Použití vektorů SV40 k léčbě chronické myeloidní leukémie (CML)

Nedávno byla vyvinuta nová metodologie, která usnadňuje specifické umlčování genů. Metoda je založena na schopnosti malých molekul nukleových kyselin (RNA) specificky potlačovat expresi cílových genů. Nedávno bylo prokázáno, že tyto malé interferující molekuly RNA (siRNA) potlačují v buňkách tkáňových kultur jeden ze dvou typů běžných fúzních genů přítomných u pacientů s CML. Tyto studie ukázaly, že léčba syntetickou siRNA inhibovala buněčný růst a zvýšila citlivost na imatinib. Tato zjištění nabízejí naději, že nová forma genové terapie založená na této strategii může zlepšit výsledky léčby pacientů s CML, zejména při použití v kombinaci s jinými přístupy, jako je inhibitor tyrozinkinázy imatinib, který byl zmíněn výše.

Naše skupina vyvinula inovativní vektor, který je nejvhodnější pro dodání molekul siRNA do lidských hematopoetických buněk s dostatečnou účinností. Vektor je založen na opičím viru zvaném opičí virus 40 (SV40). Virový obal neboli kapsida se vyrábí biosynteticky. Byl navržen tak, aby se sám sestavil ve zkumavce kolem vybraných nukleových kyselin a dodal tuto DNA nebo RNA do cílových buněk. Tento vektor je bezpečnější než jiné dostupné virové vektory, protože veškerý virový genetický materiál je vyloučen z konečného produktu. Vektor nevyvolává imunitní odpověď a umožňuje tak opakované podávání. Projekt zahájíme testováním nedávno publikovaných molekul siRNA proti jednomu z fúzních genů a několika alternativních molekul siRNA, které navrhneme proti ostatním fúzním genům. Molekuly budou testovány na účinnost v buněčných liniích tkáňových kultur měřením represe příslušného fúzního genu, snížení hladiny tyrosinkinázy a inhibice růstu buněk. Pro další studie budou vybrány nejúčinnější molekuly siRNA. Vektory budou testovány na buněčných liniích na umlčení genu a buněčnou smrt jako dříve. V konečné fázi otestujeme nejlepší vektory na jejich účinnost v bílých krvinkách získaných od pacientů s CML.