Эффект пробиотической формулы при легких когнитивных нарушениях (PROBIOMIND)

В настоящее время число случаев болезни Альцгеймера (БА) достигает масштабов эпидемии. В Европейском Союзе распространенность болезни Альцгеймера увеличивается с 2% среди людей в возрасте 65-69 лет до 22% среди людей в возрасте 85-89 лет, и ожидается, что к 2040 году эта цифра удвоится из-за демографического старения населения, что поставит беспрецедентное бремя для общества (Jané-Llopis & Gabilondo, 2008). Эти статистические данные подчеркивают острую необходимость в стратегиях вмешательства, которые противодействуют прогрессированию заболевания, особенно на ранних стадиях легких когнитивных нарушений (MCI), и отсрочивают появление наиболее изнурительных клинических симптомов.

Как известно, этиопатофизиология снижения когнитивных функций многофакторна и включает как немодифицируемые факторы (например, пол, генетика), так и модифицируемые (например, образ жизни). К числу последних относятся некачественное питание, отсутствие физической активности, курение и изменение режима сна, которые напрямую влияют на ключевые факторы риска снижения когнитивных функций, такие как гипертония, гиперхолестеринемия и ожирение. Более того, недавние исследования показали, что диета и другие факторы образа жизни, по-видимому, существенно влияют на состав микробиоты кишечника, что, в свою очередь, может напрямую влиять на ось кишечник-мозг и патогенез деменции (Kesika et al., 2021). Это открывает двери для новых терапевтических возможностей, основанных на стратегиях изменения микробиоты.

В этом контексте пробиотики стали многообещающей альтернативой для лечения когнитивных расстройств благодаря их способности благотворно модулировать микробиоту кишечника и, следовательно, ось кишечник-мозг. Однако важно отметить, что пробиотические свойства специфичны для штамма, а это означает, что данный штамм должен быть тщательно исследован, прежде чем можно будет приписать такие свойства (Hill et al., 2014).

В частности, в предыдущих исследованиях, в основном in vitro, три пробиотических штамма продемонстрировали потенциальное положительное влияние на модуляцию оси кишечник-мозг и укрепление кишечного барьера. Эти штаммы **L. brevis** CECT 7480, **L. plantarum** CECT 7485 и **L. plantarum** CECT 7481 (L. plantarum DR7™). Конкретно:

• L. brevis CECT 7480 продемонстрировал высокую способность к производству ГАМК в экспериментальных исследованиях in vitro, а также широкий антагонизм в отношении условно-патогенных микроорганизмов (Bosch et al., 2012; Ferrés-Amat et al., 2020).
• L. plantarum CECT 7485, по-видимому, улучшает проницаемость кишечника и модулирует ось кишечник-мозг за счет увеличения выработки ацетилхолина (АХ) и проявляет антагонизм в отношении условно-патогенных кишечных патогенов (Perez et al., 2020).
• Кроме того, L. plantarum CECT 7485 и L. brevis CECT 7480 недавно были исследованы в двух клинических исследованиях, связанных со стрессом, тревогой и депрессией, и показали положительный эффект (Денисов и др., 2023). Однако на сегодняшний день эти штаммы не изучались при других патологиях, поражающих центральную нервную систему (ЦНС) и когнитивные функции, таких как MCI у стареющего населения.
• L. plantarum CECT 7481 (L. plantarum DR7™) продемонстрировал как в исследованиях in vitro, так и в клинических испытаниях положительные нейромодулирующие эффекты за счет регуляции ферментов, участвующих в путях нейротрансмиттеров, таких как серотонин, кинуренин и норадреналин. Метаболомный анализ также показал, что он повышает уровень АХ. Кроме того, после введения L. plantarum D взрослым были обнаружены значительно более низкие уровни кортизола в плазме (Chong et al., 2019) и снижение окислительного стресса и перекисного окисления плазмы (Chong et al., 2019a). Изменения в путях оси кишечник-мозг коррелируют с изменениями в бактериальном составе кишечника у взрослых (Liu et al., 2020). Клинические данные показали положительное влияние L. plantarum DR7 на стресс и тревогу, а также улучшение когнитивных функций в качестве вторичного результата. Однако эти результаты были оценены на здоровых взрослых, и их использование у пациентов с MCI требует специального клинического исследования для подтверждения его эффектов.

Учитывая важность нейротрансмиттерных цепей, участвующих в MCI и AD (Solas et al., 2015), это клиническое исследование предполагает, что прием пищевой добавки, содержащей комбинацию трех вышеупомянутых пробиотических штаммов, может иметь большой потенциал для улучшения когнитивных функций за счет усиления кишечный барьер, предотвращая дисбиоз кишечника и, что наиболее важно, модулируя ось кишечник-мозг.

Клиническое исследование будет разделено на две фазы: фазу отбора и экспериментальную фазу.

Фаза отбора Кроме того, три штамма отвечают предварительным условиям безопасности (проверены in vitro, in vivo и в клинических исследованиях) и имеют статус QPS (квалифицированная презумпция безопасности) от EFSA, что, если в клиническом исследовании будут обнаружены положительные результаты, облегчит будущая коммерциализация пищевых добавок, предназначенных для групп населения с MCI, чтобы помочь предотвратить прогрессирование снижения когнитивных функций.

Лица, заинтересованные в участии в исследовании, которые ранее были проинформированы о его характеристиках в гериатрическом отделении больницы Сан-Карлос и связанных с ней общественных центрах (Монклоа и Чамартин), будут приглашены на фармацевтический факультет Университета Комплутенсе. Мадрид (посещение 0, V0) для оценки критериев отбора посредством:

• Медицинский анамнез: полуструктурированное клиническое интервью, в котором основное внимание уделяется данным, связанным со здоровьем, для проверки соответствия критериям отбора, включая семейный анамнез, лечение, неврологические/психиатрические заболевания и другие состояния (например, рак), алкоголизм в анамнезе и т. д.
• Анкеты когнитивной и функциональной оценки для проверки критериев отбора: MoCA (Nasreddine et al., 2005), CDR (Morris, 1993) и (I)ADL.

После подтверждения права на участие участникам будет предоставлен информационный листок для пациентов, содержащий подробную информацию о дизайне и особенностях исследования. Главный исследователь также предоставит устное резюме исследования. После ответа на любые вопросы и обеспечения понимания заинтересованные в участии подпишут форму информированного согласия.

Кроме того, участники могут также предоставить информированное согласие на хранение оставшихся биологических образцов в Национальном реестре биобанков в соответствии с Королевским указом 1716/2011, как указано в форме информированного согласия.

После подписания информированного согласия участники получат следующие анкеты и материалы, которые необходимо заполнить и вернуть при следующем посещении (V1):

• Анкеты для диетических исследований (опросник по частоте приема пищи, соблюдение средиземноморской диеты)
• Контейнер и инструкция по сбору кала
• Акселерометры и инструкции

В конце V0 будут назначены встречи для проведения различных тестов при первом посещении (V1), которые должны быть завершены в течение максимального периода в 7 дней:

• Запись на анализ крови
• Запись на МРТ
• Запись на магнитоэнцефалографию и нейропсихологические исследования
• Назначение для исследования образа жизни, включая сбор анкет и материалов, представленных на V0, а также предоставление рекомендаций.

ЭКСПЕРИМЕНТАЛЬНЫЙ ЭТАП

После отборочного визита (V0) участники начнут 16-недельный период экспериментальной фазы исследования. В этот период они посетят следующие визиты:

Визит 1 (V1 (начальный визит периода вмешательства)

Во время этого визита исследователи соберут ряд переменных для следующих исследований (описанных в разделе 7.2.4):

• ИЗУЧЕНИЕ КОГНИТИВНОЙ ФУНКЦИИ (Факультет психологии, UCM): Психологи исследовательской группы соберут данные, связанные с когнитивной функцией:
• Будет проведена магнитоэнцефалография/ЭЭГ и МРТ.
• Помимо тестов, выполненных в V0 (MoCA и CDR), будут проведены следующие тесты:
• Оценка когнитивного резерва
• Типичные тесты когнитивных функций
• Функциональные тесты работоспособности
• Тесты на психиатрические симптомы
• Оценка субъективного восприятия снижения памяти, языка и исполнительных функций.
• Тесты психосоциальных параметров
• АНАЛИЗ КРОВИ (партнерская лаборатория): будет взят образец крови натощак (минимум 8 часов) для определения соответствующих биохимических параметров.
• ИССЛЕДОВАНИЕ МИКРОБИОТЫ (Фармацевтический факультет, UCM): Будут собраны образцы стула для определения состава микробиоты кишечника.
• ИЗУЧЕНИЕ ОБРАЗА ЖИЗНИ (Фармацевтический факультет, UCM): Исследователи будут выполнять следующее:
• Исследование диеты: просмотрите анкеты, представленные в ходе V0 (опросник по частоте приема пищи, соблюдение средиземноморской диеты). Будет проведен первый 24-часовой отзыв о диете, и участники будут проинформированы о том, что этот опросник будет повторен еще два раза по телефону в течение недели.
• Антропометрическое исследование: будут записываться размеры и состав тела.
• Исследование физической активности: физическая активность будет оцениваться с использованием утвержденного опросника и акселерометрии.
• Исследование привычек сна: качество сна и хронотип будут оцениваться с помощью специальных опросников и акселерометрии.
• Другие показатели здоровья: будут измеряться качество жизни и жизненно важные показатели.

После сбора переменных из этих исследований исследователи предоставят участникам инструкции в соответствии со списком рандомизации. В частности, участникам будет рекомендовано принимать по одной капсуле назначенного продукта в день во время завтрака в течение следующих 16 недель. Им также будет рекомендовано в этот период соблюдать привычный рацион питания и образ жизни (физическая активность, сон). Будет предоставлен необходимый запас капсул до последнего визита.

Наконец, участники получат анкеты и материалы, которые необходимо заполнить и вернуть во время заключительного визита (V5):

• Анкеты для диетических исследований (опросник по частоте приема пищи, соблюдение средиземноморской диеты)
• Контейнер и инструкция по сбору кала
• Акселерометры и инструкции
• Контрольный листок соблюдения режима лечения и переносимости
• Лист контроля побочных эффектов

Дата заключительного визита будет подтверждена в ходе последующих телефонных звонков и напоминаний, отправленных за неделю до этого по телефону или в сообщении, подчеркивая необходимость принести готовые материалы из V1.

V2 (4-я неделя); V3 (неделя 8); V4 (12-я неделя)

Будут проведены последующие телефонные интервью, в том числе:

• Оценка приверженности и переносимости продукта
• Регистрация нежелательных явлений

Визит 5 (V5) (16-я неделя) (заключительный визит периода вмешательства):

Во время этого визита исследователи соберут те же переменные, которые были получены во время первоначального визита (V1), а также проведут тесты MoCA и CDR, которые проводились во время V0, чтобы завершить оценку когнитивных функций в конце периода вмешательства.

Дополнительно будут проведены:

• Оценка приверженности и толерантности к потреблению продукта
• Регистрация нежелательных явлений

База данных будет создана в Excel, оснащена системой двойной записи и фильтрами для предотвращения и обнаружения любых несоответствий или ошибок. Информация будет очищена и проверена. Описательный анализ будет проводиться для качественных данных (абсолютные частоты, проценты) и количественных данных (среднее значение, стандартное отклонение, медиана, межквартильный размах, минимум и максимум). Различия между группами будут анализироваться с использованием критериев хи-квадрат, а количественные данные будут анализироваться с помощью соответствующего теста, основанного на распределении переменных.

Данные будут проанализированы вслепую главным исследователем исследования в сотрудничестве с отделом поддержки исследований отдела информационных технологий и технической поддержки пользователей Мадридского университета Комплутенсе. Статистический анализ будет выполняться с использованием SPSS версии 29.0 (SPSS Inc.) или более поздних версий.