젊은 여성의 크랜베리 ​​주스 섭취 후 대사체학 및 미생물 변화를 확인하기 위해

크랜베리 주스의 섭취는 요로 감염 예방과 관련이 있습니다. 그러나 크랜베리 ​​제품의 쓴맛과 떫은맛으로 인해 크랜베리 ​​관련 임상시험 참여자의 순응도가 낮아 크랜베리 ​​주스의 기능에 대한 추가 연구가 어려운 실정이다. 따라서 참가자 준수 여부를 확인하기 위한 효과적인 접근 방식이 절실히 필요합니다. 이전 연구에서는 크랜베리 ​​주스 섭취 후 젊은 여성의 혈장 및 요로 대사체가 글로벌 UHPLC(초고성능 액체 크로마토그래피)-Q-Orbitrap-HRMS(고해상도 질량 분석법) 접근법을 사용하여 조사되었습니다. PLS-DA(부분 최소 제곱 판별 분석) 분석은 젊은 여성의 혈장 및 요로 대사체가 기준선 및 사과 주스 섭취와 비교하여 크랜베리 ​​섭취 후 변경된 것으로 나타났습니다. 크랜베리 주스 섭취는 외인성 및 내인성 대사 산물의 배설을 더 많이 유발했습니다. 이러한 대사산물은 크랜베리 ​​주스 소비에 대한 후보 바이오마커로 확인되었습니다. 확립된 PLS-DA(부분 최소 제곱 판별 분석)/OPLS-DA(직교 부분 최소 제곱 판별 분석) 모델은 크랜베리 ​​주스 소비자를 식별할 수 있는 기회를 제공합니다.

크랜베리 주스 섭취가 인간의 장내 미생물 프로필에 영향을 미치는지는 알려지지 않았습니다. 그러나 여러 연구에서 폴리페놀이 풍부한 식단이 장내 미생물 프로필을 개선한다고 제안했습니다. 인간 장내 미생물에 대한 이전의 시험관 내 연구는 A형 크랜베리 ​​프로시아니딘의 미생물 이화작용이 B형 프로시아니딘의 것과 비교하여 다른 프로필과 구조를 가진 대사산물을 생성한다는 것을 보여주었습니다.

인간 장내 미생물군 변화를 이해하면 연구자들은 소변과 혈액의 대사체 변화를 연관시키고 설명할 수 있으며 크랜베리의 건강상의 이점도 설명할 수 있습니다.

이 연구에서 모든 샘플을 수집하여 단기 크랜베리 ​​주스 처리(3일)와 장기 처리(21일) 간의 대사체학 변화를 비교할 수 있습니다. 크랜베리 주스의 요로 보호 효과는 만성 섭취와 관련이 있는 경우가 많기 때문에 장기 연구를 통해 더 많은 대사 변화가 규명될 것으로 예상됩니다.

연구 계획:

특정 목표 1: 정상 BMI(체질량 지수)(18.5-25) 및 최소 110파운드의 체중을 가진 18-29세의 건강한 여대생 20명을 UF(University of Florida) 캠퍼스에서 모집합니다.

광고는 전단지 형태로 진행됩니다. 조사자의 연락처 정보는 전단지에 포함됩니다. 설문지는 사전 선별 대상에 대한 정보를 얻는 데 사용됩니다. 모든 참가자는 연구의 자연적 및 잠재적 위험에 관한 서면 및 구두 정보를 받게 됩니다.

참여자는 크랜베리, 블루베리, 딸기 자두, 산딸기, 사과, 포도, 포도씨 추출물, 피크노제놀, 적포도주, 차, 초콜릿 및 기타 코코아 제품 또는 기타 크랜베리 ​​기반 보조제를 포함하여 프로안토시아니딘이 풍부한 식품을 10일부터 피하도록 조언받을 것입니다. -일(1일-9일) 연구 종료 기간에 실행합니다. 참가자는 대체를 위해 오렌지, 수박, 꿀 이슬, 멜론을 섭취하도록 제안됩니다. 소변 및 대변 샘플 수집 키트는 모든 참가자에게 배포되며 참가자는 수집 키트 사용에 대한 교육을 받습니다. 참가자는 7일에서 9일 사이에 배설물 샘플 1개를 수집합니다. 10일째 아침에 밤새 단식 소변 샘플을 자가 수집하고 피험자는 혈액 샘플을 채취합니다(튜브 2개, 총 30mL). 금식 혈액 샘플 수집 후 참가자에게 아침 식사가 제공됩니다. 훈련되고 인증된 채혈사가 채혈을 위해 고용될 것입니다. 채혈 후 피험자 1인당 크랜베리 ​​또는 위약주스 1병(250mL)을 섭취하고, 크랜베리 ​​또는 위약주스 5병을 피험자당 10일째 저녁과 10일 아침, 저녁에 섭취하도록 한다. 11일과 12일. 12일에서 4일 사이에 대변 샘플 1개도 수집됩니다. 모든 피험자는 13일 아침 자가 수집한 밤새 빠른 소변 샘플과 함께 임상 단위로 돌아가고 혈액 샘플은 참가자가 크랜베리 ​​또는 위약 주스 1병을 섭취한 후 30-60분 후에 수집됩니다. 크랜베리 또는 위약 주스는 13일 저녁과 14-29일 동안 아침과 저녁에 섭취하도록 각 피험자에게 배포됩니다. 예약은 매주 또는 참가자의 요청에 따라 14일에서 29일 사이에 예약됩니다. 29일에서 31일 사이에 대변 샘플 1개를 채취합니다. 30일째 아침에 밤새 금식 소변 샘플을 자가 수집하고 피험자는 크랜베리 ​​주스 또는 위약을 섭취한 후 혈액 샘플을 채취합니다. 14일 휴약 기간 후 참가자는 대체 요법으로 전환하고 프로토콜을 반복합니다. 수집된 모든 샘플은 분주되어 -80°C에 보관됩니다. 일어날 가능성은 낮지만, 어떤 피험자가 주스 섭취 후 심각한 부작용이 있는 경우 참가자는 안전 문제에 대한 상황에 따라 연구에서 제외됩니다.

13일, 48일(크랜베리 주스/위약 섭취 후 3일 후)에 수집된 소변 및 혈장 샘플 준비는 확립된 프로토콜을 따릅니다. LC-HRMS(액체 크로마토그래피 - 고분해능 질량 분석법) 데이터는 정규화되어 SIMCA(버전 13.0.3, Umetrics, Umea, Sweden)는 이전에 확립된 PLS-DA(부분 최소 제곱 판별 분석)/OPLS-DA(직교 부분 최소 제곱 판별 분석) 모델을 사용하여 크랜베리 ​​주스 소비자를 맹목적으로 식별합니다. 확인을 위해 결과가 Ocean Spray로 전송됩니다.

구체적인 목표 2:

기본 대변 샘플과 30일, 65일 즈음(크랜베리 주스/위약 섭취 후 21일 후)에 수집된 대변 샘플은 미생물군집 구성에 대해 분석됩니다. 게놈 미생물 DNA는 MoBlo Power 토양 DNA 분리 키트를 사용하여 대변 샘플에서 추출됩니다. 장내 미생물 변화는 중복 및 판별 분석을 사용하여 소변의 대사체 변화와 상관관계가 있습니다. 대변 ​​샘플의 대변 점액 및 IgA(면역글로불린 A, 장 장벽 지표), 단쇄 지방산 및 암모니아는 특정 분석 키트 또는 HPLC(고성능 액체 크로마토그래피) 방법을 사용하여 분석됩니다.

구체적인 목표 3:

30일, 65일(크랜베리 주스/위약 섭취 후 21일 후)에 수집된 소변 및 혈장 샘플 준비는 확립된 프로토콜을 따릅니다. UHPLC(Ultra high-performance liquid chromatography) -Q-Orbitrap-HRMS(High-resolution mass spectrometry) 분석, 다변량 데이터 처리 및 통계 분석은 특정 목표 2에서 논의된 실험 프로세스와 동일합니다.