Brug af SV40-vektorer til behandling af kronisk myeloid leukæmi (CML)

En ny metodologi, der letter specifik lyddæmpning af gener, er for nylig blevet udviklet. Metoden er baseret på egenskaben af ​​små molekyler af nukleinsyrer (RNA) til specifikt at undertrykke ekspression af målrettede gener. Disse små interfererende RNA (siRNA) molekyler blev for nylig påvist at undertrykke, i vævskulturceller, en af ​​de to typer af de almindelige fusionsgener, der er til stede i CML-patienter. Disse undersøgelser viste, at behandling med syntetisk siRNA hæmmede cellevækst og øgede følsomheden over for imatinib. Disse resultater giver håb om, at en ny form for genterapi baseret på denne strategi kan forbedre behandlingsresultatet for CML-patienter, især når det bruges i kombination med andre tilgange, såsom tyrosinkinasehæmmeren imatinib, der blev nævnt ovenfor.

Vores gruppe har udviklet en innovativ vektor, der er bedst egnet til at levere siRNA-molekyler ind i humane hæmatopoietiske celler med tilstrækkelig effektivitet. Vektoren er baseret på et abevirus kaldet simian virus 40 (SV40). Den virale pels eller kapsidet fremstilles biosyntetisk. Det blev konstrueret til selv at samle sig i reagensglasset omkring de valgte nukleinsyrer og til at levere dette DNA eller RNA til målceller. Denne vektor er sikrere end andre tilgængelige virale vektorer, da alt det virale genetiske materiale er udelukket fra slutproduktet. Vektoren fremkalder ikke immunreaktion, hvilket tillader gentagen administration. Vi starter projektet med at teste de nyligt offentliggjorte siRNA-molekyler mod et af fusionsgenerne, og flere alternative siRNA-molekyler, som vi vil designe mod de andre fusionsgener. Molekylerne vil blive testet for effektivitet i vævskulturcellelinjer ved at måle repression af det respektive fusionsgen, reduktion i niveauet af tyrosinkinase og hæmning af cellevækst. De mest effektive siRNA-molekyler vil blive udvalgt til yderligere undersøgelser. Vektorerne vil blive testet på cellelinjer for gendæmpning og celledød som før. På den sidste fase vil vi teste de bedste vektorer for deres effektivitet i hvide blodlegemer opnået fra CML-patienter.