Léčba kmenovými buňkami pro pacienty s fokální segmentální glomerulosklerózou (STEFOG)

Bude studováno pět pacientů s progresivním chronickým onemocněním ledvin a odhadovanou clearance mezi 40 a 20 ml/min. Pacienti budou sledováni klinickým a laboratorním vyšetřením po dobu 3 měsíců před výkonem. Tyto předchozí výsledky slouží jako kontrola pro srovnání s podruhé, kdy stejní pacienti dostávají léčbu kmenovými buňkami, které jsou následně sledovány po dobu 9 měsíců, celkem jeden rok klinického sledování.

Aspirace kostní dřeně a následná příprava buněk byly provedeny ve stejný den jako endovaskulární infuze autologních mononukleárních kmenových buněk odvozených z kostní dřeně (BMDMC) v obou renálních tepnách. Odběr byl proveden ve spinální anestezii a lehké sedaci, punkcí a opakovanými aspiracemi v oblasti zadního hřebene kyčelního. Od každého pacienta bylo odebráno celkem 80 ml aspirátu kostní dřeně a po odstranění kostních a tukových zbytků byly mononukleární buňky izolovány pomocí Ficoll-Paque Plus (Amersham Biosciences, São Paulo, Brazílie). U každého pacienta 2× 107 buněk bude označeno 99mTc. Stručně řečeno, k buňkám se přidá 500 μl sterilního roztoku SnCl2 a směs se inkubuje při teplotě místnosti po dobu 10 minut. Potom se přidá 45 milicurie (mCi) 99mTc a inkubace pokračuje dalších 10 minut. Po centrifugaci (500 x g po dobu 5 minut) se supernatant odstraní a buňky se promyjí fyziologickým roztokem. Peleta bude také resuspendována ve fyziologickém roztoku. Životaschopnost značených buněk bude hodnocena vylučovacím testem trypanové modři a odhadována na vyšší než 93 % ve všech případech. Účinnost značení (%) se vypočítá jako aktivita v peletě dělená součtem radioaktivity v peleta plus supernatant a odhaduje se, že je větší než 90 % ve všech případech.

Po odběru kmenových buněk bude pacient podroben punkci femorální tepny Seldingerovou technikou v lokální anestezii s následnou katetrizací ústí renálních tepen s minimálním použitím neiontového jodovaného kontrastu. Zavedením diagnostického katétru nebo vodítka bude roztok čítající asi 30 až 100 milionů rozpuštěných plazmatických buněk rozdělen a injikován do dvou renálních tepen. Objem infuze je asi 5 ml v každé ledvině. Skenování celého těla a planární skenování bude provedeno 2 a 24 hodin po infuzi, aby se určila migrace a životaschopnost buněk. Pacient zůstane hospitalizován po dobu více než 48 hodin za účelem klinického sledování a odběru laboratorních testů.