폐쇄성 수면 무호흡증(OSA) 환자의 호기 응축물의 표지자

호기된 산화질소 측정 및 호기된 호기 응축물 및 말초 혈액 수집. 2~4회 실시합니다(입원시 아침수면검사 후 아침, CPAP 적정 직후, 3개월간 CPAP 사용 후). eNO가 먼저 측정될 때마다 EBC 수집이 이어집니다.

아침 검사의 경우 환자는 30분도 채 걸리지 않는 검사 후까지 아침 식사를 연기하도록 요청받을 것입니다.

OSA는 호흡 장애 지수가 5/hr 이상인 환자로 정의됩니다.

호기된 산화질소의 측정:

eNO는 1ppb에서 200ppm까지 NO에 민감하고 온라인 기록을 위해 설계된 1ppb의 해상도와 1ppb의 정확도로 Sievers 280i 화학발광 분석기(Sievers Instruments, Boulder, CO, USA)를 사용하여 측정됩니다. eNO 측정은 ATS 표준에 따라 수행됩니다. 간단히 말해서 피험자는 eNO 측정 사이에 2분간 휴식을 취하고 절차 중에 코 클립 없이 앉아 있어야 합니다. eNO는 50ml/초의 호기 유속, 10ml의 데드 스페이스 및 2초 안정기 지속 시간에서 온라인으로 측정됩니다. 3개의 NO 고원 값이 10% 수준에서 일치하거나 2개가 5% 수준에서 일치할 때까지 반복 호기를 수행합니다. 그러면 평균 NO 값이 기록됩니다.

내쉬는 호흡 응축수 수집:

EBC는 제조업체 지침에 따라 ECoscreen(Jaeger, Germany)을 사용하여 수집됩니다. 입을 헹군 후 모집된 피험자는 고유한 일방향 밸브를 통해 호흡의 증기, 에어로졸 및 수분이 튜브의 벽을 따라 응축되는 냉각된 수집 튜브로 연결된 마우스피스를 통해 부드럽게 호흡합니다. 그런 다음 단방향 밸브는 내부 벽에 달라붙은 물방울을 수집하고 튜브 상단 근처에 샘플을 고정하는 플런저로 사용됩니다. 이 장치는 본질적으로 EBC에서 타액 아밀라아제의 부재로 나타나는 타액 오염을 방지합니다. 평균적으로 이 장치는 성인의 경우 분당 300 microL의 EBC를 수집할 수 있습니다. 각 피험자는 5분 동안 수집 키트를 통해 호흡하도록 요청받게 되며, 이는 염증 마커 분석을 위해 1ml의 응축물을 생성하기에 충분히 길어야 합니다. EBC는 염증 표지자를 분석할 때까지 -70oC에서 즉시 보관됩니다.

호기 응축물에서 8개의 이소프로스탄, GRO 알파, MCP1, 에오탁신 및 MDC 수준 측정:

-70oC에 저장된 EBC는 8-isoprostane, GROalpha, MCP1, eotaxin 및 MDC 수준 농도에 대해 일괄적으로 분석됩니다. 우리는 인간 8 이소프로스탄, GRO 알파, MCP1, 에오탁신 및 MDC 수준에 대한 쥐 단일클론 항체로 코팅된 96-웰 폴리스티렌 마이크로플레이트를 사용할 것입니다. EBC에서 이들 마커의 수준은 제조업체가 제공한 지침에 따라 샌드위치 효소 면역분석(R&D Systems, Minneapolis, MN, USA)에 의해 이중으로 측정될 것입니다.