경도 인지 장애에 대한 프로바이오틱스 제제의 효과 (PROBIOMIND)

현재 알츠하이머병(AD) 사례의 수는 전염병 비율에 도달하고 있습니다. 유럽연합(EU)에서는 알츠하이머병 유병률이 65~69세의 2%에서 85~89세의 22%로 증가하고, 인구 고령화로 인해 이 수치는 2040년까지 두 배로 늘어날 것으로 예상된다. 사회에 전례 없는 부담을 안겨줍니다(Jané-Llopis & Gabilondo, 2008). 이러한 통계는 특히 경도 인지 장애(MCI)의 초기 단계에서 질병의 진행을 막고 가장 쇠약하게 만드는 임상 증상의 시작을 지연시키는 중재 전략의 긴급한 필요성을 강조합니다.

잘 알려진 바와 같이, 인지 저하의 병인생리학은 다인자적이며, 수정 불가능한 요인(예: 성별, 유전학)과 수정 가능한 요인(예: 생활 방식)이 모두 관련됩니다. 후자에는 고혈압, 고콜레스테롤혈증, 비만과 같은 인지 저하의 주요 위험 요소에 직접적인 영향을 미치는 품질이 낮은 식단, 신체 활동 부족, 흡연 및 수면 패턴 변경이 있습니다. 더욱이, 최근 연구에서는 식이 요법과 기타 생활 습관 요인이 장내 미생물총의 구성에 상당한 영향을 미치는 것으로 보이며, 이는 장-뇌 축 및 치매 발병에 직접적으로 영향을 미칠 수 있는 것으로 나타났습니다(Kesika et al., 2021). 이는 미생물총 변형 전략을 기반으로 한 새로운 치료 옵션의 문을 열어줍니다.

이러한 맥락에서, 프로바이오틱스는 장내 미생물군 및 결과적으로 장-뇌 축을 유익하게 조절하는 능력으로 인해 인지 장애 관리를 위한 유망한 대안으로 부상했습니다. 그러나 프로바이오틱스 특성은 계통별로 다르다는 점을 유념하는 것이 중요합니다. 즉, 그러한 특성을 규명하기 전에 특정 계통을 철저하게 조사해야 한다는 의미입니다(Hill et al., 2014).

특히 세 가지 프로바이오틱스 균주는 이전 연구(주로 시험관 내)에서 장-뇌 축 조절 및 장 장벽 강화에 잠재적인 긍정적 효과를 보여주었습니다. 이 균주는 **L입니다. 브레비스** CECT 7480, **L. plantarum** CECT 7485 및 **L. 플란타럼** CECT 7481 (L. 플란타럼 DR7™). 구체적으로:

• L. brevis CECT 7480은 시험관 내 실험 연구에서 GABA 생산에 대한 높은 능력뿐만 아니라 기회 감염 병원체에 대한 광범위한 길항작용을 입증했습니다(Bosch et al., 2012; Ferrés-Amat et al., 2020).
• L. plantarum CECT 7485는 장 투과성을 개선하고 아세틸콜린(ACh) 생산 증가를 통해 장-뇌 축을 조절하는 것으로 보이며 기회 감염성 장 병원체에 대한 길항작용을 보여주었습니다(Perez et al., 2020).
• 또한 L. plantarum CECT 7485 및 L. brevis CECT 7480은 최근 스트레스, 불안 및 우울증과 관련된 두 가지 임상 시험에서 조사되어 유익한 효과를 보여주었습니다(Denysov et al., 2023). 그러나 현재까지 이러한 계통은 중추신경계(CNS) 및 인지에 영향을 미치는 다른 병리(예: 노인 인구의 MCI)에 대해 연구되지 않았습니다.
• L. 플란타룸 CECT 7481(L. plantarum DR7™)은 in vitro 연구와 임상 시험에서 세로토닌, 키누레닌, 노르에피네프린과 같은 신경 전달 물질 경로에 관여하는 효소의 조절을 통해 긍정적인 신경 조절 효과를 보여주었습니다. 대사학적 분석에서도 ACh 수준이 증가하는 것으로 나타났습니다. 또한, 성인의 L. plantarum D 투여 후 혈장 코티솔 수치가 상당히 낮아지고(Chong et al., 2019) 산화 스트레스와 혈장 과산화가 감소하는 것으로 확인되었습니다(Chong et al., 2019a). 장-뇌 축 경로의 변화는 성인의 장내 세균 구성 변형과 상관관계가 있었습니다(Liu et al., 2020). 임상적 증거에서는 L. plantarum DR7이 스트레스와 불안에 긍정적인 영향을 미칠 뿐만 아니라 인지 기능도 향상되는 것으로 나타났습니다. 그러나 이러한 발견은 건강한 성인을 대상으로 평가되었으며 MCI 환자에게 이 방법을 사용하려면 그 효과를 검증하기 위한 특정 임상 시험이 필요합니다.

MCI 및 AD와 관련된 신경 전달 물질 회로의 중요성을 고려할 때(Solas et al., 2015), 이 임상 시험은 앞서 언급한 세 가지 프로바이오틱 균주의 조합을 포함하는 식이 보충제를 투여하면 인지 기능을 강화하여 인지 기능을 향상시킬 수 있는 큰 잠재력을 가질 수 있다는 가설을 세웁니다. 장 장벽을 강화하고 장내 미생물 불균형을 예방하며 가장 중요한 것은 장-뇌 축을 조절하는 것입니다.

임상시험은 선택단계와 실험단계의 두 단계로 나누어진다.

선택 단계 또한 세 가지 균주는 안전성 전제조건(시험관 내, 생체 내 및 임상 연구에서 검증됨)을 충족하고 EFSA의 QPS(Qualified Presumption of Safety) 상태를 갖추고 있어 임상 연구에서 긍정적인 결과가 발견될 경우 MCI 인구를 대상으로 인지 저하의 진행을 예방하는 데 도움이 되는 건강 보조 식품의 향후 상용화입니다.

이전에 Clínico San Carlos 병원의 노인병학과 및 관련 커뮤니티 센터(Moncloa 및 Chamartín)에서 연구의 특성에 대해 알고 연구 참여에 관심이 있는 개인은 Complutense University of Pharmacy의 학부로 초대됩니다. 마드리드(0회 방문, V0)를 통해 다음을 통해 자격 기준을 평가합니다.

• 병력: 가족력, 의학적 치료, 신경/정신 질환 및 기타 질환(예: 암), 알코올 중독 병력 등을 포함한 선택 기준의 충족 여부를 확인하기 위해 건강 관련 데이터에 초점을 맞춘 반구조화된 임상 인터뷰입니다.
• 선택 기준을 확인하기 위한 인지 및 기능 평가 설문지: MoCA(Nasreddine et al., 2005), CDR(Morris, 1993) 및 (I)ADL.

적격성이 확인되면 참가자에게는 연구 설계 및 기능에 대한 자세한 정보를 제공하는 환자 정보 시트가 제공됩니다. 연구책임자는 또한 연구에 대한 구두 요약도 제공할 것입니다. 질문에 답하고 이해를 확인한 후 참여에 관심이 있는 사람은 사전 동의서에 서명하게 됩니다.

또한 참가자는 사전 동의 양식에 설명된 대로 왕립 법령 1716/2011에 따라 국립 바이오뱅크 등록소에 남은 생물학적 샘플을 저장하는 데 대해 사전 동의를 제공하기로 선택할 수도 있습니다.

사전 동의에 서명하면 참가자는 다음 방문(V1)에 작성하여 반환할 다음 설문지와 자료를 받게 됩니다.

• 식이 연구 설문지(음식 빈도 설문지, 지중해 식단 준수)
• 대변 ​​수집 용기 및 지침
• 가속도계 및 지침

V0가 끝나면 초기 방문(V1)에서 수행할 다양한 테스트에 대한 약속이 잡혀지며, 모든 테스트는 최대 7일 이내에 완료됩니다.

• 혈액 분석 예약
• MRI 예약
• 자기뇌파검사 및 신경심리검사 예약
• V0에서 제공되는 설문지, 자료 수집, 가이드라인 제공 등 생활습관 연구를 위한 약속.

실험 단계

선택 방문(V0) 이후 참가자는 연구 실험 단계의 16주 개입 기간을 시작합니다. 이 기간 동안 그들은 다음 방문에 참석할 것입니다:

방문 1(V1(개입 기간의 초기 방문)

이번 방문 동안 연구자들은 다음 연구에 대한 일련의 변수를 수집할 것입니다(섹션 7.2.4에 설명되어 있음).

• 인지 기능 연구(UCM 심리학부): 연구팀의 심리학자들은 인지 기능과 관련된 데이터를 수집합니다.
• 자기뇌파검사/EEG 및 MRI가 수행됩니다.
• V0(MoCA 및 CDR)에서 완료된 테스트 외에도 다음 테스트가 수행됩니다.
• 인지 예비 평가
• 일반적인 인지 기능 테스트
• 기능적 능력 테스트
• 정신과 증상 테스트
• 기억, 언어 및 실행 기능 저하에 대한 주관적 인식 평가
• 심리사회적 매개변수 테스트
• 혈액 분석(파트너 실험실): 관련 생화학적 매개변수를 결정하기 위해 공복 혈액 샘플(최소 8시간)을 수집합니다.
• 미생물군 연구(UCM 약학부): 대변 샘플을 수집하여 장내 미생물군 구성을 결정합니다.
• 라이프스타일 연구(UCM 약학부): 연구원은 다음을 수행합니다.
• 식이 연구: V0(음식 빈도 설문지, 지중해 식단 준수) 중에 제출된 설문지를 검토합니다. 처음 24시간 동안 식이 회상이 실시되며, 이 설문지는 일주일 이내에 전화를 통해 2회 더 반복될 것임을 참가자들에게 통보합니다.
• 인체 측정 연구: 신체 측정 및 구성이 기록됩니다.
• 신체 활동 연구: 신체 활동은 검증된 설문지와 가속도 측정을 사용하여 평가됩니다.
• 수면 습관 연구: 수면의 질과 크로노타입은 특정 설문지와 가속도 측정을 사용하여 평가됩니다.
• 기타 건강 지표: 삶의 질과 활력 징후를 측정합니다.

연구자들은 이러한 연구에서 변수를 수집한 후 무작위 목록에 따라 참가자에게 지침을 제공합니다. 구체적으로, 참가자들은 다음 16주 동안 아침 식사와 함께 할당된 제품을 하루 1캡슐씩 복용하도록 지시받게 됩니다. 또한 이 기간 동안 평소의 식습관과 생활 방식(신체 활동, 수면)을 유지하도록 권고받을 것입니다. 최종 방문까지 필요한 캡슐 공급이 제공됩니다.

마지막으로 참가자는 최종 방문(V5)에서 작성하고 반환할 설문지와 자료를 받게 됩니다.

• 식이 연구 설문지(음식 빈도 설문지, 지중해 식단 준수)
• 대변 ​​수집 용기 및 지침
• 가속도계 및 지침
• 치료 순응도 및 내성 관리 시트
• 부작용 관리 시트

최종 방문 날짜는 후속 전화 통화를 통해 확정되며, 일주일 전에 전화나 메시지로 알림을 보내 V1에서 완성된 자료를 가져와야 함을 강조합니다.

V2(4주차); V3(8주차); V4(12주차)

다음을 포함하여 전화 후속 인터뷰가 실시됩니다.

• 제품에 대한 순응성, 내약성 평가
• 부작용 기록

방문 5(V5)(16주차)(개입 기간의 최종 방문):

이번 방문 동안 연구자들은 초기 방문(V1)에서 얻은 것과 동일한 변수를 수집하고 V0 동안 수행된 MoCA 및 CDR 테스트를 실시하여 개입 기간이 끝날 때 인지 기능 평가를 완료할 것입니다.

추가적으로 다음과 같은 작업이 수행됩니다.

• 제품 소비에 대한 순응도 및 내성 평가
• 부작용 기록

불일치나 오류를 방지하고 감지하기 위한 이중 입력 시스템과 필터를 갖춘 데이터베이스가 Excel로 생성됩니다. 정보는 정리되고 검증됩니다. 정성적 데이터(절대빈도, 백분율)와 정량적 데이터(평균, 표준편차, 중앙값, 사분위간 범위, 최소값, 최대값)에 대해 기술 분석을 실시합니다. 그룹 간 차이는 카이제곱 검정을 통해 분석하고, 정량적 데이터는 변수 분포에 따른 적절한 검정을 통해 분석한다.

데이터는 마드리드 콤플루텐스 대학교 정보 기술 및 기술 사용자 지원 분야의 연구 지원 부서와 협력하여 연구의 수석 조사관에 의해 맹검 방식으로 분석됩니다. 통계분석은 SPSS 버전 29.0(SPSS Inc.) 이상 버전을 이용하여 진행됩니다.