Trattamento dell'artrosi del ginocchio con plasma ricco di piastrine

• L'obiettivo dello studio è confrontare i risultati clinici dell'infiltrazione con acido ialuronico e del plasma ricco di piastrine (PRP) nel trattamento conservativo dell'artrosi del ginocchio da lieve a moderata. Inoltre, vogliamo standardizzare due protocolli per ottenere e preparare il PRP da utilizzare nel trattamento dell'OA del ginocchio da lieve a moderata.
• Il campione sarà composto da 90 pazienti con osteoartrite del ginocchio in cura presso l'ambulatorio del Programma di monitoraggio e trattamento dell'osteoartrite.
• I pazienti saranno randomizzati in blocchi mediante semplice disegno di buste opache prima dell'applicazione, in 3 gruppi sperimentali, e identificati come descritto di seguito:

GRUPPO PRP Protocollo A: Composto da 30 pazienti che riceveranno un'iniezione intra-articolare di plasma ricco di piastrine (PRP A), una volta alla settimana, per tre settimane consecutive; GRUPPO PRP Protocollo B: Composto da 30 pazienti che riceveranno un'iniezione intra-articolare di plasma ricco di piastrine (PRP B), una volta alla settimana, per tre settimane consecutive; GRUPPO Acido ialuronico: composto da 30 pazienti che riceveranno un'iniezione intra-articolare di 2 ml di acido ialuronico intra-articolare (AHI), una volta alla settimana, per tre settimane consecutive.

• Il PRP A sarà preparato secondo la seguente tecnica precedentemente pubblicata altrove:

  1. Prelievo di 50 mL di sangue periferico dalla vena antecubitale, in provette sterili sottovuoto da 5 mL con citrato di sodio al 10%; Un'aliquota di sangue intero raccolto verrà utilizzata per valutare la contaminazione microbiologica;
  2. Centrifugare il sangue intero per 10 minuti a 1200 rpm, a temperatura ambiente, separando il materiale in due diversi strati (eritrociti, nello strato inferiore, e plasma, nello strato superiore), in una centrifuga del raggio di 6,5 cm;
  3. Separare e centrifugare il plasma per 5 minuti a 1200 rpm, creando due nuovi strati (superiore, che andrà rimosso, inferiore, contenente le piastrine); Si deve prestare attenzione ad aspirare accuratamente il plasma dalla provetta chiusa utilizzando una siringa e un ago e trasferirlo in una nuova provetta di raccolta, iniettandolo con cautela attraverso il tappo;
  4. Preparare il materiale per l'infiltrazione nel ginocchio; dopo la preparazione, si stima che si otterranno 5 mL di PRP, con metà del volume utilizzato per l'iniezione e l'altra metà per l'analisi della composizione e l'analisi microbiologica.

• La preparazione del PRP B sarà effettuata secondo la seguente tecnica precedentemente pubblicata altrove:

  a) Prelievo di 50 mL di sangue periferico dalla vena antecubitale, in provette sterili sottovuoto da 5 mL con citrato di sodio al 10%; b) Centrifugare il sangue intero per 15 minuti a 1500 rpm, a temperatura ambiente, separando il materiale in due diversi strati (globuli rossi, nello strato inferiore, e plasma, nello strato superiore), in una centrifuga del raggio di 6,5 cm; e) Separare e centrifugare il plasma per 7 minuti a 3500 rpm, creando due nuovi strati (superiore, che andrà rimosso, inferiore, contenente le piastrine); Si deve prestare attenzione ad aspirare accuratamente il plasma dalla provetta chiusa utilizzando una siringa e un ago e trasferirlo in una nuova provetta di raccolta, iniettandolo con cautela attraverso il tappo; f) Preparare il materiale per l'infiltrazione nel ginocchio; dopo la preparazione si stima che si otterranno 5 mL di PRP, con metà del volume utilizzato per l'iniezione e l'altra metà per l'analisi della composizione.

• Tutte le infiltrazioni verranno eseguite nella sala delle procedure ambulatoriali utilizzando una tecnica asettica. La tecnica per l'applicazione seguirà i passaggi seguenti:

  1. Paziente seduto sulla barella in posizione comoda, con le ginocchia flesse e bendato (accecante sul trattamento eseguito);
  2. Pulire l'area dove verrà eseguita l'applicazione con garze inumidite con clorexidina degerminante;
  3. Lasciare agire la clorexidina per un minuto e poi rimuoverla con una garza inumidita con alcool al 70%;
  4. Palpazione del ginocchio per infiltrazione non guidata attraverso l'approccio anterolaterale al ginocchio;
  5. Eseguire il pulsante anestetico sulla pelle e sul tessuto sottocutaneo nel sito di infiltrazione con 1 mL di lidocaina al 2% senza vasocostrittore;
  6. Inserire l'ago attaccato alla siringa del prodotto utilizzato attraverso il percorso prescelto;
  7. Iniettare il trattamento secondo la randomizzazione (AHI/PRP A/PRP B);
  8. Rimuovere l'ago e la siringa vuota dall'articolazione;
  9. Eseguire 30 cicli di flesso-estensione del ginocchio per distribuire il prodotto sull'articolazione;

  10. Completa la procedura con una semplice medicazione.

      • Il paziente non deve consumare cibi grassi o bevande alcoliche 48 ore prima della procedura;
      • Se è presente versamento articolare, deve essere aspirato prima dell'infiltrazione;
      • Il paziente deve essere avvisato di tornare in ospedale in caso di dolore, gonfiore o arrossamento esacerbati al ginocchio;
      • I FANS non devono essere utilizzati nella settimana successiva all'applicazione.

• La valutazione clinica consisterà nelle seguenti fasi:

  1. Valutazione funzionale soggettiva, basata su questionari WOMAC, Knee Society Score (KSS) e scala analogica visiva per l'analisi del dolore, della funzione e della soddisfazione (prima dell'infiltrazione, il giorno della terza infiltrazione, tre mesi, sei mesi e un anno dopo l'infiltrazione; secondo al protocollo di follow-up del centro del ginocchio);

  2. Valutazione clinica, consistente in (1) registrazione dei dati demografici (età, sesso, peso, altezza, gravità dell'artrosi), (2) misurazione del range di movimento, (3) valutazione dell'asse degli arti inferiori (prima dell'infiltrazione, su il giorno della terza infiltrazione, tre mesi, sei mesi e un anno dopo l'infiltrazione; secondo il protocollo di follow-up del centro del ginocchio); Valutazione radiografica con radiografie panoramiche, anteroposteriori e di profilo delle ginocchia sotto carico, mirate a rilevare alterazioni dell'asse e dello spazio articolare (prima dell'infiltrazione, 6 mesi e 1 anno dopo l'infiltrazione, secondo il protocollo di follow-up del centro del ginocchio).

     I pazienti saranno valutati da un osservatore indipendente da quello che ha applicato il trattamento selezionato.

• Lo studio della composizione del PRP sarà effettuato presso il Cellular Technology Center seguendo la tecnica precedentemente pubblicata altrove:

I campioni di sangue periferico dei gruppi A e B saranno elaborati per ottenere PRP, con parte di questo prodotto utilizzato nell'applicazione e parte utilizzata per analizzare la composizione del prodotto generato.

Subito dopo la preparazione, una parte del prodotto verrà valutata per la composizione ematologica: conta cellulare totale, leucociti e piastrine e volume medio delle piastrine. Il resto del PRP sarà conservato, in aliquote di circa 200ul, presso il Cellular Technology Center, dove rimarrà congelato in un congelatore a -80°C fino all'analisi proteomica (specificata di seguito) e alla quantificazione dei fattori e delle citochine , attraverso test di immunoassorbimento enzimatico e kit Luminex: interleuchina-1β, interleuchina-6, interleuchina-8, fattore di necrosi tumorale-α, interferone-γ, interleuchina-2, interleuchina-2R, interleuchina-7, interleuchina-15, interleuchina- 17, interleuchina-12p40 (citochine pro-infiammatorie); interleuchina-1RA, interleuchina-4, interleuchina-5, interleuchina-10, interleuchina-13, interferone-α (citochine antinfiammatorie); eotassina, proteina inducibile da interferone-gamma 10kDa, proteina cofattore di membrana-1, monochina indotta da interferone-γ, proteina infiammatoria macrofagica-1α, proteina infiammatoria macrofagica-1β (chemochine); fattore di crescita dell'endotelio, fattore di crescita del b-fibroblasto, fattore stimolante le colonie G, fattore di crescita dell'endotelio vascolare, fattore di crescita trasformante-β1, fattore di crescita trasformante-β2, fattore di crescita trasformante-β3, fattore di crescita derivato dalle piastrine-AB, fattore di crescita derivato dalle piastrine -BB, fattore di crescita dell'insulina-1 (fattori di crescita).