Uso dei vettori SV40 per il trattamento della leucemia mieloide cronica (LMC)

Recentemente è stata sviluppata una nuova metodologia che facilita il silenziamento specifico dei geni. Il metodo si basa sulla proprietà di piccole molecole di acidi nucleici (RNA) di reprimere specificamente l'espressione di geni mirati. È stato recentemente dimostrato che queste piccole molecole di RNA interferenti (siRNA) reprimono, nelle cellule di coltura tissutale, uno dei due tipi di geni di fusione comuni presenti nei pazienti affetti da LMC. Questi studi hanno dimostrato che il trattamento con siRNA sintetico ha inibito la crescita cellulare e aumentato la sensibilità all'imatinib. Questi risultati fanno sperare che una nuova forma di terapia genica basata su questa strategia possa migliorare l'esito del trattamento dei pazienti con LMC, in particolare se utilizzata in combinazione con altri approcci come l'imatinib, inibitore della tirosin-chinasi, menzionato sopra.

Il nostro gruppo ha sviluppato un vettore innovativo che è più adatto a fornire molecole di siRNA in cellule ematopoietiche umane con sufficiente efficacia. Il vettore si basa su un virus scimmia chiamato virus simian 40 (SV40). Il rivestimento virale, o capside, è prodotto biosinteticamente. È stato progettato per autoassemblarsi nella provetta attorno agli acidi nucleici scelti e per trasportare questo DNA o RNA nelle cellule bersaglio. Questo vettore è più sicuro di altri vettori virali disponibili poiché tutto il materiale genetico virale è escluso dal prodotto finale. Il vettore non suscita risposta immunitaria, permettendo così la somministrazione ripetuta. Inizieremo il progetto testando le molecole di siRNA recentemente pubblicate contro uno dei geni di fusione, e diverse molecole di siRNA alternative che progetteremo contro gli altri geni di fusione. Le molecole saranno testate per l'efficacia in linee cellulari di colture tissutali, misurando la repressione del rispettivo gene di fusione, la riduzione del livello della tirosina chinasi e l'inibizione della crescita cellulare. Le molecole di siRNA più efficaci saranno selezionate per ulteriori studi. I vettori saranno testati su linee cellulari per il silenziamento genico e la morte cellulare come prima. Nella fase finale testeremo i migliori vettori per la loro efficacia nei globuli bianchi ottenuti da pazienti con LMC.