Verwendung von SV40-Vektoren zur Behandlung von chronischer myeloischer Leukämie (CML)

Kürzlich wurde eine neuartige Methodik entwickelt, die das spezifische Silencing von Genen ermöglicht. Das Verfahren basiert auf der Eigenschaft kleiner Moleküle von Nukleinsäuren (RNA), die Expression von Zielgenen spezifisch zu unterdrücken. Es wurde kürzlich gezeigt, dass diese kleinen interferierenden RNA-Moleküle (siRNA) in Gewebekulturzellen einen der beiden Typen der gemeinsamen Fusionsgene unterdrücken, die bei CML-Patienten vorhanden sind. Diese Studien zeigten, dass die Behandlung mit synthetischer siRNA das Zellwachstum hemmte und die Empfindlichkeit gegenüber Imatinib erhöhte. Diese Ergebnisse lassen hoffen, dass eine neue Form der Gentherapie auf der Grundlage dieser Strategie das Behandlungsergebnis von CML-Patienten verbessern kann, insbesondere wenn sie in Kombination mit anderen Ansätzen wie dem oben erwähnten Tyrosinkinase-Hemmer Imatinib eingesetzt wird.

Unsere Gruppe hat einen innovativen Vektor entwickelt, der am besten geeignet ist, um siRNA-Moleküle mit ausreichender Wirksamkeit in menschliche hämatopoetische Zellen zu transportieren. Der Vektor basiert auf einem Affenvirus namens Simian Virus 40 (SV40). Die virale Hülle oder das Kapsid wird biosynthetisch hergestellt. Es wurde so konstruiert, dass es sich im Reagenzglas um die Nukleinsäuren der Wahl selbst zusammensetzt und diese DNA oder RNA in die Zielzellen einbringt. Dieser Vektor ist sicherer als andere verfügbare virale Vektoren, da das gesamte virale genetische Material aus dem Endprodukt ausgeschlossen wird. Der Vektor löst keine Immunantwort aus und erlaubt somit eine wiederholte Verabreichung. Wir werden das Projekt beginnen, indem wir die kürzlich veröffentlichten siRNA-Moleküle gegen eines der Fusionsgene und mehrere alternative siRNA-Moleküle, die wir gegen die anderen Fusionsgene entwickeln werden, testen. Die Moleküle werden auf ihre Wirksamkeit in Gewebekultur-Zelllinien getestet, indem die Repression des jeweiligen Fusionsgens, die Verringerung des Spiegels der Tyrosinkinase und die Hemmung des Zellwachstums gemessen werden. Die wirksamsten siRNA-Moleküle werden für weitere Studien ausgewählt. Die Vektoren werden wie bisher an Zelllinien auf Gen-Silencing und Zelltod getestet. In der letzten Phase werden wir die besten Vektoren auf ihre Wirksamkeit in weißen Blutkörperchen von CML-Patienten testen.