EnVision CF multicentrická studie glukózové tolerance u cystické fibrózy

A. Hypotézy a konkrétní cíle:

Diabetes mellitus související s cystickou fibrózou (CFRD) byl komunitou CF označen za jednu z deseti hlavních priorit výzkumu CF1. U CF začíná klinický pokles v důsledku dysglykémie časně, před diagnózou CFRD2, a zvyšuje plicní pokles a mortalitu3. Současné definice dysglykémie však byly odvozeny od populací bez CF a bohužel v současnosti neexistuje způsob, jak určit, kdo z pacientů s CF a dysglykémií bude mít morbiditu, mortalitu nebo největší riziko CFRD. CF centrum v Miláně však zjistilo, že měřitelné proměnné závislé na věku a pohlaví při orálním glukózovém tolerančním testování (OGTT) silně predikují selhání β-buněk 4 – primární hnací sílu klinického poklesu. Navrhujeme multicentrickou studii ke stanovení referenční hodnoty závislé na věku a pohlaví pro odhady funkce β-buněk a citlivosti na inzulín v americké populaci CF odvozené od fsOGTT a prozkoumání vztahu těchto měření ke klinickým výsledkům relevantním pro CF a také zkoumání potenciálních mechanismů, které mohou řídit funkční pokles beta buněk. Kromě toho budeme shromažďovat tato data v novém věku modulátorových terapií regulátoru transmembránové vodivosti cystické fibrózy (CFTR), abychom definovali model, který bude nejrelevantnější pro naši současnou generaci pacientů s CF.

Specifický cíl 1: Stanovit referenční hodnoty závislé na věku a pohlaví z OGTT a odhadů funkce β-buněk a citlivosti na inzulín odvozených od OGTT u různorodé populace 475 nediabetických dětí a dospělých s CF, ve 4 centrech s EnVision Emerging Leaders as site-PIs.

Hypotéza: Podobně jako standardní růstové grafy s průměry a percentily na základě směrodatné odchylky, hodnoty fsOGTT (glukóza, inzulín, c-peptid) a výsledné odhady funkce β-buněk odvozené od fsOGTT (citlivost beta buněk na glukózu, perorální citlivost na glukózu na inzulín ) bude spadat do kontinua závislého na věku a pohlaví, které bude konzistentní u pacientů s CF ve čtyřech různých amerických centrech.

Specifický cíl 2: Stanovit vztah mezi referenčními hodnotami OGTT a odhady funkce β-buněk a citlivosti na inzulín ke klinicky relevantním výsledkům.

Hypotéza: Hodnoty inzulinu, glukózy a C-peptidu odvozené od fsOGTT v kombinaci s odhady funkce β-buněk (citlivost beta buněk na glukózu, OGIS) budou korelovat s důležitými markery klinického stavu (FEV-1, BMI Z skóre, počet plicních exacerbací za posledních 12 měsíců) v závislosti na věku a pohlaví.

Specifický cíl 3 (průzkumný): Shromáždit další opatření v podskupině této velké kohorty k osvětlení vztahu mezi normálními rozsahy funkce beta buněk (jak bylo stanoveno výše) a možnými mechanismy, které řídí abnormální funkci beta buněk, včetně: abnormální svalové hmoty, abnormality hormonů, které regulují funkci beta buněk (konkrétně inkretiny (glukagonu podobný peptid-1 (GLP-1), glukózo-dependentní inzulinotropní polypeptid (GIP)) a ostrůvkových hormonů (glukagon, pankreatický polypeptid (PP)), abnormality proti -regulace abnormální sekrece inzulínu (hladiny katecholaminů) a měření volně žijící glukózy shromážděné kontinuálním monitorováním glukózy. Kromě toho skladované sérum od 475 pacientů s výjimečně dobře charakterizovanými metabolickými profily poskytuje bezprecedentní příležitost pomoci informovat o budoucích výzkumných otázkách.

Hypotéza 3a: Nižší beztuková tělesná hmota, jak byla hodnocena pomocí DXA, je spojena s citlivostí beta buněk na glukózu v závislosti na věku a pohlaví.

Hypotéza 3b: Vzorce sekrece ostrůvkového hormonu a inkretinů jsou závislé na věku a pohlaví a glukózová citlivost β buněk bude korelovat s PP a GIP, ale ne s glukagonem a GLP-1 Hypotéza 3c: Snížená glukózová citlivost β buněk je spojena s vyšší mírou reaktivních reakcí hypoglykémie s nepřiměřenou odpovědí katecholaminů a glukagonů během OGTT.

Hypotéza 3d: identifikovatelné míry CGM (např. Vrchol glukózy, čas strávený >200 mg/dl, směrodatná odchylka) bude korelovat s výsledky odvozenými z modelu, konkrétně senzitivitou β buněk na glukózu způsobem závislým na věku a pohlaví

B. Pozadí a význam:

Diabetes související s cystickou fibrózou (CFRD) je nezávislou příčinou zvýšeného počtu předčasných úmrtí u lidí s cystickou fibrózou (CF)3. Z tohoto důvodu komunita CF uznala CFRD jako jednu ze svých deseti hlavních výzkumných priorit1. Důležité je, že abnormality metabolismu glukózy v krvi (dysglykémie) jsou přítomny u CF pravděpodobně od narození5 a způsobují stále rychlejší pokles funkce plic a ztrátu zdravé tělesné hmoty roky před stanovením diagnózy CFRD2. Není však jasné, v jakém bodě by jednotlivci mohli mít prospěch z léčby dysglykémie, protože samotná léčba může být další zátěží. Navíc s rostoucím používáním modulátorů regulátoru transmembránové vodivosti (CFTR) cystické fibrózy se přirozená historie vývoje a progrese CFRD pravděpodobně změní. Je tedy nezbytné, abychom lépe porozuměli tomu, kteří pacienti s CF s dysglykémií jsou vystaveni největšímu riziku nadměrné mortality v důsledku dysglykémie a progrese do CFRD. Primárním defektem vedoucím k dysglykémii u CF je nedostatečná sekrece inzulínu sekundární k abnormální funkci beta buněk6. Důležité je, že pochopení dysfunkce beta buněk je zásadní pro řešení každé formy diabetes mellitus, nejen CFRD. Testy zlatého standardu pro funkci beta buněk (hyperglykemický clamp a tracer studie) jsou však složité, a proto je nelze snadno použít ve velkých studiích. V důsledku toho bylo ze strany mnoha center vynaloženo značné úsilí na vývoj metod pro testování funkce beta buněk ze snadno dostupných datových bodů a v ideálním případě klinicky užitečných. Dr. Andrea Mari z Institute of Neuroscience v Itálii vyvinul model, který dokáže odvodit více indexů funkce beta buněk z často odebraných vzorků OGTT, s vynikající shodou se zlatým standardem hyperglykemické svorky. To je zvláště důležité v populaci CF, kde je testování OGTT doporučenou modalitou pro screening diabetu. Model Dr. Mari byl dobře validován u normálních subjektů7, subjektů s diabetes mellitus 1. a 2. typu a u subjektů s prediabetem8 a je přijímanou alternativou pro hodnocení funkce beta buněk ve velkých studiích, kde jsou svorkové protokoly obtížné nebo nemožné 9. Důležité je, že Dr. Alberto Battezzatti, dětský endokrinolog z centra pro CF v Miláně v Itálii, který se dlouhodobě věnuje CFRD, rozšířil modelování Dr. Mari na populaci CF. Dr. Battezzati prokázal, že existuje silný vztah mezi hladinami inzulínu, glukózy a C-peptidu naměřenými během 3hodinového testování OGTT a věkem a pohlavím subjektů s CF4. Naším cílem ve spolupráci s Dr. Battezzati a kolegy je vyvinout normální rozmezí pro tato měření nebo v podstatě „graf růstu“ pro OGTT u pacientů s CF, který dokáže přesně předpovědět dysfunkci beta buněk a případnou progresi do CFRD. Dalšími kroky je zjednodušení modelu tak, aby 2-3 samostatné vzorky přesně předpovídaly progresi k CFRD a morbiditu u subjektů s CF.

Vyšetřovatelé navrhují spolupráci s Dr. Battezzati a italskými CF centry. vyšetřovatelé ověří italský model ve velké a různorodé populaci v USA a korelují ho se specifickými klinickými výsledky relevantními pro morbiditu a mortalitu u CF, což umožní vývoj prediktorů v modelu specifickém pro subjekty v USA a zajistí klinickou relevanci pro naše pacientů. Kromě toho budou investigaros shromažďovat tyto výsledky a sledovat výsledky pacientů v této nové éře terapie modulátorem CFTR, přičemž vyvinou model, který bude nejrelevantnější pro současnou generaci pacientů s CF. Tím se stanoví "normální rozmezí" závislá na věku a pohlaví pro hodnoty glukózy, inzulínu a c-peptidu z OGTT, stejně jako determinanty funkce beta buněk odvozené z OGTT. Stanovení normálních rozsahů těchto měření umožní určit, kteří pacienti s CF jsou ztracení abnormální, a případně určit, u kterých v dané kategorii glukózové tolerance u CF dojde ke klinickému kompromisu a progresi do CFRD. Dlouhodobým cílem bude vyvinout z těchto normálních rozmezí, včetně normálních rozmezí pro indexy funkce beta buněk a inzulinové rezistence, nejvíce prediktivní časové body a testy pro vývoj zjednodušeného modelu, který bude optimálně předpovídat riziko klinického poklesu CF. pacient daného věku a pohlaví. Ideální model se bude skládat ze 2-3 diskrétních časových bodů pro přesnou předpověď klinického zhoršení.

Všichni čtyři řešitelé tohoto grantu založili nebo rozvíjejí dlouhodobé profesní zaměření na diabetes mellitus související s cystickou fibrózou a dysglykémii u cystické fibrózy. Tento projekt představuje významnou příležitost charakterizovat velkou kohortu subjektů s dobře definovanou dysglykémií a dysfunkcí beta buněk ve spolupráci se stejně velkou mezinárodní kohortou s odpovídajícími datovými soubory. Představuje bezprecedentní příležitost plně prozkoumat hloubku a šíři dysglykémie u CF a také prozkoumat dopad, který má dysglykémie na zdraví lidí s CF. Dlouhodobou hodnotu tohoto projektu zvyšuje i zřízení bioúložiště uložených vzorků, které budou z této kohorty získány. To umožní v budoucnu možnost dotazovat se na tyto vzorky za účelem dalšího zkoumání přirozené historie a patofyziologie CFRD a potenciálně biomarkerů ve velké kohortě s jasně a přesně definovanou funkcí beta buněk. Tato skupina má jedinečná aktiva k dokončení tohoto úkolu, protože zastupujeme čtyři jedinečná centra CF; to vše s oddanými endokrinology CF, kteří jsou programem EnVision uznáváni jako rozvíjející se vůdci v endokrinologii CF, s koordinovaným mentorstvím tohoto programu přední odbornicí v oblasti CFRD, Dr. Antoinette Moran.

C. Předběžné studie:

V současnosti je doporučeným screeningovým testem na CFRD orální glukózový toleranční test (OGTT)10. Ačkoli abnormality tohoto testu předpovídají dlouhodobé výsledky u CF, diagnostické koncové body, které v současnosti používáme, jsou založeny na údajích od jiných dospělých s diabetem 2. typu a nejsou specifické pro CF. Objevují se důkazy, že u pacientů s CF, kteří nesplňují formální kritéria pro abnormality glukózy podle OGTT, stále dochází k poklesu klinického stavu11,12. Zůstává tedy mezera ve znalostech ohledně toho, jak nejlépe předvídat klinický pokles. Vzhledem k tomu, že primární patologií CF je nedostatek inzulinu, je rozumné extrapolovat, že měření funkce beta buněk by byly nejlepšími ukazateli výsledků u pacientů s CF. Typické zjednodušené metody hodnocení funkce beta buněk (jako je HOMA-B) využívají primárně měření nalačno, která jsou nevhodná u CF, kde se abnormality nalačno rozvíjejí po nástupu otevřeného CFRD a dlouho poté, co je stanoven klinický pokles.

Dr. Andrea Mari má rozsáhlé údaje ukazující účinnost jeho modelu při hodnocení citlivosti beta buněk na glukózu (schopnost beta buněk reagovat na změny koncentrace glukózy)7,13,14. Samotný OGTT má špatnou reprodukovatelnost, avšak citlivost beta buněk na glukózu, jak je měřena z často odebraných vzorků OGTT, má významně lepší reprodukovatelnost s variačním koeficientem kolem 15-20 %7,15. Tento model citlivosti beta buněk na glukózu je extrémně přesným parametrem pro hodnocení kontroly glukózy a bylo zjištěno, že je významným prediktorem pro rozvoj diabetu 1. a 2. typu u nediabetické a prediabetické populace. Tento model umožňuje také měření první fáze sekrece inzulínu (nazývaná „rychlostní citlivost“ – která je přímo srovnatelná s akutní inzulínovou odpovědí získanou ze zlatého standardu IVGTT)16. To je významné, protože ztráta první fáze sekrece inzulínu je počáteční abnormalitou v progresi do CFRD. Tento model je vysoce reprodukovatelný a byl také zkoumán podélně15,17 (viz obrázek 1).

Předběžná data – ostrůvkové a inkretinové hormony:

Dr. Larson Ode zasvětila svou kariéru pochopení původu dysglykémie u CF. Její práce převrátila předchozí dogma a zjistila, že až 39 % dětí s CF ve věku 3 měsíců až 5 let může mít dysglykémii18. Dosud však není známo, jaké základní mechanismy řídí dysglykémii u CF. V předchozím malém souboru dat (n=25 CF, n=9 kontrola) mělo 9 z 25 subjektů s CF dysglykémii (všechny kontroly byly normální). Uchovávaná krev byla testována na ostrůvkové a inkretinové hormony, aby se zjistil rozdíl mezi dětmi s dysglykémií a bez ní. Děti s CF s abnormální glukózovou tolerancí měly vyšší hladiny GIP (p<0,03) a trend k nižším hladinám GLP-1 ve srovnání s pacienty s normální CF (p=0,06). Všichni pacienti s CF měli abnormálně nízké hladiny PP (p<0,01). Hladiny glukagonu byly neinformativní (nepublikovaná data – viz obrázek 1). To znamená, že inkretinové a ostrůvkové hormony mohou hrát roli při dysglykémii u CF. K úplnému pochopení vzorců inkretinových a ostrůvkových hormonů u lidí s CF jsou však zapotřebí údaje z větších a starších kohort. Tento navrhovaný projekt založí biobanku, která umožní studium věkově podmíněné progrese v biomarkerech dysfunkce ostrůvků v rámci různorodé kohorty zahrnující velké věkové rozpětí subjektů. Hluboké porozumění typickým změnám funkce beta buněk pro CF s věkem, které tato kohorta prokáže, umožní výrazně zlepšit porozumění progresi dysglykémie u CF.

Zkušenosti s CGM:

Dr. Chan má v současné době grant CFFT Shwachman na zkoumání role CGM v CF. Také již dříve používala CGM v jiných studiích a zapsala více než 100 obézních mladých lidí, kteří podstoupili OGTT a nosili CGM, aby lépe porozuměla jednodušším měřením prediabetu a screeningu diabetu 2. typu u obézní dospívající populace19,20. Ačkoli její studie CGM v CF je v současné době aktivní, nábor bude brzy ukončen a nebude se překrývat s načasováním v této navrhované studii. Tento návrh s cílovým počtem 475 jedinců s CF nabízí bezprecedentní příležitost prohloubit naše porozumění CGM a jeho vztahu k navrhovanému modelu a jeho novým výsledkům specifickým pro věk a pohlaví.

Zkušenosti s výzkumem hypoglykémie:

Dr. Moheet má rozsáhlé zkušenosti s výzkumem diabetu se speciálními odbornými znalostmi v testech zlatého standardu pro funkci beta buněk (inzulinové svorkové studie). Jeho výzkum využívá metody relevantní pro studium metabolismu in vivo u lidských subjektů, zejména použití metodologií hyperglykemických a hypoglykemických inzulínových svorek. Jeho výzkum zkoumal základní patogenezi ve vývoji defektní kontraregulační reakce na hypoglykémii u lidí s diabetem 1. typu. Podstatné pozadí Dr. Moheeta ve výzkumu hypoglykémie by bylo při provádění této studie neocenitelné.

Hladovění a reaktivní hypoglykémie po jídle jsou běžné u pacientů s CF bez diabetu21. Reaktivní hypoglykémie může být u některých pacientů s CF obzvláště obtěžující a obtížně zvládnutelná. Hypoglykémie byla také často hlášena během OGTT u CF s hlášenými četnostmi pro 3hodinové OGTT mezi 15–59 %22,23. Nedávný systematický přehled však poznamenal, že patofyziologie není dostatečně pochopena, a zdůraznil potřebu vysoce kvalitních studií, které by zkoumaly možné etiologie, které jsou základem reaktivní hypoglykémie u CF24. Tato navrhovaná studie se bude zabývat touto mezerou ve znalostech vyhodnocením kontraregulačních hormonů včetně glukagonu a katecholaminů během hypoglykémie a posouzením symptomatické hypoglykémie prostřednictvím validovaného a strukturovaného dotazníku25. Tato navrhovaná studie poskytne bezprecedentní příležitost prozkoumat možné mechanismy, které jsou základem reaktivní hypoglykémie u CF u velké kohorty pacientů

Předběžné údaje – složení těla:

Dr. Granados již dříve zkoumal souvislost mezi složením těla (% tuku a LBM podle DXA) a měřením inzulinové rezistence (HOMA-IR), citlivosti na inzulin (Insulin Sensitivity Index – Matsuda (ISIMatsuda)) a sekrece inzulinu β-buněk (Φcelková ) u 15 pacientů s CF s pankreatickou insuficiencí mezi 12-24 lety (průměrný BMI 19,5 ± 2,87 kg/m2). Její předběžná data ukázala, že inzulinová rezistence významně koreluje s hmotnostním z-skóre (HOMA-IR:r=0,48, p=0,003) a ISImatsuda (r=-0,46, p=0,004). Zjistila také pozitivní korelaci mezi Φtotal, (měření sekrece inzulínu v reakci na glukózu) a % tuku u subjektů s CF bez diabetu (r=0,69, p=0,004). Navíc u lidí s nižším % tuku a vyšším LBM byl trend mít lepší citlivost na inzulín (ISIMatsuda:r=-0,45, p=0,09).

D. Experimentální design a metody:

Studijní hypotéza Primární hypotéza: Podobně jako standardní růstové grafy s průměry a percentily na základě směrodatné odchylky, hodnoty fsOGTT (glukóza, inzulín, c-peptid) a výsledné odhady funkce β-buněk odvozené od fsOGTT (citlivost beta buněk na glukózu, orální citlivost na glukózový inzulín) bude klesat v závislosti na věku a pohlaví, které bude konzistentní u pacientů s CF ve čtyřech různých centrech v USA.

Sekundární hypotéza: Hodnoty inzulinu, glukózy a C-peptidu odvozené od fsOGTT v kombinaci s odhady funkce β-buněk (senzitivita beta buněk na glukózu, OGIS) budou korelovat s důležitými markery klinického stavu (FEV-1, BMI Z skóre , počet plicních exacerbací za posledních 12 měsíců) v závislosti na věku a pohlaví.

Průzkumné hypotézy:

Hypotéza 3a: Nižší beztuková tělesná hmota, jak byla hodnocena pomocí DXA, je spojena s citlivostí beta buněk na glukózu v závislosti na věku a pohlaví.

Hypotéza 3b: Vzorce sekrece ostrůvkového hormonu a inkretinů jsou závislé na věku a pohlaví a glukózová citlivost β buněk bude korelovat s PP a GIP, ale ne s glukagonem a GLP-1 Hypotéza 3c: Snížená glukózová citlivost β buněk je spojena s vyšší mírou reaktivních reakcí hypoglykémie s nepřiměřenou odpovědí katecholaminů a glukagonů během OGTT.

Hypotéza 3d: Identifikovatelné míry CGM (např. Vrchol glukózy, doba strávená >200 mg/dl, standardní odchylka) bude korelovat s citlivostí na glukózu β buněk způsobem závislým na věku a pohlaví.

Screening a zápis Centrum CF na University of Minnesota má 332 pacientů s CF způsobilých pro tuto studii. University of Iowa má 144 způsobilých předmětů. Pediatrické centrum University of Colorado má přibližně 225 způsobilých subjektů. Washingtonská univerzita v St. Louis má 236 způsobilých předmětů. Zkušenosti z náboru předchozích studií založených na OGTT v těchto centrech naznačují, že 40–60 % subjektů s CF bude souhlasit s účastí. Očekává se, že se zúčastní přibližně 160 subjektů/rok, společně na všech pracovištích, aby bylo dosaženo celkového počtu 475 subjektů do konce 3 let studie.

Experimentální design a postupy:

Studijní hodnocení:

Údaje shromážděné při registraci

1) Věk, pohlaví, datum narození, diagnóza CF (výsledky genotypu a potu), případná diagnóza diabetes mellitus, datum poslední hospitalizace pro plicní exacerbaci a zahájení jakékoli systémové terapie steroidy. Shromáždíme seznam aktuálních a aktivních léků subjektu od rodiče (pokud je subjekt nezletilý) nebo od subjektu (pokud je subjektem dospělý).

2) Lékařské záznamy: bude získán souhlas s vyžádáním následujících informací z klinických a nemocničních lékařských záznamů pro účastníky, s povolením HIPAA:

A. léky, výsledky testů plicních funkcí, konkrétně nejnovější předpovězené FEV1 %, FVC, genotyp CFTR a výsledky testování sedadla. anamnéza užívání steroidů, počet hospitalizací pro plicní exacerbaci v posledním roce (definovaný jako příjem pro iv antibiotika nebo steroidní terapii), fekální elastáza Údaje budou shromažďovány při studijních návštěvách

Často odebraný 3hodinový orální glukózový toleranční test (OGTT):

1. Subjekty jsou přijímány do jednotky klinického výzkumu
2. Stav nalačno je potvrzen
3. Pro sekvenční laboratorní losování se umístí IV. Místní lidokainový krém bude poskytnut pro místo zahájení IV, pokud o to rodina požádá.
4. Orální roztok glukózy (Glucola) v dávce 1,75 g/kg se podává ústy v čase nula.

5. Inzulin, glukóza, c-peptid a další sérum k uchování budou získány po 0, 15, 30, 60, 90, 120, 150 a 180 minutách. Další krev bude uložena pro budoucí testování.

   1. Každý vzorek by neměl vyžadovat více než 1-2 polévkové lžíce krve. Množství vzorku bude založeno na hmotnosti pacienta a nepřekročí 3 ml/kg/den celkové odebrané krve.
   2. Vzorky budou zpracovány, dávkovány a odeslány na University of Iowa k analýze.
   3. Pokud dojde ke ztrátě IV kdykoli během studie, požádáme rodinu o povolení získat vzorky píchnutím prstem nebo patou.

6. Antropometrie při každé návštěvě.

   A. Výška na stadiometru pro všechny předměty b. Hmotnost na stojaté váze pro všechny předměty. C. Tato měření se mají použít k výpočtu BMI a BMI z-skóre, pokud je to možné.

7. Další sběr dat.

   1. Seznam léků bude zaznamenán a ověřen u subjektu/rodičů na začátku každé návštěvy.
   2. Z lékařského záznamu:

   i. Poslední hospitalizace, počet hospitalizací v uplynulém roce ii. Poslední systémová léčba steroidy (pokud vůbec někdy) iii. Poslední užití antidiabetik (pokud vůbec) iv. Diagnóza diabetu- ano/ne, datum v. Hodnoty fekální elastázy vi. CFTR mutace vii. Výsledky testu potu viii. Použití korektorů/modulátorů CFTR (pokud existují) – Počáteční datum Podskupina subjektů dokončí další hodnocení hodnotící explorativní koncové body. Cílem je, aby se těchto protokolů zúčastnila 1/3 z celkového počtu subjektů.

DXA sken 1) DXA sken bude získán v den studijní návštěvy nebo během 2 týdnů z OGTT.

A. Ke standardizaci výsledků CGM budou použity stroje Hologic Inc. (Bedford, MA, USA).

1) Zaslepený CGM Freestyle LibrePro (Abbott Diabetes Care Inc) bude umístěn na zadní část paže. Účastníci budou požádáni, aby nosili CGMS po dobu až 10 dnů.

1. CGMS nevyžaduje kalibraci, ale účastníci budou požádáni, aby nenosili monitor ve vodě hlubší než tři stopy, nebo aby jej ponechávali ponořený déle než 30 minut.
2. Účastníci budou také poučeni, aby neměnili žádné ze svých současných stravovacích návyků nebo aktivit, aby byly shromažďovány údaje o glykémii ve volném čase.
3. Budou také požádáni, aby vyplnili jednoduchý protokol o své aktivitě a příjmu potravy.
4. Subjektům bude dána možnost osobně vrátit CGM a záznamový list do CTRC nebo jim bude poskytnuta orazítkovaná obálka s vlastní adresou pro vrácení zařízení a záznamového listu po ukončení období záznamu.
5. Pomocí softwaru, který je připojen k záznamníku CGM, budou pro každý subjekt generovány zprávy obsahující souhrn údajů o glykémii ze senzoru.
6. Tyto výsledky budou převedeny na nezpracovaná data v excelové tabulce a uloženy na heslem chráněném, zabezpečeném síťovém serveru prostřednictvím místního počítače v uzamčené kanceláři, do které budou mít přístup pouze vyšetřovatelé.

i. Tato nezpracovaná data zahrnují hodnoty glykémie ze senzoru získané každých 15 minut během nošení zařízení.

G. Zkontrolujeme trasování CGM, abychom analyzovali další proměnné, včetně: i. plocha pod celkovou křivkou CGM ii. počet exkurzí >140 mg/dl a >200 mg/dl iii. maximální glykémie ze senzoru po prvním jídle dne, maximální glykémie ze senzoru, průměr glykémie ze senzoru iv. standardní odchylka a další míry glykemické variability v. Míry hypoglykémie konkrétně % času stráveného <60 a <70 mg/dl. Systém Freestyle Libre Pro byl schválen v Evropě a byl studován u dětí ve věku 4 let po dobu až 14 dnů nošení senzoru. Nezobrazuje informace o glykémii v reálném čase a účastníci během studie nebudou mít možnost zobrazit data CGMS. Tento CGM nevyžaduje žádnou kalibraci ani školení a lze jej snadno odstranit a vrátit Laboratorní testy

1. Testy klinického výzkumu

   A. Glukóza v plazmě se provádí pomocí analyzátoru YSI, aby se výsledky rychle vrátily subjektům, všechny ostatní testy jsou dávkové.

2. Výzkumné testy provede paní Yi v průtokovém jádru na University of Iowa, všechny testy kromě glukózy používají stejnou platformu, která umožňuje přesné měření více vzorků na mikrolitrech krve. GLP-1 (aktivní & celkem), GIP, PP, glukagon, c-peptid, inzulín i. HMHEMAG-34K | MILLIPLEX luminex xMAP Magnetický panel s lidským metabolickým hormonem - Metabolism Multiplex Assay (Millipore Sigma, Burlington, MA, USA) ii. V panelu není vidět žádná zkřížená reaktivita, testy vykazují vysokou výtěžnost (97-105 %), dobrou přesnost (všechny testy mají variační koeficient uvnitř testu <10 % a koeficient variace mezi testy <15 %, kromě GLP -1 celkem, který má mezitestový variační koeficient <20 %) iii. Inzulín a c-peptid jsou měřeny také na této platformě, aby bylo možné porovnávat kontrolu kvality s klinickými vzorky

Odhady velikosti vzorku / výpočet výkonu:

Primární výsledky:

Za použití 187 subjektů z jediného italského centra italská skupina již dříve definovala kvantil 75,0 pro různé parametry glukózové tolerance a funkce beta buněk, včetně citlivosti beta buněk na glukózu. Vzhledem k tomu, že cílem tohoto projektu je vyvinout 5. až 95. kvantil, byla vzhledem ke klinické relevanci hraničních hodnot založených na 5. a 95. percentilu vypočtena velikost vzorku pro tento projekt pro odhad 95,0 kvantilu kovariátu závislého. kvantilová křivka s předem specifikovanou přesností. Primární výslednou proměnnou kvantilové křivky je citlivost beta-buněk na glukózu a predikční proměnnou je věk. Na základě dostupných dat 4 očekáváme lineární vztah mezi senzitivitou beta-buněk na glukózu a věkem bez heteroskedasticity. Proto minimální velikost vzorku potřebná k odhadu 95,0 kvantilu citlivosti beta-buněk na glukózu - pro věk s 90% pravděpodobností, že bude ležet mezi 90,5 a 97,4 kvantily (s ohledem na symetrickou toleranci hodnocenou na logitové stupnici) je 475 předměty31. Pro ostatní výsledky (glukóza, inzulín, c-peptid) je minimální velikost vzorku menší než 475 subjektů potřebných pro primární cílový bod citlivosti beta buněk na glukózu. Centrum pro CF University of Minnesota má 332 pacientů s CF způsobilých pro tuto studii. University of Iowa má 144 způsobilých předmětů. Centrum pediatrické CF University of Colorado má 225 způsobilých subjektů. Washingtonská univerzita v St. Louis má 236 způsobilých předmětů. Historicky jsme na University of Minnesota a University of Iowa měli vynikající počty zapsaných subjektů s CF do studií CFRD, takže očekáváme, že se během 3 let trvání studie někdy zapíše asi 40–60 % způsobilých subjektů.

Hodnocení bezpečnosti a kontrola kvality Pro tento projekt bude zaveden formální DSMP. Viz přiložený DSMP. Nebude potřeba provádět analýzu účinnosti, protože se nejedná o intervenční studii.