NGF, TrKA, p75NTR negli uomini con ED e diabete con o senza SM (ED)

L'erezione del pene è un fenomeno complesso che implica un equilibrio delicato e coordinato tra il compartimento neurologico, vascolare e della muscolatura liscia. Comprende la dilatazione arteriosa, il rilassamento della muscolatura liscia trabecolare e l'attivazione del meccanismo veno-occlusivo corporeo. La disfunzione erettile (DE) è definita come la persistente incapacità di raggiungere e mantenere un'erezione sufficiente a consentire prestazioni sessuali soddisfacenti. La disfunzione erettile può influire sulla salute fisica e psicosociale e può avere un impatto significativo sulla qualità della vita (QoL) dei malati e dei loro partner. Vi è una crescente evidenza che la disfunzione erettile possa essere una manifestazione precoce dell'arteria coronarica e della malattia vascolare periferica. La disfunzione erettile non deve essere considerata solo come un problema di QoL, ma anche come un potenziale segnale di allarme di malattie cardiovascolari (CVD). Le cause organiche più importanti di ED sono vascolari, metaboliche, neurogeniche, ormonali e farmacologiche. Il 35-90% dei pazienti diabetici soffre di ED In quest'ultima malattia metabolica, Dai et al. hanno identificato come possibile eziologia della disfunzione erettile una mancanza di interazione tra il fattore di crescita nervoso (NGF) e il suo recettore TrKA, con conseguente notevole aumento dei livelli di NGF nei corpi cavernosi11. Inoltre, Hou et al. hanno dimostrato che l'attivazione del sistema NGF/TrKA nei corpi cavernosi (aumento dell'espressione di NGF e TrKA mRNA e sovraregolazione di c-raf, ERK1/2 e CREB1) migliora la funzione erettile nei topi con DE e diabete mellito.

Gli obiettivi di questo studio sono:

• L'esito primario è valutare la concentrazione plasmatica sistemica e la concentrazione nei corpi cavernosi del pene di NGF in pazienti con DE e diabete con o senza sindrome metabolica (a); (b) l'espressione dei suoi recettori TrKA e p75NTR nelle cellule mononucleate prelevate dal sangue periferico e nei corpi cavernosi del pene.
• L'esito secondario è valutare se i livelli di NGF e dei suoi recettori nelle cellule mononucleate possono correlarsi con la stadiazione clinica dell'ED.

Studio pilota prospettico. Saranno reclutati 12 pazienti con diagnosi di DE con diabete con o senza sindrome metabolica ( Mets ) di età compresa tra 18 e 65 anni. Ogni paziente verrà sottoposto ad una valutazione iniziale che comprende: l'anamnesi patologica e farmacologica, l'esame obiettivo locale e la compilazione del questionario validato International Index of Erectile Function Questionnaire short form (IIEF5).

Sulla base del punteggio IIEF5, i pazienti saranno divisi in 4 gruppi (ciascuno di 10 pazienti):

1. ED lieve (punteggio 17-21)
2. ED da lieve a moderata (punteggio 12-16)
3. DE moderata (punteggio 8-11)
4. DE grave (punteggio 5-7)

Studio in vivo:

Ogni paziente sarà quindi sottoposto in successione a:

1. Prelievo di sangue periferico dalla vena cubitale di routine per dosaggio ormonale Ormone follicolo-stimolante (FSH), Ormone luteinizzante (LH), TESTOSTERONE LIBERO E TOTALE, ESTRADIOLO, PROLATTINA) e valutazione metabolica (colesterolo totale HDL, LDH, glicemia, quadro lipidico ); e un'aliquota sarà utilizzata per lo studio in vitro
2. Un'infiltrazione cavernosa introversa di Prostaglandina E1 per raggiungere l'erezione (Aprostadil);
3. Un campione di sangue prelevato sia dal corpo cavernoso che dalla vena cubitale, una volta raggiunta l'erezione

Studio in vitro Per verificare una possibile interazione basale della prostaglandina E1 sulla concentrazione di NGF rilasciato nel terreno e sull'espressione dei suoi recettori, sarà condotto uno studio in vitro utilizzando cellule mononucleate isolate da sangue periferico (PBMC) ottenute da buffy coat trattato con prostaglandina E1

Valutazione dei livelli di NGF e di citochine Una porzione di ciascun campione di sangue e terreno condizionato da PBMC sarà utilizzata per il dosaggio immunoenzimatico dei livelli di NGF e di citochine pro e antinfiammatorie (TNF alfa e IL-10).

Analisi dell'espressione dei recettori TrKA e p75NTR e delle citochine intracellulari nelle PBMC.

La restante parte di ciascun campione di sangue e PBMC dell'esperimento in vitro sarà utilizzata per la valutazione citofluorimetrica dell'espressione di TrKA, p75NTR e delle citochine pro e antinfiammatorie e delle specie reattive dell'ossigeno

Valutazione dei livelli di NGF e dei suoi recettori nei diversi gradi di gravità della DEI livelli di NGF e dei suoi recettori saranno stratificati nei 4 gruppi di gravità clinica della DE

Studio in vitro Sarà condotto uno studio in vitro utilizzando PBMC ottenuto da buffy coat di soggetti sani trattati con prostaglandina E1.

Analisi statistica dei risultati I dati ottenuti durante lo studio saranno trattati con opportuni test statistici. I risultati saranno espressi in termini di media ± errore standard e confrontati mediante opportuni test statistici (ANOVA o non parametrici se del caso).

Risultati attesi Dal presente studio ci aspettiamo di ottenere maggiori informazioni sull'impatto e la rilevanza del pathway NGF/TrKA/p75NTR sulla DE nei pazienti con Mets. Inoltre, ci aspettiamo una correlazione tra i livelli plasmatici di NGF e dei suoi recettori in relazione alla gravità clinica della DE.