Knæ slidgigt behandling med blodpladerigt plasma

• Målet med undersøgelsen er at sammenligne de kliniske resultater af infiltration med hyaluronsyre og blodpladerigt plasma (PRP) i den konservative behandling af let til moderat slidgigt i knæet. Desuden ønsker vi at standardisere to protokoller til opnåelse og forberedelse af PRP til brug i behandlingen af ​​mild til moderat OA i knæet.
• Stikprøven vil bestå af 90 patienter med slidgigt i knæet, der behandles på ambulatoriet under Slidgigt Monitorerings- og Behandlingsprogrammet.
• Patienter vil blive randomiseret i blokke ved simpel tegning af uigennemsigtige konvolutter før påføring, i 3 eksperimentelle grupper og identificeret som beskrevet nedenfor:

GRUPPE PRP-protokol A: Sammensat af 30 patienter, som vil modtage en intraartikulær injektion af blodpladerigt plasma (PRP A) en gang om ugen i tre på hinanden følgende uger; GRUPPE PRP-protokol B: Sammensat af 30 patienter, som vil modtage en intraartikulær injektion af blodpladerigt plasma (PRP B) en gang om ugen i tre på hinanden følgende uger; GRUPPE Hyaluronsyre: Sammensat af 30 patienter, som vil modtage en intraartikulær injektion af 2 ml intraartikulær hyaluronsyre (AHI), en gang om ugen, i tre på hinanden følgende uger.

• PRP A vil blive fremstillet i henhold til følgende teknik offentliggjort tidligere andetsteds:

  1. Opsamling af 50 mL perifert blod fra den antecubitale vene, i sterile vakuumopsamlingsrør på 5 mL med 10% natriumcitrat; En alikvot af opsamlet fuldblod vil blive brugt til at evaluere mikrobiologisk kontaminering;
  2. Centrifuger fuldblodet i 10 minutter ved 1200 rpm, ved stuetemperatur, og adskil materialet i to forskellige lag (erythrocytter i det nederste lag og plasma i det øverste lag) i en 6,5 cm radius centrifuge;
  3. Adskil og centrifuger plasmaet i 5 minutter ved 1200 rpm, hvilket skaber to nye lag (øverste, som vil blive fjernet, nederste, der indeholder blodpladerne); Man skal sørge for omhyggeligt at aspirere plasmaet fra det lukkede rør ved hjælp af en sprøjte og kanyle og overføre det til et nyt opsamlingsrør, forsigtigt injicere det gennem hætten;
  4. Forbered materialet til infiltration i knæet; efter tilberedning vurderes det, at der vil blive opnået 5 mL PRP, hvor halvdelen af ​​volumenet bruges til injektion og den anden halvdel til sammensætningsanalyse og mikrobiologisk analyse.

• forberedelsen af ​​PRP B vil blive udført i henhold til følgende teknik offentliggjort tidligere andetsteds::

  a) Opsamling af 50 mL perifert blod fra den antecubitale vene i sterile vakuumopsamlingsrør på 5 mL med 10% natriumcitrat; b) Centrifuger fuldblodet i 15 minutter ved 1500 rpm, ved stuetemperatur, adskille materialet i to forskellige lag (røde blodlegemer i det nederste lag og plasma i det øverste lag) i en 6,5 cm radius centrifuge; e) Adskil og centrifuger plasmaet i 7 minutter ved 3500 rpm, hvilket skaber to nye lag (øverste, som vil blive fjernet, nederste, der indeholder blodpladerne); Man skal sørge for omhyggeligt at aspirere plasmaet fra det lukkede rør ved hjælp af en sprøjte og kanyle og overføre det til et nyt opsamlingsrør, forsigtigt injicere det gennem hætten; f) Forbered materialet til infiltration i knæet; efter tilberedning anslås det, at der vil blive opnået 5 ml PRP, hvor halvdelen af ​​volumenet bruges til injektion og den anden halvdel til analyse af sammensætningen.

• Alle infiltrationer vil blive udført i det ambulante procedurerum ved brug af aseptisk teknik. Teknikken til påføring vil følge nedenstående trin:

  1. Patient, der sidder på båren i en behagelig stilling, med bøjede knæ og bind for øjnene (blænder med hensyn til den udførte behandling);
  2. Rengør området, hvor påføringen skal udføres, med gaze fugtet med afspirende Clorhexidin;
  3. Lad klorhexidinet virke i et minut og fjern det derefter med gaze fugtet med 70 % alkohol;
  4. Palpation af knæet til ustyret infiltration gennem den anterolaterale tilgang til knæet;
  5. Udfør bedøvelsesknap på huden og subkutant væv på infiltrationsstedet med 1 ml 2% lidokain uden vasokonstriktor;
  6. Indsæt nålen fastgjort til sprøjten på det anvendte produkt gennem den valgte vej;
  7. Injicer behandlingen i henhold til randomisering (AHI/PRP A/PRP B);
  8. Fjern nålen og den tomme sprøjte fra leddet;
  9. Udfør 30 knæfleksion-ekstensionscyklusser for at fordele produktet over leddet;

  10. Afslut proceduren med en simpel dressing.

      • Patienten bør ikke indtage fed mad eller alkoholholdige drikkevarer 48 timer før proceduren;
      • Hvis led effusion er til stede, skal det aspireres før infiltration;
      • Patienten bør rådes til at vende tilbage til hospitalet i tilfælde af forværrede smerter, hævelse eller rødme i knæet;
      • NSAID'er bør ikke anvendes i ugen efter påføring.

• Den kliniske evaluering vil bestå af følgende trin:

  1. Subjektiv funktionsvurdering baseret på WOMAC-spørgeskemaer, Knee Society Score (KSS) og visuel analog skala for smerte-, funktions- og tilfredshedsanalyse (før infiltration, på dagen for den tredje infiltration, tre måneder, seks måneder og et år efter infiltration; iht. til knæcentrets opfølgningsprotokol);

  2. Klinisk vurdering, bestående af (1) registrering af demografiske data (alder, køn, vægt, højde, sværhedsgrad af slidgigt), (2) måling af bevægelighed, (3) vurdering af underekstremiteternes akse (før infiltration, på dagen for den tredje infiltration, tre måneder, seks måneder og et år efter infiltrationen, i henhold til opfølgningsprotokol for knæet; Radiografisk vurdering med panorama-, anteroposterior- og profilrøntgenbilleder af knæene med belastning, med henblik på at detektere ændringer i akse og ledrum (før infiltration, 6 måneder og 1 år efter infiltration, i henhold til knæcentrets opfølgningsprotokol).

     Patienterne vil blive evalueret af en observatør, der er uafhængig af den, der har anvendt den valgte behandling.

• Undersøgelsen af ​​PRP-sammensætning vil blive udført på Cellular Technology Center efter teknik offentliggjort tidligere andetsteds:

Perifere blodprøver fra gruppe A og B vil blive behandlet for at opnå PRP, hvor en del af dette produkt bruges i applikationen og en del bruges til at analysere sammensætningen af ​​det genererede produkt.

Kort efter tilberedning vil en del af produktet blive evalueret for hæmatologisk sammensætning: totalt celleantal, leukocytter og blodplader og gennemsnitlig blodpladevolumen. Resten af ​​PRP'en vil blive opbevaret, i alikvoter på ca. 200 ul, på Cellular Technology Center, hvor det vil forblive frosset i en fryser ved -80°C indtil den proteomiske analyse (specificeret nedenfor) og kvantificeringen af ​​faktorerne og cytokinerne , gennem enzymkoblet immunabsorberende assay og Luminex Kits: interleukin-1β, interleukin-6, interleukin-8, tumornekrosefaktor-α, interferon-γ, interleukin-2, interleukin-2R, interleukin-7, interleukin-15, interleukin- 17, interleukin-12p40 (pro-inflammatoriske cytokiner); interleukin-1RA, interleukin-4, interleukin-5, interleukin-10, interleukin-13, interferon-a (anti-inflammatoriske cytokiner); eotaxin, interferon-gamma-inducerbart protein 10kDa, membrancofaktor protein-1, interferon-y-induceret monokin, makrofag inflammatorisk protein-1a, makrofag inflammatorisk protein-1β (kemokiner); endotelvækstfaktor, b-fibroblastvækstfaktor, G-kolonistimulerende faktor, vaskulær endotelvækstfaktor, transformerende vækstfaktor-β1, transformerende vækstfaktor-β2, transformerende vækstfaktor-β3, blodpladeafledt vækstfaktor-AB, blodpladeafledt vækstfaktor -BB, insulinvækstfaktor-1 (vækstfaktorer).