Marker im ausgeatmeten Atemkondensat bei Patienten mit obstruktiver Schlafapnoe (OSA).

Messung des ausgeatmeten Stickoxids und Sammlung des ausgeatmeten Atemkondensats und des peripheren Blutes. Dies wird 2 bis 4 Mal durchgeführt (bei der Aufnahme, am Morgen nach dem Schlafengehen, unmittelbar nach der CPAP-Titration, nach 3-monatiger CPAP-Anwendung). Jedes Mal wird zuerst eNO gemessen, gefolgt von der EBC-Erfassung.

Für die Tests am Morgen werden die Patienten gebeten, ihr Frühstück auf die Zeit nach dem Test zu verschieben, was weniger als eine halbe Stunde dauern wird.

OSA ist definiert als Patienten mit einem Atemstörungsindex von ≥5/h.

Messung des ausgeatmeten Stickoxids:

eNO wird mit einem Chemilumineszenzanalysator Sievers 280i (Sievers Instruments, Boulder, CO, USA) gemessen, der auf NO von 1 ppb bis 200 ppm empfindlich ist und eine Auflösung von 1 ppb und eine Genauigkeit von 1 ppb aufweist und für die Online-Aufzeichnung ausgelegt ist. Die eNO-Messung wird gemäß ATS-Standards durchgeführt. Kurz gesagt, die Probanden sollten während des Eingriffs ohne Nasenklammer sitzen bleiben und zwischen den eNO-Messungen eine zweiminütige Pause einlegen. Das eNO wird online bei einer exspiratorischen Flussrate von 50 ml/s, einem Totraum von 10 ml und einer Plateaudauer von 2 Sekunden gemessen. Wiederholte Ausatmungen werden durchgeführt, bis drei NO-Plateauwerte auf dem 10 %-Niveau übereinstimmen oder zwei auf dem 5 %-Niveau übereinstimmen. Anschließend wird der mittlere NO-Wert erfasst.

Sammlung des ausgeatmeten Atemkondensats:

EBC wird mit dem ECoscreen (Jaeger, Deutschland) gemäß den Anweisungen des Herstellers gesammelt. Nach dem Ausspülen des Mundes atmen die rekrutierten Probanden abwechselnd durch ein Mundstück, das über ein einzigartiges Einwegventil mit einem gekühlten Sammelröhrchen verbunden ist, wo Dämpfe, Aerosole und Feuchtigkeit im Atem an den Rohrwänden kondensieren. Das Einwegventil wird dann als Kolben verwendet, der an der Innenwand haftende Tröpfchen sammelt und die Probe nahe der Oberseite des Röhrchens hält. Das Gerät verhindert von Natur aus eine Kontamination des Speichels, wie das Fehlen von Speichelamylase bei EBC zeigt. Im Durchschnitt kann dieses Gerät bei einem Erwachsenen 300 Mikroliter EBC pro Minute sammeln. Jeder Proband wird gebeten, 5 Minuten lang durch das Sammelset zu atmen. Dies sollte ausreichend lang sein, um 1 ml Kondensat für die Analyse von Entzündungsmarkern zu ergeben. EBC wird sofort bis zur Analyse auf Entzündungsmarker bei -70 °C gelagert.

Messung der 8-Isoprostan-, GRO-alpha-, MCP1-, Eotaxin- und MDC-Spiegel im ausgeatmeten Atemkondensat:

Bei -70 °C gelagertes EBC wird in Chargen auf die Konzentrationen von 8-Isoprostan, GROalpha, MCP1, Eotaxin und MDC analysiert. Wir werden Polystyrol-Mikrotiterplatten mit 96 Vertiefungen verwenden, die mit murinen monoklonalen Antikörpern gegen menschliche 8-Isoprostan-, GRO-alpha-, MCP1-, Eotaxin- und MDC-Spiegel beschichtet sind. Die Konzentrationen dieser Marker in EBC werden in Duplikaten mittels Sandwich-Enzym-Immunoassay (R & D Systems, Minneapolis, MN, USA) gemäß den Anweisungen des Herstellers gemessen.