혈소판이 풍부한 혈장을 이용한 무릎 골관절염 치료

• 이 연구의 목표는 무릎의 경증에서 중등도 골관절염의 보존적 치료에서 히알루론산과 혈소판 풍부 혈장(PRP) 침윤의 임상 결과를 비교하는 것입니다. 게다가, 우리는 경증에서 중등도의 무릎 OA 치료에 사용하기 위해 PRP를 획득하고 준비하기 위한 두 가지 프로토콜을 표준화하고자 합니다.
• 샘플은 골관절염 모니터링 및 치료 프로그램의 외래 진료소에서 치료를 받고 있는 무릎 골관절염 환자 90명으로 구성됩니다.
• 환자는 3개의 실험 그룹에서 적용 전에 불투명 봉투를 간단히 그려서 블록으로 무작위 배정되고 아래에 설명된 대로 식별됩니다.

GROUP PRP 프로토콜 A: 연속 3주 동안 일주일에 한 번 혈소판 풍부 혈장(PRP A) 관절 내 주사를 받을 30명의 환자로 구성됩니다. GROUP PRP 프로토콜 B: 연속 3주 동안 매주 1회 혈소판 풍부 혈장(PRP B) 관절 내 주사를 받을 30명의 환자로 구성됩니다. GROUP Hyaluronic acid: 관절내 히알루론산(AHI) 2mL를 주 1회 연속 3주 동안 관절내 주사하는 30명의 환자로 구성됩니다.

• PRP A는 이전에 다른 곳에서 발표된 다음 기술에 따라 준비됩니다.

  1. 10% 구연산 나트륨이 포함된 5mL의 멸균 진공 수집 튜브에서 전주정맥으로부터 50mL의 말초 혈액 수집; 수집된 전혈의 분취량은 미생물학적 오염을 평가하는 데 사용됩니다.
  2. 전혈을 실온에서 1200rpm으로 10분 동안 원심분리하여 물질을 반경 6.5cm 원심분리기에서 두 개의 다른 층(하층의 적혈구 및 상층의 혈장)으로 분리합니다.
  3. 혈장을 분리하고 1200rpm에서 5분 동안 원심분리하여 2개의 새로운 층을 생성합니다(위쪽은 제거될 층, 아래쪽은 혈소판 포함). 주사기와 바늘을 사용하여 닫힌 튜브에서 혈장을 조심스럽게 흡인하고 새 수집 튜브로 옮기고 캡을 통해 조심스럽게 주입해야 합니다.
  4. 무릎에 침투할 재료를 준비합니다. 준비 후, 5mL의 PRP를 얻을 것으로 추정되며, 부피의 절반은 주입에 사용되고 나머지 절반은 조성 분석 및 미생물 분석에 사용됩니다.

• PRP B의 준비는 이전에 다른 곳에서 발표된 다음 기술에 따라 수행됩니다.

  a) 10% 구연산 나트륨이 포함된 5mL의 멸균 진공 수집 튜브에서 전주정맥으로부터 50mL의 말초 혈액을 수집합니다. b) 반경 6.5cm 원심분리기에서 전혈을 실온에서 1500rpm으로 15분 동안 원심분리하여 물질을 두 개의 서로 다른 층(하층의 적혈구 및 상층의 혈장)으로 분리합니다. e) 혈장을 분리하고 3500rpm에서 7분 동안 원심분리하여 2개의 새로운 층을 생성합니다(위쪽은 제거될 층, 아래쪽은 혈소판 포함). 주사기와 바늘을 사용하여 닫힌 튜브에서 혈장을 조심스럽게 흡인하고 새 수집 튜브로 옮기고 캡을 통해 조심스럽게 주입해야 합니다. f) 무릎에 침투할 재료를 준비합니다. 준비 후, 5mL의 PRP를 얻을 것으로 추정되며, 부피의 절반은 주입에 사용되고 나머지 절반은 조성 분석에 사용됩니다.

• 모든 침투는 무균 기술을 사용하여 외래 환자 시술실에서 수행됩니다. 적용 기술은 다음 단계를 따릅니다.

  1. 편안한 자세로 들것에 앉아 무릎을 구부리고 눈가리개를 한 환자(수행된 치료에 대해 블라인드);
  2. 살균 클로르헥시딘에 적신 거즈로 도포할 부위를 청소합니다.
  3. 1분 동안 클로르헥시딘이 작용하도록 한 다음 70% 알코올에 적신 거즈로 제거합니다.
  4. 무릎에 대한 전외측 접근법을 통한 유도되지 않은 침윤을 위한 무릎 촉진;
  5. 혈관 수축 없이 2% 리도카인 1mL로 침투 부위의 피부와 피하 조직에 마취 버튼을 수행합니다.
  6. 선택한 경로를 통해 사용된 제품의 주사기에 부착된 바늘을 삽입하고,
  7. 무작위화(AHI/PRP A/PRP B)에 따라 치료를 주사하고;
  8. 관절에서 바늘과 빈 주사기를 제거하십시오.
  9. 무릎 굴곡-신전 주기를 30회 수행하여 제품을 관절 전체에 분배합니다.

  10. 간단한 드레싱으로 절차를 마무리하십시오.

      • 환자는 시술 48시간 전에 지방이 많은 음식이나 알코올성 음료를 섭취해서는 안 됩니다.
      • 관절 삼출액이 있으면 침윤 전에 흡인해야 합니다.
      • 무릎 통증, 부기 또는 발적의 악화가 있는 경우 환자에게 병원으로 돌아가도록 조언해야 합니다.
      • NSAID는 신청 다음 주에 사용해서는 안 됩니다.

• 임상 평가는 다음 단계로 구성됩니다.

  1. WOMAC 설문지, KSS(Knee Society Score) 및 통증, 기능 및 만족도 분석을 위한 시각적 아날로그 척도(침투 전, 3차 침윤 당일, 침윤 후 3개월, 6개월 및 1년)에 기초한 주관적 기능 평가. 무릎 중심 추적 프로토콜);

  2. (1) 인구통계학적 데이터 등록(연령, 성별, 체중, 키, 골관절염의 중증도), (2) 운동 범위 측정, (3) 하지 축 평가(침윤 전, 세 번째 침윤일, 침윤 후 3개월, 6개월 및 1년, 무릎 관절 추적 프로토콜에 따름); 하중이 있는 무릎의 파노라마, 전후방 및 프로필 방사선 사진으로 방사선 평가를 통해 축 및 관절 공간의 변화를 감지합니다(침윤 전, 침윤 후 6개월 및 1년, 무릎 센터 추적 프로토콜에 따라).

     선택한 치료를 적용한 사람과 독립적인 관찰자가 환자를 평가합니다.

• PRP 구성에 대한 연구는 이전에 다른 곳에서 발표된 기술에 따라 Cellular Technology Center에서 수행됩니다.

그룹 A와 B의 말초 혈액 샘플은 PRP를 얻기 위해 처리되며, 이 제품의 일부는 애플리케이션에 사용되고 일부는 생성된 제품의 구성을 분석하는 데 사용됩니다.

준비 직후, 제품의 일부는 총 세포 수, 백혈구 및 혈소판, 평균 혈소판 부피와 같은 혈액학적 구성에 대해 평가됩니다. PRP의 나머지 부분은 약 200ul의 분취량으로 Cellular Technology Center에 보관되며, 여기에서 단백질체 분석(아래 명시) 및 인자 및 사이토카인의 정량화까지 -80°C의 냉동고에서 냉동 상태로 유지됩니다. , 효소 연결 면역흡수 검사 및 Luminex 키트를 통해: 인터루킨-1β, 인터루킨-6, 인터루킨-8, 종양 괴사 인자-α, 인터페론-γ, 인터루킨-2, 인터루킨-2R, 인터루킨-7, 인터루킨-15, 인터루킨- 17, 인터류킨-12p40(전염증성 사이토카인); 인터루킨-1RA, 인터루킨-4, 인터루킨-5, 인터루킨-10, 인터루킨-13, 인터페론-α(항염증 사이토카인); 에오탁신, 인터페론-감마 유도성 단백질 10kDa, 막 보조인자 단백질-1, 인터페론-γ-유도된 모노카인, 대식세포 염증 단백질-1α, 대식세포 염증 단백질-1β(케모카인); 내피세포성장인자, 베타섬유아세포성장인자, G-콜로니자극인자, 혈관내피세포성장인자, 형질전환성장인자-β1, 형질전환성장인자-β2, 형질전환성장인자-β3, 혈소판유래성장인자-AB, 혈소판유래성장인자 -BB, 인슐린 성장 인자-1(성장 인자).