만성 육아종성 질환에 대한 유전자 치료 - 장기 추시

이것은 X-연관 gp91phox 결핍 만성 육아종성 질환(CGD)과 상염색체 열성 p47phox 결핍 CGD를 모두 치료하기 위한 체외 유전자 요법 방법의 효능과 안전성을 결정하기 위한 I/II상 임상 시험입니다. CGD는 혈중 호중구와 단핵구가 과산화물 및 기타 항균성 산화제를 생성하지 못하는 유전성 면역 결핍증으로 환자는 재발성 생명을 위협하는 감염에 걸립니다. 이 임상시험의 첫 번째 단계에 등록된 5명의 환자 외에 5세 이상의 남녀 30명의 CGD 환자가 등록될 수 있습니다. 16세 미만의 환자는 등록 당시 활동성 감염 또는 최근 감염 재발이 있어야 합니다. 환자는 4주 이상의 간격으로 유전자 치료를 위해 최대 6주기의 줄기 세포 동원을 받을 수 있습니다. 처음 3주기까지 유전자 치료를 위한 줄기 세포 가동화 주기는 flt3-리간드(flt3L)를 50μg/kg/일의 조합과 과립구-대식세포 콜로니 자극 인자(GM)를 매일 8회 피하 주사하는 것으로 시작됩니다. -CSF) CD34+ 세포 동원을 위한 5 micro g/kg/일. 유전자 치료를 위한 CD34+ 세포 동원의 3주기 이상(최대 총 6주기)의 경우, 동원은 10 microg/kg의 과립구 콜로니 자극 인자(G-CSF)를 매일 6회 주사하는 것으로 시작됩니다. /낮. CD34+ 세포 동원을 위한 골수성장인자 투여 마지막 2~3일에 환자는 혈액 단핵구를 수확하기 위한 성분채집술 절차를 거쳐 동원과 줄기세포 수확의 사이클을 완료하게 됩니다. CD34+ 전구체는 Isolex(등록 상표) 300i 항-CD34 단일클론 항체/자기 비드 선택 시스템을 사용하여 성분 채집 수집에서 선택됩니다. 정제된 CD34+ 세포는 배양물에 직접 넣거나 표준 혈액 은행 절차(10% 디메틸설폭시드(DMSO)가 포함된 자가 혈청에서 동결)에 따라 냉동 보존할 수 있으며 생체 외 배양 및 형질도입을 위해 해동될 때까지 액체 질소 온도에서 냉동 보관할 수 있습니다. 정맥 주입된 유전자 수정 줄기 세포의 특정 유전자 요법 치료를 위해, 하나 이상의 가동 주기에서 수집, 정제 및 동결된 정제된 CD34+ 줄기 세포는 해동된 다음 바이러스로 형질 도입을 위해 배양에 배치될 때 풀링됩니다. 벡터. CD34+ 세포는 피브로넥틴 조각 CH-296으로 미리 코팅된 PL2417 가스 투과성 플라스틱 용기에서 배양됩니다. 성장 배지는 1% 인간 혈청 알부민, 100ng/ml flt3-리간드, 50ng/ml PIXY321 및 50ng/ml 줄기 세포 인자(SCF)가 보충된 무혈청 X-VIVO 10(등록 상표)입니다. 배양된 CD34+ 전구체는 MFGS-p47phox 또는 MFGS-gp91phox 레트로바이러스 벡터로 3일 또는 4일에 각각 형질도입됩니다. 레트로바이러스 벡터는 CRIP 패키징 요소(5' LTR-gag-pol-3'SV40polyA; 5'LTR-AMenv-3'SV40polyA)로 조작된 amphotropic 외피 라인에 패키징된 복제 결함입니다. MFGS-p47phox는 쥐의 psi-crip 라인에 포장되어 있고 MFGS-gp91phox는 인간 293-SPA 라인에 포장되어 있습니다. 임상 레트로바이러스 벡터 상층액은 동물성 단백질과 혈청이 없습니다. 내독소, 무균 및 복제 가능 레트로바이러스의 부재에 대한 안전성 테스트는 레트로바이러스 생산자 라인, 바이러스 입자 로트 및 형질도입된 세포에서 수행됩니다. 형질도입된 CD34+ 세포는 CGD 환자에게 주입됩니다. 따라서 최대 총 6주기의 줄기 세포 동원이 있게 되지만, 하나 이상의 동원 주기에서 나온 CD34+ 세포를 동결 보존한 다음 나중에 주입을 위한 단일 유전자 교정 줄기 세포 제품을 생산하기 위해 배양을 위해 모을 수 있기 때문에, 이 연구에 참여하는 환자에 대한 유전자 요법 치료는 6회 미만(아마도 1회) 미만일 수 있습니다. 혈액은 유전자 치료에 의해 기능적으로 수정된 호중구의 모양과 지속성에 대해 주기적으로 테스트됩니다. 이 연구의 효능 목표는 CGD 환자가 적어도 4주 동안 순환하는 호중구 1000개 중 1개 이상의 수준으로 자가 유전자 보정된 기능적으로 정상적인 NADPH 옥시다제 양성 호중구를 생성하도록 하는 것입니다. 이는 진행 중이거나 잠재적인 감염에 대한 숙주 방어력 증가의 형태로 임상적 이점을 제공할 수 있습니다. 독성의 증거가 있는지 환자의 임상 상태를 모니터링합니다. 이 연구에서 얻은 정보는 이 장애에 대한 영구적인 치료법이 될 CGD에 대한 유전자 요법 개발의 궁극적인 목표를 달성하는 데 중요한 정보를 제공할 것입니다.