Léčba osteoartrózy kolena s plazmou bohatou na krevní destičky

• Cílem studie je porovnat klinické výsledky infiltrace kyselinou hyaluronovou a plazmou bohatou na krevní destičky (PRP) v konzervativní léčbě mírné až středně těžké osteoartrózy kolene. Kromě toho chceme standardizovat dva protokoly pro získání a přípravu PRP pro použití při léčbě mírné až středně těžké OA kolena.
• Vzorek bude tvořit 90 pacientů s osteoartrózou kolene léčených na ambulanci Programu sledování a léčby osteoartrózy.
• Pacienti budou před aplikací randomizováni do bloků jednoduchým nakreslením neprůhledných obálek do 3 experimentálních skupin a identifikováni, jak je popsáno níže:

SKUPINA PRP Protokol A: Skládá se z 30 pacientů, kteří budou dostávat intraartikulární injekci plazmy bohaté na krevní destičky (PRP A) jednou týdně po dobu tří po sobě jdoucích týdnů; SKUPINA PRP Protokol B: Skládá se z 30 pacientů, kteří budou dostávat intraartikulární injekci plazmy bohaté na krevní destičky (PRP B) jednou týdně po dobu tří po sobě jdoucích týdnů; SKUPINA Kyselina hyaluronová: Skládá se z 30 pacientů, kteří dostanou intraartikulární injekci 2 ml intraartikulární kyseliny hyaluronové (AHI) jednou týdně po dobu tří po sobě jdoucích týdnů.

• PRP A bude připraven podle následující techniky publikované dříve jinde:

  1. Odběr 50 ml periferní krve z antekubitální žíly do sterilních vakuových odběrových zkumavek o objemu 5 ml s 10% citrátem sodným; Alikvotní část odebrané plné krve bude použita k hodnocení mikrobiologické kontaminace;
  2. Centrifugujte plnou krev po dobu 10 minut při 1200 ot./min, při pokojové teplotě, přičemž materiál se rozdělil na dvě různé vrstvy (erytrocyty ve spodní vrstvě a plazma v horní vrstvě) v centrifuze o poloměru 6,5 cm;
  3. Plazmu oddělte a centrifugujte po dobu 5 minut při 1200 ot./min., čímž se vytvoří dvě nové vrstvy (horní, která bude odstraněna, spodní, obsahující krevní destičky); Je třeba dbát na pečlivé odsátí plazmy z uzavřené zkumavky pomocí injekční stříkačky a jehly a její přenesení do nové sběrné zkumavky, přičemž ji opatrně vstříkneme přes uzávěr;
  4. Připravte materiál pro infiltraci v koleni; po přípravě se odhaduje, že se získá 5 ml PRP, přičemž polovina objemu se použije pro injekci a druhá polovina pro analýzu složení a mikrobiologickou analýzu.

• Příprava PRP B bude provedena podle následující techniky publikované dříve jinde::

  a) Odběr 50 ml periferní krve z antekubitální žíly do sterilních vakuových odběrových zkumavek o objemu 5 ml s 10% citrátem sodným; b) Odstřeďujte plnou krev po dobu 15 minut při 1500 otáčkách za minutu při pokojové teplotě, přičemž se materiál rozdělil na dvě různé vrstvy (červené krvinky ve spodní vrstvě a plazma v horní vrstvě) v centrifuze o poloměru 6,5 cm; e) Separujte a centrifugujte plazmu po dobu 7 minut při 3500 otáčkách za minutu, čímž se vytvoří dvě nové vrstvy (horní, která bude odstraněna, spodní, obsahující krevní destičky); Je třeba dbát na pečlivé odsátí plazmy z uzavřené zkumavky pomocí injekční stříkačky a jehly a její přenesení do nové sběrné zkumavky, přičemž ji opatrně vstříkneme přes uzávěr; f) Připravte materiál pro infiltraci v koleni; po přípravě se odhaduje, že se získá 5 ml PRP, přičemž polovina objemu se použije pro injekci a druhá polovina pro analýzu kompozice.

• Všechny infiltrace budou prováděny na ambulantním sále aseptickou technikou. Technika aplikace se bude řídit následujícími kroky:

  1. Pacient sedí na nosítkách v pohodlné poloze, s pokrčenými koleny a se zavázanýma očima (zaslepení, pokud jde o provedenou léčbu);
  2. Očistěte místo, kde bude aplikace provedena, gázou navlhčenou degerming Clohexidinem;
  3. Nechte chlorhexidin působit jednu minutu a poté jej odstraňte gázou navlhčenou 70% alkoholem;
  4. Palpace kolene pro neřízenou infiltraci přes anterolaterální přístup ke koleni;
  5. Proveďte anestetické tlačítko na kůži a podkoží v místě infiltrace pomocí 1 ml 2% lidokainu bez vazokonstriktoru;
  6. Zaveďte jehlu připojenou k injekční stříkačce použitého produktu zvolenou cestou;
  7. Aplikujte léčbu podle randomizace (AHI/PRP A/PRP B);
  8. Odstraňte jehlu a prázdnou stříkačku z kloubu;
  9. Proveďte 30 cyklů flexe-extenze kolena, aby se produkt distribuoval po kloubu;

  10. Dokončete proceduru jednoduchým převazem.

      • 48 hodin před výkonem by pacient neměl konzumovat tučná jídla ani alkoholické nápoje;
      • Pokud je přítomen kloubní výpotek, musí být před infiltrací odsát;
      • Pacientovi je třeba doporučit, aby se v případě zhoršené bolesti, otoku nebo zarudnutí kolene vrátil do nemocnice;
      • NSAID by se neměly používat v týdnu po aplikaci.

• Klinické hodnocení se bude skládat z následujících kroků:

  1. Subjektivní funkční hodnocení na základě dotazníků WOMAC, Knee Society Score (KSS) a vizuální analogové škály pro analýzu bolesti, funkce a spokojenosti (před infiltrací, v den třetí infiltrace, tři měsíce, šest měsíců a jeden rok po infiltraci; podle protokol kontroly kolenního centra);

  2. Klinické hodnocení, sestávající z (1) registrace demografických údajů (věk, pohlaví, váha, výška, závažnost artrózy), (2) měření rozsahu pohybu, (3) posouzení osy dolních končetin (před infiltrací, na den třetí infiltrace, tři měsíce, šest měsíců a jeden rok po infiltraci, podle kontrolního protokolu kolenního centra); Rentgenologické hodnocení s panoramatickým, předozadním a profilovým rentgenovým snímkem kolen se zátěží s cílem odhalit alterace osy a kloubního prostoru (před infiltrací, 6 měsíců a 1 rok po infiltraci, podle protokolu sledování kolenního centra).

     Pacienti budou hodnoceni pozorovatelem nezávislým na tom, kdo aplikoval vybranou léčbu.

• Studie složení PRP bude provedena v Centru pro buněčné technologie podle techniky publikované dříve jinde:

Vzorky periferní krve ze skupin A a B budou zpracovány za účelem získání PRP, přičemž část tohoto produktu se použije v aplikaci a část se použije k analýze složení vytvořeného produktu.

Brzy po přípravě bude část přípravku hodnocena na hematologické složení: celkový počet buněk, leukocyty a krevní destičky a střední objem destiček. Zbytek PRP bude uložen v alikvotech po asi 200 ul v Centru buněčné technologie, kde zůstane zmrazený v mrazáku při -80 °C až do proteomické analýzy (specifikováno níže) a kvantifikace faktorů a cytokinů. prostřednictvím enzymového imunoabsorpčního testu a sad Luminex: interleukin-1β, interleukin-6, interleukin-8, tumor nekrotizující faktor-α, interferon-γ, interleukin-2, interleukin-2R, interleukin-7, interleukin-15, interleukin- 17, interleukin-12p40 (prozánětlivé cytokiny); interleukin-1RA, interleukin-4, interleukin-5, interleukin-10, interleukin-13, interferon-a (protizánětlivé cytokiny); eotaxin, interferonem-gama indukovatelný protein 10 kDa, membránový kofaktorový protein-1, interferonem-y-indukovaný monokin, makrofágový zánětlivý protein-la, makrofágový zánětlivý protein-lp (chemokiny); růstový faktor endotelu, růstový faktor b-fibroblastů, faktor stimulující G-kolonie, růstový faktor vaskulárního endotelu, transformující růstový faktor-β1, transformující růstový faktor-β2, transformující růstový faktor-β3, destičkový růstový faktor-AB, destičkový růstový faktor -BB, inzulinový růstový faktor-1 (růstové faktory).