过敏性鼻炎的综合组学方法 (IntegOmics)

鼻粘液和鼻上皮细胞是抵御过敏原的第一道防线。 在鼻粘液中发现了多种蛋白质，这些蛋白质在过敏性鼻炎中起作用，并反映了对过敏原暴露的免疫反应。 过敏性鼻炎患者和健康对照者蛋白质组学特征的差异可以让我们深入了解反应是如何起作用的，以及哪些蛋白质可以导致增强的免疫反应或增强上皮完整性等防御反应。 还已知气道上皮细胞在气道免疫反应和炎症的调节中起着至关重要的作用。 基因表达谱广泛用于分析复杂疾病。 对于患病和健康状态以及基线和激怒状态下的气道上皮基因表达谱，可以阐明防御反应的机制和炎症过程的过程。 作为不同基因表达结果的鼻粘液蛋白可以被视为这种复杂机制以及过敏原和上皮细胞之间相互作用的最终产物的一部分。

鼻粘液蛋白具有不同的来源和生产地点，基因表达不一定会产生功能性代谢物。 该拟议项目的目的是尝试以整体蛋白质组学方法分析从鼻上皮细胞到鼻粘液中蛋白质/蛋白质组学水平的遗传/基因组水平对过敏原的反应。 该分析让我们了解不同的基因表达谱如何导致蛋白质表达，并进一步阐明哪些蛋白质直接来自上皮细胞，哪些是血浆渗出的结果或不同调节过程的基础。

将从过敏性鼻炎患者和健康对照中获得鼻粘液、鼻粘膜和血清。 鼻粘液将使用配备有粘液收集器的特殊抽吸装置在内窥镜控制下从中鼻道收集，不会接触粘膜。 将在局部麻醉下通过鼻刷获得鼻粘膜并进行原代培养。 由血液样本制备的血清。 对草或树花粉过敏的患者将被包括在内，过敏状态将通过皮肤点刺试验和 RAST（Radio-Allergo-Sorbent-test）确定。 样本量的目标是每组 15 名患者。 将在花粉季节内外获取样品。 过敏患者将填写症状评分，并在症状强烈（在花粉季节）和消失（在花粉季节之外）时采集样本。 对于健康对照，采样的时间点将与过敏性鼻炎患者相关联，以具有类似的花粉暴露。 鼻粘液将被送去进行液相色谱串联质谱分析以进行蛋白质组学分析，并从鼻上皮细胞中分离出 RNA 并送去进行微阵列分析。 通过综合组学方法，基因和蛋白质表达将被关联起来，鼻粘液和上皮细胞之间的串扰将被分析。 关键基因或基因簇的鉴定导致进一步鉴定关键蛋白质或蛋白质组作为生物标志物，可用于过敏性鼻炎的新治疗或诊断策略。 综合组学方法缩小了潜在候选者的规模，因为重点在于上皮基因表达及其蛋白质产物，并排除了与过敏原暴露无直接相关性的高丰度蛋白质，例如过敏原。通过血浆渗出。 此外，基因组和蛋白质组学分析可以更详细地解释粘液和上皮屏障如何受到过敏原暴露的影响。 与健康对照组的比较和整个季节的纵向变化进一步阐明了这些人对过敏原暴露的反应以及这如何导致过敏的预防。