Markery w kondensacie wydychanego powietrza u pacjentów z obturacyjnym bezdechem sennym (OSA).

Pomiar tlenku azotu w wydychanym powietrzu i zbieranie kondensatu w wydychanym powietrzu oraz krwi obwodowej. Zostanie to zrobione 2 do 4 razy (przy przyjęciu, rano po badaniu snu, bezpośrednio po dostosowaniu dawki CPAP, po stosowaniu CPAP przez 3 miesiące). Za każdym razem jako pierwszy zostanie zmierzony eNO, a następnie EBC.

W przypadku badań rano pacjent będzie proszony o przełożenie śniadania na czas po teście, który potrwa mniej niż pół godziny.

OBS definiuje się jako pacjentów ze wskaźnikiem zaburzeń oddychania ≥5/godz.

Pomiar wydychanego tlenku azotu:

eNO będzie mierzone przy użyciu analizatora chemiluminescencyjnego Sievers 280i (Sievers Instruments, Boulder, CO, USA) czułego na NO od 1 ppb do 200 ppm oraz z rozdzielczością 1 ppb i dokładnością 1 ppb przeznaczonego do rejestracji online. Pomiar eNO zostanie wykonany zgodnie z normami ATS. Krótko mówiąc, badani powinni pozostać w pozycji siedzącej bez klipsa na nos podczas procedury, z 2-minutową przerwą między pomiarami eNO. eNO będzie mierzone online przy wydechowym natężeniu przepływu 50 ml/s, martwej przestrzeni 10 ml i 2-sekundowym okresie plateau. Powtarzane wydechy są wykonywane, aż trzy wartości plateau NO zgodzą się na poziomie 10% lub dwa zgodzą się na poziomie 5%. Następnie zostanie zarejestrowana średnia wartość NO.

Pobieranie kondensatu wydychanego powietrza:

EBC zostanie pobrane przy użyciu ECoscreen (Jaeger, Niemcy) zgodnie z instrukcjami producenta. Po wypłukaniu ust zrekrutowani badani będą oddychać pływowo przez ustnik, który jest podłączony przez unikalny zawór jednokierunkowy do schłodzonej rurki zbiorczej, w której opary, aerozole i wilgoć w oddechu skraplają się wzdłuż ścianek rurki. Zawór jednokierunkowy jest następnie używany jako tłok, który zbiera kropelki przyklejone do wewnętrznej ścianki i utrzymuje próbkę w pobliżu górnej części probówki. Urządzenie z natury zapobiega zanieczyszczeniu śliny, na co wskazuje brak amylazy ślinowej w EBC. Średnio to urządzenie będzie w stanie zebrać 300 mikrolitrów EBC na minutę dla osoby dorosłej. Każdy pacjent zostanie poproszony o oddychanie przez zestaw do pobierania przez 5 minut, co powinno wystarczyć na uzyskanie 1 ml kondensatu do analizy markera stanu zapalnego. EBC będzie natychmiast przechowywane w temperaturze -70oC do czasu analizy na obecność markerów stanu zapalnego.

Pomiar poziomu 8 izoprostanu, GRO alfa, MCP1, eotaksyny i MDC w kondensacie wydychanego powietrza:

EBC przechowywane w temperaturze -70oC będą analizowane partiami pod kątem stężeń 8-izoprostanu, GROalpha, MCP1, eotaksyny i MDC. Użyjemy 96-studzienkowych mikropłytek polistyrenowych opłaszczonych mysimi przeciwciałami monoklonalnymi przeciwko ludzkim izoprostanom 8, GRO alfa, MCP1, eotaksynie i MDC. Poziomy tych markerów w EBC będą mierzone w dwóch powtórzeniach za pomocą enzymatycznego testu immunologicznego (R & D Systems, Minneapolis, MN, USA) zgodnie z instrukcjami dostarczonymi przez producenta.