这两种饮食的能量密度和微量营养素含量将相匹配。 MDCF-2 的能量密度目标为 125 kcal/25 g（每份），热量分布目标为 45-50% 来自脂肪，8-10% 来自蛋白质。 两份 MDCF-2 或 RUSF 将提供 250 Kcal 和必要的微量营养素，此外还为有益的微生物群增殖提供基质。 这些份量是为了补充这些孩子在家中接受的日常饮食。 建议母亲/主要照顾者保持孩子目前的饮食和母乳喂养习惯。

MDCF-2 原型的开发实验和感官特性的评估已经在 Pre-POC 临床试验中完成。

每天都会准备食物，以确保在准备过程中不会发生意外污染和营养损失。 虽然生食原料将从当地市场非常谨慎地采购并以合理的数量储存，但我们将在准备好 MDCF-2 和 RUSF 的同一天准备、分发和喂养孩子们。

收到原料（大米/扁豆/鹰嘴豆）后，我们会取出可以丢弃的异物/谷物或种子（如果有的话），然后在敞口的平底锅中烘烤原料。 我们将温度保持在120-130°C进行烘烤。 通常每种原料烤100g需要8-10分钟。 连续搅拌对于确保单一种子/谷物的烘烤至关重要。 烘烤完成后，我们将其放置一旁冷却，然后进行研磨。 我们将取出粉末并使用过滤器过滤。 过滤4至5次后，我们将细粉与其他成分（奶粉/油）混合。 我们还会将糖磨碎，细粉将用于混合。 最后，我们将添加预先称重的预混粉。 整个绿色香蕉的加工与其他成分不同。 将带皮的青香蕉放入深锅中，放入沸水（100°C-110°C）中煮约 17-20 分钟，直至熟透和变软。 将青香蕉的皮剥掉，取出可食用的白色部分，磨成小块。 然后将它们放入锅中冷却。 我们将用勺子/手压机粉碎小块香蕉。 将记录所有其他成分的重量。 潜在的食谱将通过在电动搅拌机中混合所有成分而小批量生产。 icddr,b 调查人员将监测不同步骤下的食物制备，即烘烤、粒度减小、均匀混合和供应给营养中心。 每天都会准备食物，以确保在准备过程中不会发生意外污染和营养损失。 虽然生食原料将从当地市场非常谨慎地采购并以合理的数量储存，但我们将在准备好 MDCF 和 RUSF 的同一天准备、分发和喂养孩子们。

喂食环节：

第一个月，儿童和母亲/看护人最好在每天上午 9 点至 11 点和下午 3 点至 5 点之间到场点设立的营养中心。 将要求母亲在观察到的进餐时间之前的 2 小时内不要喂食任何食物和母乳。 根据随机化决定，每份儿童将获得 25 克 MDCF-2 或 RUSF。 母亲们将被要求用勺子喂孩子预先称重的食物，直到她/他拒绝进食，如下所述。 暂停两分钟后，将再次提供相同的饮食，直到她/他再次拒绝。 在第二次两分钟的暂停后，将第三次提供饮食，直到再次被拒绝。 在这第三次拒绝之后，喂食事件将被视为“终止”。 喂食的持续时间（不包括中间的“休息期”）将由秒表记录，并记录喂食的总持续时间。 此喂食情节将持续最多 60 分钟。 还将提供测量体积的白开水，并将测量在这 60 分钟的进餐期间摄入的水量。 喂养事件将在受过训练的研究人员的直接监督下进行。 如果儿童将头从食物上移开、哭泣、夹住嘴巴或咬紧牙齿，或变得烦躁、吐出食物或拒绝吞咽，将被视为拒绝进一步摄入。 实际摄入的 MDCF-2/RUSF 的数量将通过从提供的数量中减去剩余的数量来计算，或者在家里喂食时询问母亲。 现场研究助理将每天监测登记的儿童是否有任何可能的副作用/不良事件（例如 因食物过敏或临床状态的任何显着变化引起的皮疹、荨麻疹）一周。 如果观察到任何副作用/不良事件，将根据护理标准进行治疗。 将遵循标准化生产程序来控制 RUSF 和 MDCF-2 的质量。 在前 4 周内，喂养中心每天两次为每个孩子提供 25 克的饮食。 在接下来的一个月里，喂养中心将向孩子提供 25 克的饮食，另外 25 克将装在一个干净的容器中，以便在家中喂养。 在第三个月，每天将在参与者家中为每个登记的孩子提供两个装有 25 克饮食的单独容器。 将从母亲那里收集喂养信息，并从剩下的部分开始计算食用量。 食物将保存在无菌容器中，并在喂食期间保持室温。 通过每 2 个月在 icddr,b 对准备好的食品样品进行微生物和霉菌检测，确保食品质量。 选择用于测试的样品将包括烹饪后储存 2 小时和 6 小时的食物。 这些样品还将每六个月在德里的 SGS 实验室进行一次黄曲霉毒素检测。

在这项研究中，将通过人体测量学评估营养状况，并与 WHO 生长参考标准进行比较。 在研究开始时，将寻求有关人口统计特征的信息（家庭财富、住房标准、家庭结构和父母特征等），FRA 将使用精度为 2g 的数字秤（Seca，型号 728，德国），长度（使用婴儿计，Seca，型号 416，德国），以及中上臂周长精确到毫米（使用非拉伸插入胶带）。 人体测量学将根据标准程序进行，所有测量将进行三次并记录平均值。

粪便样本采集 在稳定的急性期，将每隔一天收集一次粪便样本。 在康复阶段，每周将在生产后 30 分钟内收集粪便样本 (1-2g)（在家中并运回 icddr，b），使用最近使用的氮气干燥托运样本收集 SOP（标准操作程序） POC 前临床试验（附录 A）。 标本将被储存在 -80°C，然后在每项研究结束时被送到戈登实验室进行微生物群成熟度分析（在 MDCF-2 和 RUSF 治疗停止之前、期间和之后测量）和基于 PCR 的评估粪便样本中的肠病原体负荷（在 MDCF-2 处理前后测量）。 在整个研究期间的不同时间点，将从每个孩子身上收集总共 12 个粪便样本。 假设每组 62 名研究参与者，则本研究将收集总共 1488 份粪便标本。 在稳定阶段开始时，还将从母亲那里收集 2 克粪便样本。

尿液样本采集 在整个研究期间，将在不同时间点从每个孩子身上采集总共 7 份尿液样本（每份 2 毫升）。 假设每组 62 名研究参与者，则本研究将收集总共 868 份尿液样本。 在稳定阶段开始时，还将从母亲那里收集 5 毫升尿液样本。

血样采集 在整个研究期间，将在不同时间点采集总共 4 份血样（每份 2 毫升）。 将在稳定阶段开始时从每个孩子那里收集每一个，然后再进行干预；干预的第一个月末和干预完成后。

假设每组 62 名研究参与者，则本研究将收集总共 496 份血浆样本。 与此同时，将在稳定阶段开始时从母亲身上采集 5 毫升血样。

正如我们在八个国家开展的 MAL-ED 研究的结果所示，母亲的营养状况与儿童的营养状况相关。 此外，产前和母体因素是年龄别身长较短的早期决定因素，它们的贡献在生命的头 24 个月中仍然很重要。 因此，我们将记录产妇的身高和体重。 为了解母亲的生理营养状况，将询问母亲的粪便、血液和尿液样本进行登记。 将对这些样本进行肠道微生物群和蛋白质组学分析，并将结果与​​登记儿童的结果相关联。

人体测量学 孩子的年龄将根据文件（出生证明或免疫卡，如果有的话）或看护人关于孩子出生日期的报告进行核实。 长度将通过灵敏度为 0.1 厘米的婴儿计测量。 体重将通过对 2g 敏感的天平（SECA 7281321009，德国汉堡）测量。 年龄别身长 (LAZ)、身长别体重 (WLZ) 和年龄别体重 (WAZ) Z 分数将按照多中心生长参考研究 (MGRS) WHO 生长标准进行计算。 水肿将通过按压双脚的上侧 3 秒钟来检查。 上臂中围 (MUAC) 将使用 TALC MUAC 胶带（英国）测量。 测量设备的定期标准化将由训练有素的现场研究助理每天使用标准进行。

血浆和粪便样本的分析 从该试验中收集的血浆样本将被送到位于圣路易斯的华盛顿大学基因组科学和系统生物学中心的 Jeffrey Gordon 博士的实验室。 先进的基于质谱和免疫测定的方法将用于获得关于肠道微生物群不成熟的作用的新知识，以及尝试用先导微生物群定向补充食品 (MDCF-2) 急性修复这种不成熟对生物标志物和介质的影响的新知识健康成长。 将与对照组（即那些消耗参考 RUSF 标准的人）进行比较。 靶向超高效液相色谱-质谱 (UPLC-MS) 和气相色谱-质谱 (GC-MS) 将用于分析血浆和/或粪便样品中特别感兴趣的分析物，包括胆汁酸和短链脂肪酸 (SCFA) );线粒体功能标志物（例如，β-羟基丁酸、酰基肉碱/酰基辅酶 A、TCA 循环中间体）；血清和粪便样品中的氨基酸 [支链氨基酸、色氨酸和与生长和炎症状态相关的色氨酸代谢物，包括细菌色氨酸代谢产生的那些（例如 吲哚乙酸衍生物）]。 此外，线性生长（例如生长激素和 IGF-1）、能量利用（胰岛素、瘦素）和骨骼生物学的关键介质/生物标志物 [IL-6 (interleukin-6)、骨保护素、骨保护素的 C 端肽I 型胶原蛋白（CTX，破骨细胞活性/骨吸收的标志物）和 1 型前胶原的氨基末端前肽（P1NP，成骨细胞活性/骨形成的标志物）]，以及全身炎症（CRP、AGP）使用已建立的 ELISA/Luminex 测定法进行量化。 血液中的蛋白质将使用 SOMAlogic 扫描进行识别，该扫描可以识别 1300 多种不同的蛋白质。 我们之前在达卡进行的预 POC 试验中对 SAM 儿童血浆样本进行的蛋白质组学研究已经证明，某些蛋白质与使用 SOMAlogic 扫描的临床表型之间存在许多重要的临床相关关联。

收集到的信息将用于选择人类粪便样本移植到无菌动物体内；这些动物将以其人类微生物群捐赠者的饮食为食，将用于进一步表征将 MDCF-2 原型、肠道微生物群和宿主生理学/代谢联系起来的机制。 此外，这些血浆和粪便生物标志物将用于确定 MDCF-2 促进微生物群不成熟的修复并改善儿童的生物状态。

样本量计算 在不同 MDCF 的预 POC 试验中，接受 MDCF2（微生物群定向补充食品 2）的儿童的基线身长别体重 Z 评分为 -2.2，补充一个月后为 -1.7。 如果我们考虑基线的 WLZ -2 和终点线的 -1.7，合并 SD（标准偏差）为 0.53，则每组样本量为 49，功率为 80%，显着性水平为 5%。 如果有 20% 的自然减员，每组将需要招收 62 名儿童。 因此，对于该试验，62 名儿童将接受 MDCF-2 和 62 名儿童米扁豆 RUSF。

数据分析：

两组患有 Post SAM-MAM 的儿童将在基线和不同时间点进行比较，如试验设计插图所示。 用于比较的临床结果变量将包括体重增加率、人体测量指标和发病率。 “血浆和粪便样品分析”部分中提到的所有分析物将在 MDCF-2 和 RUSF 组之间进行比较。

保护人权的伦理保证 该研究在获得 ICDDR、B 研究审查委员会和伦理审查委员会的 IRB（机构审查委员会）批准后开始。 在参加研究之前，已从研究参与者的法定监护人处获得书面知情同意书。 在注册和其他学习过程中获得的个人身份证明被锁起来。

该协议的预期风险/不良事件与血液样本收集、粪便样本收集和微生物群定向补充食品的喂养有关。 这些都不符合严重不良事件 (SAE) 的条件。 与抽血相关的预期不良事件 (EAE) 如下：

• 不适
• 疼痛
• 感染的介绍
• 流血的

• 晕厥或瘀伤

  • 将采取预防措施，通过对静脉穿刺部位进行消毒和使用无菌设备来避免感染
  • 静脉穿刺后立即施加压力可将出血和瘀伤的风险降至最低
  • 参与者（儿童）在抽血时将处于坐位或仰卧位，以避免因晕厥而受伤

所有可能的不良事件都将得到适当处理。 这些将包括：

• 呕吐
• 腹泻
• 皮疹
• 食物过敏引起的荨麻疹
• 腹胀
• 腹部疼痛 不良事件评估 严重和非严重不良事件都将评估严重程度；与研究参与的关系；所采取的行动;和结果。 所有 SAE 必须在研究中心知晓事件后的 24 小时内报告给 icddr,b 的 ERC（伦理审查委员会），然后分发给赞助商。 这将通过直接电话沟通、传真或电子邮件来完成。

icddr,b 将遵循 IRB 推荐的指南对不良事件进行分级（如果发生的话）。

严重性：

1. 温和的
2. 缓和
3. 严重

与研究参与的关系：

1. 绝对相关：明确的时间关联，没有其他可能的原因
2. 可能相关：不太明确的时间关联，可能有其他原因
3. 无关：独立于研究，有证据表明事件肯定与另一种病因有关

动作：

无 补救治疗（需要超过一剂药物） 永久停止参与研究 住院 其他

结果：

已解决的持续未知合作安排 该项目是华盛顿大学医学院和孟加拉国国际腹泻病研究中心 (icddr,b) 的研究人员之间的合作成果。 临床工作和现场活动将在首席研究员的直接监督下在孟加拉国达卡和库里格拉姆进行，而实验室分析将在圣路易斯华盛顿大学的戈登实验室进行。 所有研究单位和合作研究人员都有长期的国际合作历史。 所有调查人员在该项目的开发过程中进行了沟通，并致力于其成功实施。

可用设施 icddr,b 拥有一个设备齐全的食品加工实验室，可促进饮食食谱的实验。 我们在米尔布尔的 Baoniabad 地区正在进行研究。 许多项目办公室都设在那里。 更重要的是，我们与社区有着良好的关系。 在 Kurigram 运行 SNU 的 Terre des Hommes 将在那里进行部分试验。 过去我们帮助首尔国立大学的发展，并在那里进行了研究。 首尔国立大学在社区中享有很高的声誉。

圣路易斯华盛顿大学基因组科学中心：

粪便样品将在 icddr,b 等分。 粪便样本将被送到圣路易斯的 Jeffery Gordon 教授的实验室进行高通量 16S 核糖体 RNA 基因测序。 将使用基于 PCR（聚合酶链反应）的测定法确定 MDCF-2 处理前后粪便样本中多种肠病原体的存在/丰度。 粪便样本也可用于培养组成细菌菌株，用于未来在戈登实验室对无菌小鼠进行的研究。 在这里值得一提的是，目前只有世界上为数不多的几个实验室，包括圣路易斯的实验室，才能提供进行这些试验的化验和设备。 该中心是一个跨学科、多部门、多代研究团队的所在地，该团队由来自多所学校的研究人员组成，专注于比较基因组学、统计基因组学和系统生物学。希望在生物、物理、计算和工程科学的交叉领域工作。