우크라이나 감염 및 시험관 내 의료 관련 의료 관련 박테리아 및 진균 병원체의 종 스펙트럼 및 생물학적 특성 평가 새로운 4-티아졸리디논 유도체의 항미생물 및 항진균 활성 조사. (HAIsUA)

영어 요약 Yulian Konechnyi 건강 관리 관련 감염의 박테리아 및 진균 원인 물질의 종 스펙트럼 및 생물학적 특성과 4-티아졸리디논 유도체를 사용하여 이에 대한 항균 활성 연구. - 원고의 권리에 대한 자격을 갖춘 과학적 연구.

박사학위논문 전문 222 의학 (지식 영역 22 건강 관리). - Danylo Halytskyy Lviv 국립 의과 대학, 우크라이나 보건부, Lviv, 2021.

논문 요약 이 논문은 최근 몇 년 동안 우크라이나에서 의료 관련 감염(HAI)의 구조 및 분포 결정, 병원체의 종 스펙트럼 특징, 항생제 내성의 확산, HAI의 희귀한 병원체에 의해 유발되는 특성을 포함한 HAI의 임상적, 미생물학적 특성의 확산뿐만 아니라 항균제의 새로운 프로토타입을 도입하기 위해 항균 및 항진균 활성을 갖는 새로운 화합물의 검색, 합성, 스크리닝 .

연구 설계에 따라 2009~2020년 우크라이나의 HAI 사례 등록에 대한 우크라이나 CDC의 데이터 분석이 수행되었습니다. 그 결과, 우크라이나 최초로 지난 12년간의 HAI 등록이 분석되었습니다. 그 결과, 연간 평균 4,759±710건의 HAI가 등록됐다. 분석된 자료는 해당 국가의 HAI 발생률을 상당히 과소평가했다는 주장의 근거를 제공합니다.

국내 4개 병원 중환자실 환자 250명을 대상으로 종합적, 동적, 임상적, 실험실-기기 검사를 실시하고 미생물학적, 역학적 기준을 바탕으로 205명의 환자에서 해당 진단이 확인됐다. HAI 환자 중 남성은 46.8%, 여성은 53.2%였다. 전체 HAI 사례 중 24.9%는 어린이(신생아 8.8% 포함)였으며, 64.9%는 18~60세, 노인(60세 이상)은 10.2%였습니다. 가장 흔한 진단명은 호흡기 감염(36.6%)과 요로 감염(34.1%)이었습니다. 대부분의 HAI(58.6%)는 입원 5일부터 14일까지 발생했습니다.

389개의 생체 물질을 채취하여 309종의 미생물을 분리했으며 그 중 그람 음성 박테리아가 우세했고(51.5%) 종 스펙트럼에는 27종의 대표자가 포함되었습니다. 슈도모나스(Pseudomonas) 속의 대표균이 가장 많이 분리되어 있었습니다. 50개의 분리균은 전체 병원체 수의 16.2%를 차지했습니다. 그람 양성 미생물군은 15종의 서로 다른 병원균으로 대표되며, 포도상구균 속의 가장 많은 구성원은 52종으로 전체 병원균 수의 16.8%를 차지합니다. 곰팡이 중에서 12종의 병원체가 분리되었으며, 그 중 대부분은 Candida non-albicans이며, 20종의 분리균은 전체 병원체 수의 6.5%를 차지합니다.

우크라이나에서 처음으로 희귀 병원균인 Raoultella(Klebsiella) terrigena와 Vibrio metchikovii에 의한 임상 사례가 확인되고 설명되었습니다. 우리가 보고한 사례를 문헌에 설명된 임상 사례와 비교했습니다. R. terrigena의 분리물은 표준 균주인 Raoutella terrigena ATCC 33257보다 더 뚜렷한 필름 형성 특성을 갖고 있으며 필름 형성 속도가 포도상구균에 의한 필름 형성 속도를 초과하는 것으로 나타났습니다.

Vibrio metchikovii에 의한 임상 사례를 분석해 볼 때, 감염의 가장 가능성 있는 원인은 수술 중 인공 혈관의 미생물 오염이라는 점에 유의해야 합니다.

병원체의 종 식별은 생화학적 테스트 시스템(MIKRO-LA-TEST ErbaLachema, 체코 공화국), MALDI-TOF(폴란드 비드고슈치 의과대학 미생물학과에서 수행) 및 개별 균주에 대해 수행되었습니다. - 16sRNA- ID. 배양물의 생화학적 식별에 대한 식별 점수(지수)는 87.4%(n=270)의 경우 > = 95% 또는 > = 99%였습니다. 균주(n=157)의 50.8%는 비정형 지수(Tin)가 0.25-0.49였으며, 즉, 이러한 균주는 비정형으로 특징지어질 수 있습니다. MALDI ID-점수 95.5%의 분리주(n=295)는 > = 2.0이었습니다. 즉, 우수한 종 식별을 나타냈고, 다른 분리주는 ID 점수가 1.7-1.9였습니다. 이는 일반 식별을 나타냅니다. Klebsiella 속의 그람 음성 간균에 대한 PCA 분석을 통해 이를 4개의 주요 클러스터로 나눌 수 있었고 분리주의 상당한 유사성을 보였으며 RAPD 분석과 함께 병원체의 병원 내 전염을 확인할 수 있었습니다. 16S rRNA 분석 결과에 따라 Klebsiella pneumoniae 분리주 비교가 수행되었으며 이는 감염의 공통 기원을 입증했습니다. 다양한 식별 방법을 통해 결과의 완전한 일치가 76.1%의 균주(n=235)에 대해 기록되었음을 확인했습니다. 16sRNA 분석의 경우 가장 높은 식별 정확도가 표시되지만 속도는 MALDI-TOF의 경우입니다.

항생제 감수성 결과에 따르면 분리균의 62.8%(n=194)가 MDR이었고, 7.4%(n=23)가 EDR, 28.8%(n=89)가 MDR이 아닌 것으로 나타났습니다. 1%(n=3) 균주는 PDR에 기인했습니다: 2 - P.putida 및 1 - P.aeruginosa. 연구된 장내세균 중 33.8%(n=25)가 OXA-48을 생성한 연구된 47개의 분리균(83.9%)으로 구성된 다른 그룹에서 ESBL을 생성했으며 그 중 모든 분리균은 MDR이었습니다. 대다수의 진균 균주(82.9%)는 플루코나졸에 내성이 있었는데, 이는 이 약물의 가장 일반적인 선택이 진균 감염의 경험적 치료법으로 설명될 수 있습니다.

아크로모박터 자일로옥시단스(No LMU-147) 및 세라티아 마르세센스(No LMU-48)의 배양물을 분리하여 HAI를 유발하는 역할이 입증되었습니다. 분리된 균주는 UA 분류(미국 CDC 분류 - 생물안전성 레벨 1)에 따라 클래스 IV 병원성으로 분류되지만 내부 장기에 침투할 수 있으며 톱니 모양이 더 두드러집니다. Candida utilis(LMU-127)는 침입성이 없는 저병원성 균주입니다.

55개의 새로운 합성 티아졸 유도체가 항생제 활성을 갖는 새로운 화합물을 검색하고 연구하는 데 사용되었습니다. 3-[5-(1H-인돌-3-일메틸렌)-4-옥소-2-티옥소티아졸리딘-3-일]-프로판산에서 칸디다 속의 진균에 대한 최소 억제 농도 25 μg에서 뚜렷한 항진균 효과가 있었습니다. /mL 및 유사한 효과를 갖는 2-[5-(1H-인돌-3-일메틸렌)-4-옥소-2-티옥소티아졸리딘-3-일]-에탄설폰산의 대장균에 대한 선택적 항균 효과(MIC=25μg) /mL). Staphylococcus aureus 그룹에 대해 가장 활성이 높은 것은 C5 위치에 말단 단편이 있는 2-(5-ylidene-4-oxo-2-thioxo-thiazolidin-3-yl)-succinimides였습니다.

2-시아노-2-[5-(에톡시메틸렌)-4-옥소-3-페닐-티아졸리딘-2-일리덴]-N-(o-톨릴)아세트아미드 유도체의 경우, 페닐렌아민 또는 벤질리덴 부분을 함유하지 않습니다. 티아졸리돈 핵의 C5 위치에 있는 구조는 다약제 내성 임상 균주인 녹농균(Pseudomonas aeruginosa)에 대해 가장 높은 활성을 나타냈습니다.

실험실 동물 모델은 항균 활성을 갖는 "리더 화합물"의 면역독성/알레르기성/급성 독성 효과를 연구했습니다. 면역독성 및 알레르기 효과는 발견되지 않았지만 중간 정도의 항염증 효과가 있습니다. CD3 T-림프구의 절대 수가 21.46% 증가한 배경에 대해 CD22 B-림프구의 정량적 수준이 약간 감소한 것으로 기록되었습니다(1.98%). 억제 연결의 활성화로 인해 면역조절 지수가 약간 감소했습니다(지표는 신뢰할 수 없음).

실험동물의 면역글로불린 및 인터루킨 수치에 대한 시험물질의 영향은 IgA가 21.4% 유의하게 감소하였고(p<0.05) IgG는 21.2% 증가하였다. 따라서 식세포 수의 증가와 호중구의 흡수 특성 측면에서 식세포 시스템의 활동이 증가했습니다. 이러한 생물학적 활성의 선택성은 일부 면역병리학적 상태의 치료에 유용할 수 있습니다.

항진균 활성에 수반되는 확인된 효과는 다중표적 활성을 갖는 "약물 유사 분자"에 대한 추가 연구에 대한 전망을 나타냅니다.

HAI 유병률 분석, 등록, 특정 진단 상태, 임상 물질에서 분리된 미생물을 식별하는 현대적인 방법 비교는 미생물학 연구 수준을 높이고 표준화된 등록 시스템을 구현하며 병원 내 미생물 연구 수준을 높일 필요가 있음을 나타냅니다. 잠재적으로 건강에 부정적인 영향을 미치는 감염.

분리물의 생물학적 특성에 대한 논문 결과 및 연구에 따르면, 해당 균주는 우크라이나 국립과학원 미생물학 및 바이러스학 연구소 보관소에 기탁되었습니다.

연구를 바탕으로 2개의 실용신안 특허가 등록되었습니다. 또한, 분자 도킹 연구에서는 "리더 화합물"인 7-(3,4-디메톡시페닐)-5-메틸-3H-티아졸로[4,5-b]피리딘-2-온이 선택된 단백질에 대한 우수한 결합을 보여주었다는 사실이 밝혀졌습니다. 기준 N21 억제제 및 시프로플록사신과 비교한 표적입니다.

키워드 의료 관련 감염(HAI), 병원 내 감염, 항균 내성, 항생제 내성, 기기 관련 병원체, 항균 활성, 항진균 활성, 4-티아졸리디논, 티아졸, 세포 면역, 면역 자극 작용, 기니피그, MALDI, 희귀 병원체.

출판물. 논문 자료에 따르면 Web of Science 및/또는 Scopus 저널에 색인된 8개의 기사, 우크라이나 전문 저널(카테고리 "B")의 기사, 비전문 저널의 1개의 기사를 포함하여 10개의 기사가 출판되었습니다.

작업 결과는 우크라이나 외 3개 국제회의와 우크라이나 1개 회의의 구두보고 형식을 포함해 17개 회의에서 발표됐다.

작업결과를 바탕으로 실용신안특허 2건과 미생물균주 최초기탁증명서 3건을 공개하였습니다.