Effet d'une formule probiotique dans les troubles cognitifs légers (PROBIOMIND)

Actuellement, le nombre de cas de maladie d'Alzheimer (MA) atteint des proportions épidémiques. Dans l'Union européenne, la prévalence de la maladie d'Alzheimer augmente de 2 % chez les individus âgés de 65 à 69 ans à 22 % chez ceux âgés de 85 à 89 ans, et ce chiffre devrait doubler en raison du vieillissement démographique de la population d'ici 2040, ce qui place un un fardeau sans précédent pour la société (Jané-Llopis & Gabilondo, 2008). Ces statistiques mettent en évidence le besoin urgent de stratégies d'intervention qui contrecarrent la progression de la maladie, en particulier dans les premiers stades des troubles cognitifs légers (MCI), et retardent l'apparition des symptômes cliniques les plus débilitants.

Comme on le sait, l’étiopaphysiologie du déclin cognitif est multifactorielle, impliquant à la fois des facteurs non modifiables (par exemple, le sexe, la génétique) et des facteurs modifiables (par exemple, le mode de vie). Parmi ces derniers figurent une alimentation de mauvaise qualité, l’inactivité physique, le tabagisme et des habitudes de sommeil altérées, qui ont un impact direct sur les principaux facteurs de risque de déclin cognitif, tels que l’hypertension, l’hypercholestérolémie et l’obésité. De plus, des études récentes ont observé que l’alimentation et d’autres facteurs liés au mode de vie semblent influencer de manière significative la composition du microbiote intestinal, ce qui peut à son tour affecter directement l’axe intestin-cerveau et la pathogenèse des démences (Kesika et al., 2021). Cela ouvre la porte à de nouvelles options thérapeutiques basées sur des stratégies de modification du microbiote.

Dans ce contexte, les probiotiques apparaissent comme une alternative prometteuse pour la prise en charge des troubles cognitifs grâce à leur capacité à moduler bénéfiquement le microbiote intestinal et, par conséquent, l’axe intestin-cerveau. Cependant, il est important de noter que les propriétés probiotiques sont spécifiques à la souche, ce qui signifie qu'une souche donnée doit faire l'objet d'une étude approfondie avant de pouvoir attribuer de telles propriétés (Hill et al., 2014).

Trois souches de probiotiques, en particulier, ont montré des effets positifs potentiels sur la modulation de l'axe intestin-cerveau et le renforcement de la barrière intestinale dans des études antérieures, principalement in vitro. Ces souches sont **L. brevis** CECT 7480, **L. plantarum** CECT 7485, et **L. plantaire** CECT 7481 (L. plantaire DR7™). Spécifiquement:

• L. brevis CECT 7480 a démontré une grande capacité de production de GABA dans des études expérimentales in vitro, ainsi qu'un large antagonisme contre les agents pathogènes opportunistes (Bosch et al., 2012 ; Ferrés-Amat et al., 2020).
• L. plantarum CECT 7485 semble améliorer la perméabilité intestinale et moduler l'axe intestin-cerveau grâce à une production accrue d'acétylcholine (ACh) et a montré un antagonisme contre les agents pathogènes intestinaux opportunistes (Perez et al., 2020).
• De plus, L. plantarum CECT 7485 et L. brevis CECT 7480 ont récemment été étudiés dans deux essais cliniques liés au stress, à l'anxiété et à la dépression, montrant des effets bénéfiques (Denysov et al., 2023). Cependant, à ce jour, ces souches n’ont pas été étudiées dans d’autres pathologies affectant le système nerveux central (SNC) et la cognition, comme le MCI dans les populations vieillissantes.
• L. plantarum CECT 7481 (L. plantarum DR7™) a montré, tant dans des études in vitro que dans des essais cliniques, des effets neuromodulateurs positifs grâce à la régulation d'enzymes impliquées dans les voies des neurotransmetteurs telles que la sérotonine, la kynurénine et la noradrénaline. Les analyses métabolomiques ont également démontré qu’il augmente les niveaux d’ACh. De plus, des taux plasmatiques de cortisol significativement plus faibles (Chong et al., 2019) et des réductions du stress oxydatif et de la peroxydation plasmatique (Chong et al., 2019a) ont été détectés après l'administration de L. plantarum D chez les adultes. Les modifications des voies de l’axe intestin-cerveau sont corrélées à des modifications de la composition bactérienne intestinale chez les adultes (Liu et al., 2020). Les preuves cliniques ont montré un impact positif de L. plantarum DR7 sur le stress et l'anxiété, ainsi qu'une amélioration de la fonction cognitive comme résultat secondaire. Cependant, ces résultats ont été évalués chez des adultes en bonne santé et son utilisation chez les patients atteints de MCI nécessite un essai clinique spécifique pour valider ses effets.

Compte tenu de l'importance des circuits de neurotransmetteurs impliqués dans le MCI et la MA (Solas et al., 2015), cet essai clinique émet l'hypothèse que l'administration d'un complément alimentaire contenant la combinaison des trois souches probiotiques susmentionnées pourrait avoir un grand potentiel pour améliorer la fonction cognitive en renforçant la barrière intestinale, prévenant la dysbiose intestinale et, surtout, modulant l’axe intestin-cerveau.

L'essai clinique sera divisé en deux phases : la phase de sélection et la phase expérimentale.

Phase de sélection De plus, les trois souches répondent aux conditions préalables de sécurité (vérifiées in vitro, in vivo et dans des études cliniques) et ont le statut QPS (Qualified Presumption of Safety) de l'EFSA, ce qui, si des résultats positifs sont trouvés dans l'étude clinique, faciliterait la future commercialisation d'un complément alimentaire destiné aux populations atteintes de MCI pour aider à prévenir la progression du déclin cognitif.

Les personnes intéressées à participer à l'étude, qui ont été préalablement informées de ses caractéristiques à l'unité de gériatrie de l'hôpital Clínico San Carlos et des centres communautaires associés (Moncloa et Chamartín), seront invitées à la Faculté de Pharmacie de l'Université Complutense de Madrid (Visite 0, V0) pour évaluer les critères d'éligibilité à travers :

• Antécédents médicaux : un entretien clinique semi-structuré axé sur les données liées à la santé pour vérifier le respect des critères de sélection, notamment les antécédents familiaux, les traitements médicaux, les maladies neurologiques/psychiatriques et d'autres conditions (par exemple, le cancer), les antécédents d'alcoolisme, etc.
• Questionnaires d'évaluation cognitive et fonctionnelle pour vérifier les critères de sélection : MoCA (Nasreddine et al., 2005), CDR (Morris, 1993) et (I)ADL.

Une fois l'éligibilité confirmée, les participants recevront une fiche d'information patient fournissant des informations détaillées sur la conception et les caractéristiques de l'étude. Le chercheur principal fournira également un résumé verbal de l'étude. Après avoir répondu à toutes les questions et assuré leur compréhension, les personnes intéressées à participer signeront le formulaire de consentement éclairé.

De plus, les participants peuvent également choisir de donner leur consentement éclairé pour stocker les échantillons biologiques restants dans le registre national des biobanques, conformément au décret royal 1716/2011, comme indiqué dans le formulaire de consentement éclairé.

Une fois les consentements éclairés signés, les participants recevront les questionnaires et matériels suivants à remplir et à retourner lors de leur prochaine visite (V1) :

• Questionnaires d'étude diététique (questionnaire sur la fréquence des aliments, adhésion au régime méditerranéen)
• Conteneur et instructions pour la collecte des selles
• Accéléromètres et instructions

A la fin de la V0, des rendez-vous seront fixés pour les différents tests à réaliser lors de la visite initiale (V1), le tout à réaliser dans un délai maximum de 7 jours :

• Rendez-vous pour analyse de sang
• Rendez-vous pour une IRM
• Rendez-vous pour magnétoencéphalographie et tests neuropsychologiques
• Rendez-vous pour l'étude du mode de vie, comprenant la collecte des questionnaires et du matériel fourni à V0, et la fourniture de lignes directrices.

PHASE EXPÉRIMENTALE

Suite à la visite de sélection (V0), les participants commenceront la période d'intervention de 16 semaines de la phase expérimentale de l'étude. Durant cette période, ils assisteront aux visites suivantes :

Visite 1 (V1 (visite initiale de la période d'intervention)

Au cours de cette visite, les chercheurs collecteront une série de variables pour les études suivantes (décrites à la section 7.2.4) :

• ÉTUDE DE LA FONCTION COGNITIVE (Faculté de psychologie, UCM) : Les psychologues de l'équipe de recherche collecteront des données liées à la fonction cognitive :
• Une magnétoencéphalographie/EEG et une IRM seront réalisées.
• En plus des tests réalisés en V0 (MoCA et CDR), les tests suivants seront réalisés :
• Évaluation de la réserve cognitive
• Tests de fonction cognitive typiques
• Tests de capacité fonctionnelle
• Tests de symptômes psychiatriques
• Évaluation des perceptions subjectives du déclin de la mémoire, du langage et des fonctions exécutives
• Tests de paramètres psychosociaux
• ANALYSE DU SANG (Laboratoire Partenaire) : Un échantillon de sang à jeun (minimum 8 heures) sera prélevé pour déterminer les paramètres biochimiques pertinents.
• ÉTUDE SUR LE MICROBIOTE (Faculté de Pharmacie, UCM) : Des échantillons de selles seront collectés pour déterminer la composition du microbiote intestinal.
• ÉTUDE SUR LE STYLE DE VIE (Faculté de Pharmacie, UCM) : Les chercheurs effectueront les tâches suivantes :
• Etude diététique : Revue des questionnaires soumis lors du V0 (Questionnaire de Fréquence Alimentaire, Adhésion au Régime Méditerranéen). Le premier rappel diététique de 24 heures sera effectué et les participants seront informés que ce questionnaire sera répété deux fois de plus par téléphone dans un délai d'une semaine.
• Étude anthropométrique : les mesures corporelles et la composition seront enregistrées.
• Étude sur l'activité physique : l'activité physique sera évaluée à l'aide d'un questionnaire validé et d'une accélérométrie.
• Étude des habitudes de sommeil : la qualité du sommeil et le chronotype seront évalués à l'aide de questionnaires spécifiques et d'accélérométrie.
• Autres indicateurs de santé : La qualité de vie et les signes vitaux seront mesurés.

Après avoir collecté les variables de ces études, les chercheurs fourniront aux participants des instructions selon la liste de randomisation. Plus précisément, les participants seront invités à prendre une capsule par jour du produit attribué au petit-déjeuner pendant les 16 prochaines semaines. Il leur sera également conseillé de maintenir leur alimentation et leur mode de vie habituels (activité physique, sommeil) pendant cette période. L'approvisionnement nécessaire en capsules sera fourni pour durer jusqu'à la visite finale.

Enfin, les participants recevront des questionnaires et du matériel à remplir et à retourner lors de la visite finale (V5) :

• Questionnaires d'étude diététique (questionnaire sur la fréquence des aliments, adhésion au régime méditerranéen)
• Conteneur et instructions pour la collecte des selles
• Accéléromètres et instructions
• Fiche de contrôle de l’observance et de la tolérance du traitement
• Fiche de contrôle des effets indésirables

La date de la visite finale sera confirmée par des appels téléphoniques de suivi et des rappels envoyés une semaine à l'avance par téléphone ou message, soulignant la nécessité d'apporter le matériel complété de la V1.

V2 (semaine 4) ; V3 (semaine 8) ; V4 (semaine 12)

Des entretiens de suivi téléphonique seront menés, notamment :

• Évaluation de l'adhérence et de la tolérance au produit
• Enregistrement des événements indésirables

Visite 5 (V5) (Semaine 16) (Visite finale de la période d'intervention) :

Au cours de cette visite, les chercheurs collecteront les mêmes variables prises lors de la visite initiale (V1) et administreront également les tests MoCA et CDR qui ont été effectués lors de la V0 pour compléter l'évaluation de la fonction cognitive à la fin de la période d'intervention.

De plus, les tâches suivantes seront réalisées :

• Évaluation de l'adhésion et de la tolérance à la consommation du produit
• Enregistrement des événements indésirables

Une base de données sera créée sous Excel, équipée d'un système de double entrée et de filtres pour prévenir et détecter d'éventuelles incohérences ou erreurs. Les informations seront nettoyées et validées. Une analyse descriptive sera menée pour les données qualitatives (fréquences absolues, pourcentages) et les données quantitatives (moyenne, écart type, médiane, intervalle interquartile, minimum et maximum). Les différences entre les groupes seront analysées à l'aide de tests du chi carré et les données quantitatives seront analysées avec le test approprié basé sur la distribution des variables.

Les données seront analysées en aveugle par le chercheur principal de l'étude, en collaboration avec l'unité de soutien à la recherche du domaine des technologies de l'information et du support technique aux utilisateurs de l'Université Complutense de Madrid. L'analyse statistique sera effectuée à l'aide de SPSS version 29.0 (SPSS Inc.) ou de versions ultérieures.