미생물 대사산물 및 임신 연구 결과 (MMOPS)

연구 설계

전체 계획: 임신 전반에 걸쳐 모체 미생물 대사산물인 TMAO를 포함한 모계 대사 지표와 임신 중 고혈압 장애 발생과의 연관성을 평가합니다.

연구 설계 및 방법:

이 전향적 종단적 코호트는 임신 초기(임신 10~14주)에 임신한 환자를 등록합니다. 혈장, 혈청, 혈액 RNA 및 소변 샘플은 등록 시 식이 평가 및 자가 보고 인구통계 정보와 함께 수집됩니다. 연구실 목적으로 사용되는 총 혈액량은 22.5cc입니다(10ml EDTA 튜브 1개, 10ml 혈청 분리기 튜브 1개, PAXgene 혈액 RNA 튜브 2.5ml 1개). 다른 필요한 산전 검사실과 협력하여 연구실을 구성하는 경우 일반적으로 주문한 산전 검사실의 조합에 따라 채혈 시 예상되는 최대 혈액량은 42~50cc입니다. 임신한 피험자로부터 채혈한 혈액의 총량(임상 및 연구 채혈 포함)은 2주 동안 50ml를 초과하지 않아야 합니다. 혈장, 혈청, 혈액 RNA 및 소변 샘플은 임신 2분기인 24~28주에 다시 수집됩니다. 또한, 산모의 혈장, 혈청, 혈액 RNA 및 소변은 분만 승인 시 수집됩니다. 분만 후 10cc의 제대혈 샘플을 채취하고 태반을 병리과로 보내 평가합니다. 우리는 세 산모 샘플 모두와 제대혈 샘플에서 TMAO 수준과 기타 대사 지표를 측정할 것입니다. 대사 바이오마커의 분자 테스트를 위해 혈장 수집 연막의 DNA와 PAXgene 혈액 튜브의 RNA를 얻습니다. 태반은 혈관 병리에 주의를 기울여 병리학적으로 검사됩니다. 또한, 면접관 안내 ASA24(자동 자가 관리 24시간 식이 평가 도구)를 사용하여 각 시점에서 식이 이력을 얻습니다. 연구원 전용 비밀번호로 보호된 계정(https://epi.grants.cancer.gov/asa24/).

자격 기준 연구 모집단에는 산전 관리를 받고 클리블랜드 클리닉(오하이오 지역)에서 출산할 계획을 갖고 있는 18~45세의 임산부가 포함됩니다. 환자는 영어로 말하고 읽을 수 있어야 하며, 등록 당시 알려진 태아 기형 없이 단 한 번의 자궁 내 임신이 가능해야 합니다. 다태 임신, 염색체 이상, 주요 선천적 결함 또는 선천성 감염으로 진단된 태아가 있는 환자는 제외됩니다.

피험자의 식별 및 모집 연구팀은 모집을 위해 선택된 연구 장소에 대한 초음파 일정을 검토할 것입니다. 우리는 전자의무기록(EMR)에 대한 적격성을 검토할 것입니다. 적합한 후보자로 확인되면 연구에 관해 접근하도록 지정됩니다. 우리 연구에 대해 더 많은 내용을 듣는 데 동의하는 경우, 환자는 연구 직원을 만나 적격성과 사전 동의를 검토할 것입니다. 여기에는 이점, 단점 및 잠재적 해로움, 연구 일정 및 환자의 기대 사항이 자세히 설명되어 있습니다. 참여하기로 선택한 경우, 환자와 동의하는 직원은 사전 동의 문서에 서명하게 됩니다. 참여에 동의한 후 환자에게 연구 ID가 할당되며 이는 REDCap 데이터베이스에 기록됩니다. 자가 보고된 인구통계 정보, 식이 이력 및 초기 채혈/소변 수집이 이번 방문에서 수행됩니다.

또한 초음파 예약 전에 검토할 수 있도록 잠재 참가자에게 MyChart를 통해 예비 전단지를 보낼 것입니다. 도착하자마자 그녀는 연구에 대해 더 듣고 싶은지 질문을 받을 것이며 나머지 모집 프로토콜은 이전에 설명한 대로 따를 것입니다. 모집 성공 여부는 지속적으로 평가되며, 패턴이 있는 경우(예: 연구 세부 사항 및 사전 동의를 검토할 시간이 부족한 경우) 프로토콜이 수정됩니다.

결과의 정의

1. 임신성 고혈압 장애에는 1) 임신 20주 이후에 발생하는 단백뇨 또는 자간전증 관련 말단 기관 기능 장애의 다른 징후/증상이 없는 고혈압으로 정의되는 임신성 고혈압, 2) 고혈압 및 단백뇨가 새로 발생하거나 새로 발생하는 것으로 정의되는 자간전증 고혈압 및 유의미한 말단 기관 기능 장애(단백뇨 유무와 관계없이), 일반적으로 이전에 정상 혈압이었던 환자에서 임신 20주 후에 발생합니다. 3) 만성 고혈압에 추가된 자간전증은 단백뇨의 새로운 발병인 악화되거나 저항성 고혈압으로 정의됩니다. /또는 만성 고혈압 환자의 임신 20주 이후에 의미 있는 새로운 말단 기관 기능 장애.
2. 임신성 당뇨병: 1) 3시간 100그램 경구 당부하 검사에서 임신성 당뇨병에 대한 Carpenter/Coustan 진단 기준 이상의 혈당 값이 2개 이상, 또는 2) 1시간 50그램 경구 당부하 검사에서 200mg/dL 이상 경구 포도당 내성 테스트.
3. 자연 조산: 임신 37주 0일 미만의 자연 분만.
4. 저체중아: 출생 시 체중이 2,500g 미만입니다.

분석: 혈장, 혈청, 소변 및 제대혈 샘플은 확립된 안정 동위원소 희석 LC-MS/MS 방법을 사용하여 Hazen 실험실에서 TMAO에 대해 분석됩니다.

데이터 분석 계획

데이터 및 검체 수집 정맥절개술과 중류 소변 ​​자가 수집은 미리 지정된 시점(10~14주, 24~28주 및 출산을 위한 입원 시점)에 수행됩니다. 태반 및 제대혈 샘플은 전달 후 임상의가 수집합니다. 혈액 및 소변 표본은 교통부를 통해 Hazmat 교육 및 인증을 받은 S. Graves에 의해 Lerner 연구소 실험실로 운반됩니다. 태반 샘플도 처리를 위해 적절한 프로토콜에 따라 메인 캠퍼스의 병리학과로 마찬가지로 운반됩니다. 식이 평가 데이터는 웹 기반 NIH 자동 자가 관리 24시간(ASA24) 식이 평가 도구 연구원의 비밀번호로 보호된 계정 내에서 수집됩니다. 환자의 임상적 특징, 결과, 지표 임신, 신생아 결과는 환자의 의료 기록에서 수집됩니다.

데이터 및 샘플 저장소 데이터 보안은 환자 데이터 수집 및 분석에 참여하는 팀 구성원에 대한 액세스를 제한하여 보장됩니다. 의료 기록 데이터는 CCF REDCap 데이터베이스를 통해 안전하게 저장됩니다. 식이 평가 데이터는 웹 기반 NIH 자동 자가 관리 24시간(ASA24) 식이 평가 도구 연구원의 비밀번호로 보호된 계정 내에 유사하게 저장됩니다. 안전 모니터링에는 검체 수집을 위한 안전하고 깨끗한 임상 환경 보장, 정맥 천자에 대한 적절한 안전 프로토콜 준수, 지정된 임상 구역에서의 소모품 적절한 폐기가 포함됩니다. 신원이 확인되지 않은 혈액 표본은 Lerner 연구소의 Stanley Hazen 연구소에 저장 및 분석됩니다. 식별되지 않은 태반은 메인 캠퍼스의 병리학 실험실에서 보관 및 처리됩니다.

통계 분석:

표본 크기 임신 중 TMAO에 관한 정보가 제한되어 있으므로 검정력 계산은 유의 수준 0.05, 80% 검정력 및 총 표본 크기 200명의 환자와 10명의 환자를 대상으로 두 표본 T-검정을 사용하여 그룹 간의 평균 TMAO 차이를 탐지하도록 추정되었습니다. % 중퇴율. 문헌에서 추정된 TMAO의 표준 편차는 0.61~10.15 마이크로몰/L 범위이며, 임신 그룹과 정상 그룹의 고혈압 장애 비율이 1:10이라고 가정할 때 감지 가능한 평균 TMAO 차이는 0.451~7.497 마이크로몰/L로 계산되었습니다. .

분석 계획:

임신 중 고혈압 장애가 있는 환자는 없는 환자와 비교됩니다. 대략적인 정규 분포 연속 측정값은 평균과 표준 편차를 사용하여 요약되고 2-샘플 t-검정을 사용하여 비교됩니다. 정규성 및 순서 측정에서 벗어난 연속 측정은 중앙값과 사분위수를 사용하여 요약되고 Wilcoxon 순위 합계 테스트를 사용하여 비교됩니다. 범주형 요인은 빈도와 백분율을 사용하여 요약되며 Pearson의 카이제곱 테스트 또는 Fisher의 정확 테스트를 사용하여 비교됩니다. 그룹의 기본 특성이 다른 경우 임상적으로 중요한 요소를 조정하는 선형 회귀가 수행됩니다. 최종 데이터의 분포에 따라 TMAO 수준과 기타 연속 변수 간의 Pearson 또는 Spearman 상관 관계가 계산됩니다. 범주형 요인의 각 수준에 대해 TMAO 수준은 평균 및 표준 편차 또는 중앙값 및 사분위수를 사용하여 요약되고 ANOVA 또는 Kruskal-Wallis 테스트를 사용하여 비교됩니다. 모든 분석은 SAS(버전 9.4, SAS 연구소(SAS Institute, Cary, NC) 및 p < 0.05는 통계적으로 유의한 것으로 간주됩니다.

실행할 수 있음

다학제적 조사팀의 경험과 산부인과 연구소, 심혈관 및 대사 과학부의 기존 연구 인프라를 통해 1년의 지원 기간 내에 이 제안의 타당성과 성공을 보장합니다. 모든 분석과 분석을 실행하기 위한 전문 지식이 확인되었습니다.

연구의 의미

HDP는 향후 CVD의 위험 요소입니다. HDP 및 미래의 CVD 발병에 기여하는 메커니즘을 규명할 수 있다면 임신 초기 또는 임신 초기에 사람들을 선별하고 결과를 개선하기 위해 개입할 수 있을 것입니다. 산모의 식단, 장내 미생물 구성 및 대사산물 생산이 임신 중 혈관 및 내피 기능에 어떻게 영향을 미칠 수 있는지에 대한 추가 이해는 새로운 것입니다. 이 연구의 결과는 우리가 산모 건강을 개념화하고 치료적 개입을 위한 새롭고 흥미로운 방법을 제공하는 방식에 변화를 가져올 수 있습니다.