微生物の代謝物と妊娠研究の結果 (MMOPS)

研究デザイン

全体計画: 妊娠全体にわたる母親の微生物代謝物である TMAO を含む母親の代謝マーカーと、妊娠高血圧症の発症との関連を評価する。

研究デザインと方法:

この前向きの縦断的コホートには、妊娠第 1 期（妊娠 10 ～ 14 週）の妊婦患者が登録されます。 血漿、血清、血液 RNA および尿サンプルは、食事評価および自己申告による人口統計情報とともに登録時に収集されます。 研究室で使用する血液の総量は 22.5 cc (10 ml EDTA チューブ 1 本、10 ml 血清分離チューブ 1 本、および 2.5 ml PAXgene 血液 RNA チューブ 1 本) になります。 研究機関が他の必要な出生前検査機関と連携して採血される場合、一般的に注文される出生前検査機関の組み合わせに応じて、採血時に予想される最大血液量は 42 ～ 50 cc になります。 妊娠中の被験者から採血される血液の総量（臨床採血および研究採血を含む）は、2 週間で 50ml を超えてはなりません。 血漿、血清、血液 RNA、および尿サンプルは、妊娠第 2 学期の 24 ～ 28 週目に再び収集されます。 さらに、出産入院時に母体の血漿、血清、血液RNA、尿が収集されます。 出産後に臍帯血の 10 cc サンプルが採取され、胎盤は評価のために病理検査に送られます。 3 つの母体サンプルすべてと臍帯血の TMAO レベルおよびその他の代謝マーカーを測定します。 代謝バイオマーカーの分子検査のために、血漿採取の軟膜からの DNA と PAXgene 血液管からの RNA が取得されます。 胎盤は血管の病理に注意しながら病理学的に検査されます。 さらに、面接官がガイドする ASA24 (自動自己管理型 24 時間食事評価ツール) を使用して、各時点での食事履歴が取得されます。この ASA24 は、国立衛生研究所の Web サイトを通じて無料で提供される Web ベースの調査です。研究者専用のパスワードで保護されたアカウント (https://epi.grants.cancer.gov/asa24/)。

適格基準 研究対象者には、出生前ケアを受けており、クリーブランド クリニック (オハイオ州の拠点) で出産を予定している 18 ～ 45 歳の妊娠者が含まれます。 患者は英語を話し、読むことができ、登録時に胎児の異常が知られていない、子宮内妊娠を1回だけ妊娠していることが条件となります。 多胎、染色体異常、重大な先天異常、先天性感染症と診断された胎児をもつ患者は除外される。

被験者の特定と募集 研究チームは、募集のために選択された研究施設の超音波スケジュールを検討します。 電子医療記録 (EMR) が適格であるかどうかを確認します。 適切な候補者として特定された場合、研究についてアプローチするようフラグが立てられます。 私たちの研究についてさらに詳しく聞くことに同意した場合、患者は研究スタッフと面会し、適格性とインフォームドコンセントを検討します。インフォームドコンセントには、利点、欠点、潜在的な害、研究のスケジュール、患者の期待が詳しく記載されています。 参加を選択した場合、患者と同意したスタッフはインフォームド・コンセント文書に署名します。 参加に同意すると、患者には研究 ID が割り当てられ、REDCap データベースに記録されます。 この訪問では、自己申告による人口統計情報、食事歴、および最初の採血/採尿が行われます。

また、超音波検査の予約の前に確認できるよう、潜在的な参加者に MyChart 経由で予備チラシを送信します。 到着すると、彼女は研究についてもっと聞きたいかどうか尋ねられ、採用プロトコルの残りの部分は前述したように行われます。 採用の成功は継続的に評価され、パターンがある場合（研究の詳細やインフォームドコンセントを確認する時間が不十分な場合など）、プロトコルは修正されます。

成果の定義

1. 妊娠高血圧症候群には、1) 妊娠 20 週以降に発症する、タンパク尿やその他の子癇前症関連終末器官機能不全の兆候/症状を伴わない高血圧と定義される妊娠高血圧症、2) 高血圧とタンパク尿の新たな発症、または新たな発症と定義される子癇前症が含まれます。高血圧および重大な末端臓器機能不全（タンパク尿の有無にかかわらず）。通常、以前は正常血圧だった患者が妊娠 20 週以降に発症します。3）慢性高血圧に重なる子癇前症は、高血圧の悪化または抵抗性高血圧、タンパク尿の新たな発症として定義されます。 /または慢性高血圧症患者における妊娠20週以降の重大な新たな末端臓器機能不全。
2. 妊娠糖尿病：1）3時間100グラムの経口ブドウ糖負荷試験で妊娠糖尿病のカーペンター/クースタン診断基準以上の血糖値が2以上、または2）1時間50グラムの経口ブドウ糖負荷試験で≧200 mg/dL経口ブドウ糖負荷試験。
3. 自然早産：妊娠37週0日未満で自然に出産すること。
4. 低出生体重児: 出生体重が 2500 グラム未満。

アッセイ: 血漿、血清、尿、臍帯血サンプルは、Hazen 研究室で確立された安定同位体希釈 LC-MS/MS 法を使用して TMAO についてアッセイされます。

データ分析計画

データおよびサンプル収集 瀉血および中間尿の自己収集は、事前に指定された時点 (10 ～ 14 週、24 ～ 28 週、および出産のための入院時) に実行されます。 胎盤と臍帯血のサンプルは、出産後に臨床医によって収集されます。 血液と尿の検体は、運輸省を通じて危険物訓練と認定を受けた S. Graves によってラーナー研究所の研究室に輸送されます。 胎盤サンプルも同様に、適切なプロトコルに従ってメインキャンパスの病理学部に輸送され、処理されます。 食事評価データは、Web ベースの NIH 自動自己管理 24 時間 (ASA24) 食事評価ツール研究者のパスワードで保護されたアカウント内で収集されます。 患者の臨床的特徴、転帰、初発妊娠、および新生児の転帰は、患者の医療記録から収集されます。

データとサンプルの保管 データのセキュリティは、患者データの収集と分析に関与するチームメンバーへのアクセスを制限することによって確保されます。 医療記録データは、CCF REDCap データベースを通じて安全に保管されます。 食事評価データも同様に、Web ベースの NIH 自動自己管理 24 時間 (ASA24) 食事評価ツールの研究者のパスワードで保護されたアカウント内に保存されます。 安全モニタリングには、検体採取のための安全で清潔な臨床環境の確保、静脈穿刺のための適切な安全プロトコルの遵守、指定された臨床エリアでの消耗品の適切な廃棄が含まれます。 匿名化された血液検体は、ラーナー研究所のスタンリー・ヘイゼン研究所で保管および分析されます。 匿名化された胎盤は、メインキャンパスの病理学研究室で保管および処理されます。

統計分析：

サンプルサイズ 妊娠中の TMAO に関する情報が限られているため、検出力計算では、有意水準 0.05、検出力 80%、合計サンプルサイズ 10 の患者 200 名で、2 サンプルの T 検定を使用してグループ間の平均 TMAO 差を検出すると推定されました。 ％ 中退率。 文献から推定された TMAO の標準偏差は 0.61 ～ 10.15 マイクロモル/L の範囲であり、妊娠群と正常群の高血圧障害の比率が 1:10 であると仮定すると、検出可能な平均 TMAO 差は 0.451 ～ 7.497 マイクロモル/L と計算されました。 。

分析計画:

妊娠高血圧症候群のある患者を、そうでない患者と比較します。 ほぼ正規分布する連続測定値は、平均値と標準偏差を使用して要約され、2 サンプルの t 検定を使用して比較されます。 正規性からの逸脱を示す連続的な測定値と順序的な測定値は、中央値と四分位数を使用して要約され、ウィルコクソンの順位和検定を使用して比較されます。 カテゴリ因子は度数とパーセンテージを使用して要約され、ピアソンのカイ二乗検定またはフィッシャーの正確確率検定を使用して比較されます。 グループのベースライン特性が異なる場合、臨床的に重要な要素を調整する線形回帰が実行されます。 最終データの分布に応じて、TMAO レベルと他の連続変数の間でピアソン相関またはスピアマン相関が計算されます。 カテゴリカル因子の各レベルについて、TMAO レベルは平均と標準偏差、または中央値と四分位数を使用して要約され、ANOVA またはクラスカル ウォリス検定を使用して比較されます。 すべての分析は SAS (バージョン 9.4、 SAS Institute (ノースカロライナ州ケアリー))、p < 0.05 は統計的に有意であるとみなされます。

実現可能性

学際的な調査チームの経験と、産婦人科研究所と心臓血管・代謝科学部門の既存の研究インフラにより、1 年間の助成期間内でこの提案の実現可能性と成功が保証されます。 すべてのアッセイと分析を実行するための専門知識が確認されています。

研究の意義

HDP は将来の CVD の危険因子です。 HDP、そしておそらくは将来のCVDの発症に寄与するメカニズムを帰すことができれば、妊娠初期、さらには妊娠初期に人々をスクリーニングし、転帰を改善するために介入できる可能性があります。 母親の食事、腸内微生物組成およびその代謝産物の生成が、妊娠中の血管および内皮機能にどのような影響を与えるかについてのさらなる理解は新たなものである。 この研究の結果は、母体の健康をどのように概念化し、治療介入のための新しく刺激的な手段を提供するかにおいて変革をもたらす可能性があります。