NGF, TrKA,p75NTR u mužů s ED a diabetem s nebo bez RS (ED)

Erekce penisu je komplexní jev, který předpokládá jemnou a koordinovanou rovnováhu mezi neurologickým, vaskulárním a hladkým svalovým kompartmentem. Zahrnuje dilataci tepen, relaxaci trabekulárního hladkého svalstva a aktivaci korporálního venookluzivního mechanismu. Erektilní dysfunkce (ED) je definována jako přetrvávající neschopnost dosáhnout a udržet erekci dostatečnou k umožnění uspokojivého sexuálního výkonu. Erektilní dysfunkce může ovlivnit fyzické a psychosociální zdraví a může mít významný dopad na kvalitu života (QoL) pacientů a jejich partnera. Přibývá důkazů, že ED může být časným projevem onemocnění koronárních tepen a periferních cév. Erektilní dysfunkce by neměla být vnímána pouze jako problém QoL, ale také jako potenciální varovný signál kardiovaskulárního onemocnění (CVD). Nejvýznamnější organické příčiny ED jsou cévní, metabolické, neurogenní, hormonální a farmakologické. 35-90 % diabetických pacientů trpí ED. V posledním uvedeném metabolickém onemocnění Dai et al. identifikovali jako možnou etiologii ED nedostatek interakce mezi nervovým růstovým faktorem (NGF) a jeho receptorem TrKA, což má za následek znatelné zvýšení hladin NGF v corpora cavernosa11. Dále Hou a kol. prokázali, že aktivace systému NGF/TrKA v corpora cavernosa (zvýšená exprese NGF a TrKA mRNA a upregulace c-raf, ERK1/2 a CREB1) zlepšuje erektilní funkci u myší s ED a diabetes mellitus.

Cíle této studie jsou:

• Primárním výstupem je vyhodnocení systémové plazmatické koncentrace a koncentrace NGF v kavernózních tělesech penisu u pacientů s ED a diabetem s metabolickým syndromem nebo bez něj (a); (b) exprese jeho TrKA a p75NTR receptorů v mononukleárních buňkách odebraných z periferní krve a v kavernózních tělech penisu.
• Sekundárním výsledkem je vyhodnocení, zda hladiny NGF a jeho receptorů v mononukleárních buňkách mohou korelovat s klinickým stagingem ED.

Prospektivní pilotní studie. Bude přijato 12 pacientů s diagnózou ED s diabetem s nebo bez metabolického syndromu ( Mets ) ve věku mezi 18 a 65 lety. Každý pacient podstoupí vstupní vyšetření, které zahrnuje: patologickou a farmakologickou anamnézu, lokální objektivní vyšetření a sestavení validovaného dotazníku International Index of Erectile Function Questionnaire short form (IIEF5).

Na základě skóre IIEF5 budou pacienti rozděleni do 4 skupin (každá z 10 pacientů):

1. mírná ED (skóre 17-21)
2. mírná až středně závažná ED (skóre 12-16)
3. Střední ED (skóre 8–11)
4. Těžká ED (skóre 5-7)

Studie in vivo:

Každý pacient bude poté postupně odeslán na:

1. Odběr periferní krve z rutinní kubitální žíly pro dávkování hormonů Folikulostimulační hormon (FSH), luteinizační hormon (LH), BEZ TESTOSTERONU A CELKOVÁ, ESTRADIOL, PROLAKTIN) a metabolické hodnocení (celkový HDL cholesterol, LDH, glykémie, lipidemický rámec ); a alikvotní část bude použita pro studii in vitro
2. Introvertní kavernózní infiltrace prostaglandinu E1 k dosažení erekce (Aprostadil);
3. Vzorek krve jak z corpus cavernosum, tak z kubitální žíly, jakmile je dosaženo erekce

Vitro studie Pro ověření možné základní interakce prostaglandinu E1 na koncentraci NGF uvolněného v médiu a na expresi jeho receptorů bude provedena in vitro studie s použitím mononukleárních buněk izolovaných z periferní krve (PBMC) získaných z buffy coat ošetřených s prostaglandinem E1

Hodnocení hladin NGF a cytokinů Část každého vzorku krve a média kondicionovaného PBMC bude použita pro enzymatický imunotest hladin NGF a pro a protizánětlivých cytokinů (TNF alfa a IL-10).

Analýza exprese TrKA a p75NTR receptorů a intracelulárních cytokinů v PBMC.

Zbývající část každého vzorku krve a PBMC experimentu in vitro bude použita pro cytofluorimetrické hodnocení exprese TrKA, p75NTR a pro a protizánětlivých cytokinů a reaktivních forem kyslíku.

Hodnocení hladin NGF a jeho receptorů v různých stupních závažnosti ED Hladiny NGF a jeho receptorů budou stratifikovány do 4 skupin klinické závažnosti ED.

Studie in vitro Studie in vitro bude provedena s použitím PBMC získaných z buffy coat zdravých subjektů léčených prostaglandinem E1.

Statistická analýza výsledků Údaje získané během studie budou ošetřeny vhodnými statistickými testy. Výsledky budou vyjádřeny jako průměr ± standardní chyba a porovnány vhodnými statistickými testy (ANOVA nebo případně neparametrické).

Očekávané výsledky Od této studie očekáváme získání více informací o dopadu a významu dráhy NGF/TrKA/p75NTR na DE u pacientů s Mets. Dále očekáváme korelaci mezi plazmatickými hladinami NGF a jeho receptorů ve vztahu ke klinické závažnosti ED.