Influência da Suplementação de Flavonóides e Cafeína no Metabolismo em Repouso

Este estudo utilizará um design randomizado, duplo-cego e cruzado, comparando a ingestão aguda do suplemento misto de flavonoides (MF) em comparação com o controle placebo (PC) em mulheres saudáveis, não obesas e na pré-menopausa. O estudo consistirá em dois períodos de estudo de 24 horas passados ​​no recentemente renovado calorímetro indireto de sala (ou seja, câmara metabólica) no Instituto de Pesquisa em Nutrição Chapel Hill da Universidade da Carolina do Norte (UNC NRI). Os períodos de estudo de 24 horas na câmara metabólica serão separados por 4 semanas. As medidas de resultados primários serão gasto energético de 24 horas (EE), taxa metabólica de repouso (RMR), taxa metabólica de sono (SMR), utilização de substrato do quociente respiratório (RQ) e gasto energético da atividade física (AEE).

Após a avaliação de recrutamento e elegibilidade, os participantes do estudo serão designados aleatoriamente para completar o dia de estudo de flavonoide misto (MF) ou controle de placebo (PC). Após um washout de 4 semanas, os participantes do estudo farão a transição e completarão o tratamento alternativo. Um método de blocos aleatoriamente permutados será gerado usando software de randomização baseado na web (www.randomization.com) resultando em 10 participantes do estudo recebendo MF durante a primeira semana e 10 participantes do estudo recebendo PC durante a primeira semana. Os participantes do estudo consumirão 2 cápsulas de MF ou PC 30 minutos antes do café da manhã e 2 cápsulas de MF ou PC 30 minutos antes do almoço. Durante os dois dias de estudo, os participantes do estudo serão alimentados em equilíbrio energético (ou seja, a ingestão de energia será compatível com o gasto de energia).

2. Participantes do estudo experimental: Usando dados gerados anteriormente na câmara metabólica UNC NRI, um cálculo de tamanho de amostra com poder de 80% revelou que seriam necessários 15-20 participantes do estudo para detectar uma diferença de 50 kcal em 24 h EE. Para contabilizar o atrito, 25 participantes do estudo serão recrutados por meio de anúncio em massa em toda a área local. Mulheres na pré-menopausa serão escolhidas porque esta é uma população-alvo do patrocinador.

3. A elegibilidade para o teste de linha de base pré-estudo será determinada no ambulatório clínico do UNC NRI. A composição corporal (massa gorda e massa isenta de gordura (FFM)) será determinada por meio de absortometria de raios X de dupla energia (DXA) (GE Lunar iDXA; Milwaukee, WI). O índice de massa corporal (IMC, kg/m2) será calculado para altura e peso medidos. A taxa metabólica de repouso (RMR) será estimada usando uma equação baseada em FFM [418 + (20,3 FFM)] (J Appl Physiol 1993;75:2514-2520). Este RMR estimado será usado para calcular a ingestão total de energia dietética enquanto estiver na câmara metabólica: RMR x nível de atividade física (PAL) de 1,3 e, em seguida, ajustado usando dados medidos (detalhes fornecidos abaixo). Uma pequena amostra de sangue será obtida neste momento e os níveis de T3, T4 e TSH avaliados através do laboratório clínico no Lab Corp (Burlington, NC). Um teste de gravidez de urina será realizado.

4. Calorimetria indireta: A câmara metabólica do Nutrition Research Institute em Kannapolis, NC é um calorímetro indireto de circuito aberto para toda a sala. Os analisadores de CO2 e O2 são diferenciais, com leituras de fundo de escala definidas para 0%-1%. O consumo de O2, produção de CO2, EE e QR são registrados a cada minuto. O EE é calculado pela fórmula abreviada de Weir (VO2 X 3,941) + (VCO2 X 1,106), onde VO2 é o volume de oxigênio consumido em L/minuto e VCO2 é o volume de dióxido de carbono liberado em L/minuto. O QR é calculado como VCO2/VO2. A área sob a curva (AUC) será calculada usando dados RQ para as quatro horas seguintes ao café da manhã, almoço e jantar, bem como as horas de sono entre meia-noite e 6h. A atividade física espontânea será medida a cada minuto usando um sensor de sala total. Para calcular a taxa metabólica de repouso (RMR), o EE será plotado em relação à saída do sensor de movimento da atividade (cada um com a média de 30 minutos) e a interceptação y da regressão linear tomada como EE no estado inativo. O RMR será multiplicado por 1440 minutos para extrapolar para 24 horas. A taxa metabólica de sono de 24 horas (SMR) será determinada como a menor EE média (kJ/minuto) medida durante 3 horas consecutivas entre meia-noite e 6h30 e multiplicada por 1440 minutos. A termogênese induzida pela dieta (DIT) será calculada pela subtração de SMR de RMR. O EE induzido por atividade (AEE) será calculado como a diferença entre EE de 24 horas e RMR.

5. Protocolo do dia de estudo da câmara metabólica. Os participantes chegarão ao Edifício do Instituto de Pesquisa em Nutrição (500 Laureate Way) às 7h. Um teste de gravidez de urina será realizado. Às 7h30, os participantes do estudo se apresentarão na câmara metabólica após um jejum noturno (sem alimentos ou bebidas que contenham calorias, álcool ou cafeína a partir das 23h). Os participantes do estudo serão instruídos sobre as expectativas de sua permanência e pesados ​​em jalecos sem sapatos. Às 8h, os participantes do estudo serão selados na câmara. Exceto por um intervalo de 2 minutos a cada hora durante o qual os participantes do estudo serão solicitados a se levantar e se alongar, os participantes do estudo permanecerão sentados ou reclinados, mas acordados durante todo o dia. Os participantes do estudo serão solicitados a realizar as atividades diárias necessárias durante esses intervalos de 2 minutos. O café da manhã (09h00), o almoço (13h30) e o jantar (19h00) serão servidos por uma passagem de câmara de ar. As refeições serão concluídas dentro de 30 minutos após o serviço. Duas cápsulas de MF ou placebo serão consumidas 30 minutos antes do café da manhã e novamente 30 minutos antes do almoço. Às 22h30, os participantes do estudo serão convidados a se deitar para dormir. Os participantes do estudo serão acordados às 6h30 e poderão circular pela câmara para recolher seus pertences. Às 7h15, os participantes do estudo sairão da câmara e serão pesados.

6. Projeto de Dietas Metabólicas: As dietas eucalóricas serão projetadas para fornecer aproximadamente 35% de gordura, 49% de carboidratos e 16% de proteína, refletindo as recomendações atuais para esse grupo populacional. Os menus serão elaborados usando um software de cálculo de nutrientes e gerenciamento de alimentos e consistirão em bagel, manteiga de amendoim, suco de maçã, pão integral, peru, queijo, maionese, pasta amanteigada (10% kcal como gordura), batata frita, lasanha, cenouras, brócolis, pãezinhos e muffin. Não serão servidas bebidas ou alimentos que contenham cafeína. Os mesmos alimentos serão servidos em ambas as visitas à câmara. Um menu básico para cada assunto será preparado com base no RMR X 1,3 calculado, refletindo a natureza sedentária do dia de estudo. Para garantir as condições de equilíbrio energético, o menu base da primeira visita será modificado de acordo com os dados de EE medidos às 3 horas (inclui café da manhã) e 7 horas (inclui café da manhã e almoço). As refeições subsequentes serão ajustadas de acordo com muffins de pêssego de 100 kcal contendo a mesma proporção de gordura, carboidrato e proteína das refeições. Os participantes do estudo serão alimentados com uma quantidade idêntica da mesma refeição em sua segunda visita.

7. Análise Estatística: Os dados serão analisados ​​usando SAS (Cary, NC). Para proteger contra qualquer efeito de transferência da visita 1 para a visita 2, uma regressão de medidas repetidas com uma matriz de correlação não estruturada dentro do sujeito será executada com tratamento (MF e PC) e visita (1 e 2) no modelo junto com um termo de interação. Se o termo de interação não for significativo, ele será removido e o modelo será executado novamente. Duas curvas de gasto energético, uma para o dia MF e outra para o dia PC, serão geradas para cada sujeito com o eixo x representando o tempo (min) e o eixo y representando o gasto energético (kcal). A área sob a curva de gasto de energia para blocos de tempo definidos será calculada usando a regra do trapézio no procedimento EXPAND no SAS (SAS Institute, Inc., Cary, NC). Um teste t pareado na área transformada em log será realizado para comparar o gasto energético de cada período no dia MF com o período correspondente no dia PC. O teste de Shapiro-Wilk no procedimento UNIVARIATE no SAS será utilizado para verificação de normalidade. O método Benjamini-Hochberg para correção de taxa de descoberta falsa no procedimento MULTTEST no SAS será usado para correções de testes múltiplos.

SUPLEMENTO:

O suplemento misto de flavonóides e as cápsulas de placebo serão idênticos e serão fornecidos pelo Reoxcyn Discoveries Group LLC (Salt Lake City, UT). Os ingredientes ativos nas cápsulas de flavonóides incluem vitamina C, extrato de mirtilo silvestre, extrato de folha de chá verde, quercetina, cafeína e ácidos graxos ômega 3 (consulte o Apêndice B). Os ingredientes para o preenchimento da cápsula incluem Nu-Flow 70R (de casca de arroz em pó), tapioca de raiz de mandioca, sílica natural de bambu e raiz de marshmallow. As cápsulas de placebo conterão apenas os ingredientes de preenchimento (sem os ingredientes ativos). Duas cápsulas de MF e PC serão consumidas 30 minutos antes do café da manhã e novamente antes do almoço. As cápsulas MF fornecerão 658 mg de flavonóides e 214 mg de cafeína.