评估乌克兰感染中医疗相关的细菌和真菌病原体的物种谱和生物学特性，以及体外研究新型 4-噻唑烷酮衍生物的抗菌和抗真菌活性。 (HAIsUA)

英文摘要 Yulian Konechnyi 医疗保健相关感染的细菌和真菌病原体的物种谱和生物学特性，以及使用 4-噻唑烷酮衍生物对其抗菌活性的研究。 - 符合手稿权利的科学工作。

博士学位论文专业 222 医学（知识领域 22 卫生保健）。 - Danylo Halytskyy 利沃夫国立医科大学，乌克兰卫生部，利沃夫，2021 年。

论文摘要 本文对当前医疗保健的科学和实际问题进行了理论概括和解决，如确定近年来乌克兰医疗保健相关感染（HAI）的结构和分布、病原体的物种谱特​​征、抗生素耐药性的传播、医院感染的临床和微生物学特征，包括由罕见的医院感染病原体引起的特征，以及具有抗菌和抗真菌活性的新化合物的搜索、合成和筛选，以推出抗菌药物的新原型。

根据研究设计，对乌克兰疾病预防控制中心2009-2020年乌克兰医院感染病例登记数据进行了分析。 因此，乌克兰首次对过去 12 年的 HAI 注册情况进行了分析；结果显示，每年平均登记 4,759 ± 710 例医院感染病例。 分析的材料有理由声称该国 HAI 的发生率被严重低估。

根据对当地4家医院ICU科室250例患者的全面、动态、临床和实验室仪器检查结果，并根据微生物学和流行病学标准，205例患者确诊为相应诊断。 HAI 患者中，男性占 46.8%，女性占 53.2%。 在所有 HAI 病例中，儿童占 24.9%（其中新生儿占 8.8%），18-60 岁人群占 64.9%，老年人（> 60 岁）占 10.2%。 最常见的疾病分类是呼吸道感染（36.6%）和尿路感染（34.1%）。 大多数医院感染 (58.6%) 发生在住院第 5 天至第 14 天。

采集了389份生物材料，从中分离出309株微生物，其中以革兰氏阴性菌为主（51.5%），其物种谱包括27个不同物种的代表。 假单胞菌属的代表是分离最多的，有 50 个分离株，占病原体总数的 16.2%。 革兰氏阳性微生物群由 15 种不同的病原体代表，其中最多的是葡萄球菌属成员，有 52 个分离株，占病原体总数的 16.8%。 真菌中分离出12种不同的病原菌，其中以非白色念珠菌为主，共分离出20株，占病原菌总数的6.5%。

乌克兰首次发现并描述了由稀有病原体土雷拉乌尔氏菌（克雷伯氏菌）和麦奇科弧菌引起的临床病例。 我们报告的病例与文献中描述的临床病例进行了比较。 结果表明，R. terrigena分离物具有成膜特性，比标准菌株Raoutella terrigena ATCC 33257更显着，且成膜速率超过葡萄球菌的成膜速率。

分析梅奇科弧菌引起的临床病例，需要注意的是，最可能的感染原因是术中人工血管的微生物污染。

使用生化测试系统（MIKRO-LA-TEST ErbaLachema，捷克共和国）、MALDI-TOF（在波兰比得哥什医学院微生物学系进行）和单个菌株 - 16sRNA- 进行病原体的物种鉴定。 ID。 培养物生化鉴定的鉴定评分（指数）≥ 95%，或 87.4% 的分离株 (n=270) ≥ 99%。 50.8% 的菌株 (n=157) 的非典型性指数 (Tin) 为 0.25-0.49， 即，这些菌株可以被定性为非典型菌株。 95.5% 的分离株 (n=295) 的 MALDI ID 评分 > = 2.0，即显示出良好的物种鉴定，其他分离株的 ID 评分为 1.7-1.9， 表示通用标识。 对克雷伯氏菌属的革兰氏阴性杆菌进行 PCA 分析，将其分为 4 个主要簇，并显示出分离株的显着相似性，并与 RAPD 分析一起，可以确认病原体的院内传播。 根据16S rRNA分析结果，对肺炎克雷伯菌分离株进行了比较，证明了感染的共同起源。 不同的鉴定方法表明，76.1% 的菌株 (n=235) 的结果完全一致。 16sRNA 分析的识别精度最高，但 MALDI-TOF 的速度较慢。

抗生素敏感性结果显示，62.8%（n=194）菌株为MDR，7.4%（n=23）为EDR，28.8%（n=89）为非MDR。 1% (n=3) 菌株归因于 PDR：2 - 恶臭假单胞菌和 1 - 铜绿假单胞菌。 33.8% (n=25) 的研究肠杆菌产生 ESBL，而另一组 47 个研究分离株 (83.9%) 则产生 OXA-48，其中所有分离株均为 MDR。 绝大多数真菌菌株（82.9%）对氟康唑耐药，这种药物最常见的选择可以解释为真菌感染的经验性治疗。

分离出木糖氧化无色杆菌 (No. LMU-147) 和粘质沙雷氏菌 (No. LMU-48) 培养物，证明了它们在引起 HAI 中的作用。 根据 UA 分类（美国 CDC 分类 - 生物安全 1 级），分离出的菌株被归类为 IV 级致病性，但它们可以穿透内脏，对于锯齿状的情况更明显。 产朊假丝酵母 (LMU-127) 是一种低致病性菌株，不具有侵入性。

55种新合成的噻唑衍生物被用来寻找和研究具有抗生素活性的新化合物。 3-[5-(1H-吲哚-3-基亚甲基)-4-氧代-2-硫代噻唑烷-3-基]-丙酸具有显着的抗真菌作用，对念珠菌属真菌的最低抑制浓度为 25 μg /mL，在 2-[5-(1H-Indol-3-ylmmethyl)-4-oxo-2-thioxothiazolidin-3-yl]-乙磺酸中对大肠杆菌具有选择性抗菌作用，具有相似的效果 (MIC=25 μg) /毫升）。 对金黄色葡萄球菌群最有效的是 2-(5-亚基-4-氧代-2-硫代-噻唑烷-3-基)-琥珀酰亚胺，其末端片段位于 C5 位置。

对于2-氰基-2-[5-(乙氧基亚甲基)-4-氧代-3-苯基-噻唑烷-2-亚基]-N-(邻甲苯基)乙酰胺衍生物，其在结构中不含苯撑胺或亚苄基部分噻唑烷酮核C5位置的结构显示出针对铜绿假单胞菌多重耐药临床菌株的最高活性。

实验动物模型研究了具有抗菌活性的“先导化合物”的免疫毒性/过敏性/急性毒性作用。 未发现免疫毒性和过敏作用，但有中等抗炎作用。 在 CD3 T 淋巴细胞绝对数量增加 21.46% 的背景下，CD22 B 淋巴细胞的数量水平略有下降（减少 1.98%）。 抑制连接的激活导致免疫调节指数有所下降（指标不可靠）。

受试物对实验动物免疫球蛋白和白细胞介素水平的影响显示，IgA显着降低21.4%（p<0.05），IgG显着增加21.2%。 因此，在吞噬细胞数量的增长和中性粒细胞的吸收特性方面，吞噬系统的活性有所增加。 这种生物活性的选择性可用于治疗一些免疫病理学病症。

所确定的伴随抗真菌活性的作用表明了进一步研究具有多靶点作用的“类药物分子”的前景。

对医院感染的患病率、登记情况、特异性诊断状况、临床材料中微生物分离现代鉴定方法的比较等分析表明，需要提高微生物学研究水平、实施标准化登记制度以及院内感染研究。具有潜在不利健康影响的感染。

根据论文成果和分离菌株生物学特性研究，相应菌株保藏于乌克兰国家科学院微生物与病毒研究所保藏。

在此基础上，获得实用新型专利2项。 此外，分子对接研究表明，“先导化合物”7-(3,4-二甲氧基苯基)-5-甲基-3H-噻唑并[4,5-b]吡啶-2-酮对选定的蛋白质表现出良好的结合作用与参考 N21 抑制剂和环丙沙星相比。

关键词 医疗相关感染 (HAI)、医院感染、抗菌素耐药性、抗生素耐药性、设备相关病原体、抗菌活性、抗真菌活性、4-噻唑烷酮类、噻唑类、细胞免疫、免疫亲和作用、豚鼠、MALDI、罕见病原体。

出版物。 根据论文材料，共发表论文10篇，其中Web of Science和/或Scopus收录8篇，乌克兰专业期刊（B类）收录1篇，非专业期刊1篇。

工作成果在17次会议上进行了介绍，其中以口头报告的形式在乌克兰境外的3次国际会议和乌克兰境内的1次会议上进行了口头报告。

在此基础上，发布实用新型专利2项、微生物菌株初始保藏证书3项。