Sikkerheds- og effektivitetsundersøgelse af antisense oligonukleotider i Duchenne muskeldystrofi

Duchenne muskeldystrofi (DMD) er den mest almindelige form for muskeldystrofi, der rammer 1 ud af hver 3500 levende mandlige fødsler. Sygdommen er karakteriseret ved alvorlig muskelsvind og -svaghed, som bliver klinisk tydelig i alderen 3 til 5 år. Berørte personer holder op med at gå ved 12 års alderen og overlever normalt ikke ud over 20 år, medmindre de bliver ventileret. Generelt er DMD forårsaget af mutationer, der forstyrrer læserammen, hvilket fører til manglende ekspression af dystrofin.

Nyere videnskabelig forskning har ført til den tro, at DMD kan behandles ved at korrigere den genetiske fejl i dystrofingenet, som forårsager DMD. De fleste børn med DMD har en deletion, det vil sige en mutation, som fjerner en del af dystrofingenet. Der er udviklet en ny teknik, der anvender antisense-teknologi til at springe over et specifikt exon og omgå defekt genetisk materiale, således at der kan produceres funktionelt dystrofin. Disse antisense-oligonukleotider (AON) målretter og bypasser defekt genetisk materiale og tillader produktion af funktionelt protein. Dette er med succes blevet demonstreret i dyrkede humane DMD-celler og i muse- og hunde-DMD-modeller. Den genoprettede produktion af dystrofin forudsiges at reducere muskelpatologien betydeligt.

I den tidlige del af undersøgelsen sammenlignede vi forskellige antisense-oligomerers kemiske modifikation og konkluderede, at morpholino-rygraden er signifikant overlegen, når den administreres til skeletmuskulatur sammenlignet med en række andre typer antisense.

Målet med denne fase I/II kliniske undersøgelse er at vurdere effektiviteten og sikkerheden af ​​AVI-4658, en morpholino-antisense rettet mod exon 51, hos DMD-individer med deletioner, som ville have gavn af at springe exon 51 over.

Det foreslåede arbejde er præsenteret i 4 afsnit, der beskriver de vigtigste tilgange.

Studere design

Dette IM-forsøg med dosiseskalering vil involvere op til 9 forsøgspersoner, opdelt i tre grupper, på hver tre forsøgspersoner. Patienter i gruppe 1 vil blive rekrutteret sekventielt, mens patienter i gruppe 2 og 3 vil blive rekrutteret serielt.

• Gruppe 1 (3 patienter) vil modtage intramuskulær administration af en lav koncentration af undersøgelseslægemiddel (extensor digitorum brevis muskel, EDB) og vil gennemgå en muskelbiopsi mellem dag 14 og 28 efter intramuskulær (IM) administration af AVI-4658.
• Gruppe 2 (3 patienter) vil gennemgå en identisk procedure, men vil modtage en mellemdosis af AVI-4658.
• Gruppe 3 (3 patienter) vil blive rekrutteret til at modtage den højeste dosis af AVI-4658, men kun hvis resultaterne i de første 2 kohorte af patienter viser manglende effekt af de lavere doser. Der kan tilmeldes op til yderligere 3 fag i kohorte 1 eller 2, hvis kohorte 3 ikke er tilmeldt.

Screening

• En fysisk undersøgelse, herunder kropsvægt, højde, armspænd, neuromuskulær undersøgelse og vitale tegn (blodtryk, puls, respiration og temperatur).
• Neuropsykiatrisk vurdering af både forsøgsperson og familie.
• Molekylær genetisk på blodprøve og dystrofinanalyse af original muskelbiopsi opnået ved diagnose.
• Muskel-MR-scanninger af underekstremiteterne for at vurdere bevarelsen af ​​den muskel, der skal målrettes med injektionen af ​​AON.
• Biokemisk (blod) og urinundersøgelse, der inkluderer standard biokemi og hæmatologi (fuldt blodtal; koagulationsscreening; leverfunktionstest; serum Ig; proteinelektroforese; inflammatoriske markører; kreatininkinase; gamma glutamyl transferase; urin biokemi).
• Kardiovaskulære vurderinger: EKG og hjerteekkokardiogram.
• Lungevurderinger: Forceret vitalkapacitet, overvågning af iltmætning natten over.
• Hudbiopsi til MyoD-transfektion.

Procedure

• Musklen der skal bruges er extensor digitorum brevis, en fodmuskel med meget lidt funktion hos børn med mobilitetsbesvær.
• Lokal injektion vil blive udført direkte gennem huden ved hjælp af en kombineret EMG-indføringskanyle. Mens proceduren kunne udføres under lokalbedøvelse; hvor det er muligt, vil det blive udført under generel anæstesi for at mindske lidelsen for forsøgspersonen. En hudtatovering med et 1 cm x 1 cm gitter med 2 streger imellem for at dele den i 9 mindre firkanter, vil blive brugt til at markere injektionsstedet præcist og til en efterfølgende muskelbiopsi.
• Det samlede volumen af ​​hver injektion vil være 100 μL indeholdende AVI-4658. Ni injektioner vil blive udført med 3 mm intervaller inde i 1 cm2 tatoveringen. Dybden af ​​injektionen vil blive omhyggeligt registreret.

Observation

• Patienter vil blive nøje overvåget inden for den kliniske forskningsfacilitet af udpeget plejepersonale, der er uddannet i forsøgsprotokollen og med erfaring i lignende fase I/II-studier.
• Den kliniske forskningsfacilitet har tæt adgang til intensivafdelingsfaciliteter i tilfælde af en uforudset bivirkning.

Opfølgning Dag 2 - Patienterne udskrives. Inden udskrivelsen vil der blive foretaget en kort fysisk undersøgelse og systemgennemgang.

Dag 3 - En yderligere kort fysisk undersøgelse og systemgennemgang inklusive undersøgelse af injektionsstederne og indberetning af eventuelle reaktioner. Denne undersøgelse kan udføres på den lokale operation eller på hospitalet hos den henvisende kliniker.

Dage 5, 7 - Kontakt med emnet og forhør dig om den aktuelle status.

Dag 14 til 28 - Forsøgspersonen er indlagt på hospitalet. Udfør systemvurdering (fysisk undersøgelse), kropsvægt og vitale tegn. Blod- og urinbiokemi vil blive gentaget derefter, ligesom åbne biopsier af begge injicerede muskler vil blive udført under generel eller lokalbedøvelse.

Dag 30 - Kontakt med emnet og forespørgsel om aktuel status.

Dag 60 - Kontakt emnet og forespørgsel om aktuel status.

Dag 120 - (Afsluttende besøg på hospitalet, hvor studielægemidlet blev indgivet). En kort fysisk undersøgelse og systemgennemgang vil blive udført.

MDEX konsortium.

De prækliniske undersøgelser blev udført af følgende grupper, som alle er medlemmer af MDEX-konsortiet:

1. Prof Francesco Muntoni, Dr. Jennifer Morgan. Dubowitz Neuromuscular Centre, Department of Peediatrics, Imperial College Hammersmith Hospital Campus, Du Cane Road London W12 ONN
2. Prof Dominic Wells; Dr. Kim Wells. Genmålgruppe, afdelingen for cellulær og molekylær neurovidenskab, afdelingen for neurovidenskab og mental sundhed, Imperial College, Charing Cross Campus, St. Dunstan's Road, London W6 8RP
3. Prof George Dickson; Dr Ian Graham. Genterapilaboratoriet, Center for Biomedicinske Videnskaber, Royal Holloway - University of London, Egham
4. Dr. Matthew Wood. Institut for Fysiologi, Anatomi og Genetik, South Parks Road, Oxford OX1 3QX, Storbritannien (UK).
5. Professor Steve Wilton. Experimental Molecular Medicine Group, Center for neuromuskulære og neurologiske lidelser, University of Western Australia

Yderligere KLINISK STØTTE bortset fra undersøgelsens embedsmænd vil blive leveret af:

Dubowitz Neuromuscular Centre, Department of Peediatrics, Hammersmith Hospital Campus, Du Cane Road, W12ONN: Prof Caroline Sewry; dr. Maria Kinali; Dr. Virginia Arechavala; Dr. Lucy Feng

Department of Surgery, St Mary's Hospital Trust, Imperial College Praed Street, London, W2 1NY: Mr. David Hunt

DNA Laboratory, Genetics Centre, 5th Floor Guy's Tower, Guy's Hospital London SE1 9RT: Dr. Steve Abbs

Akademisk enhed for børne- og ungdomspsykiatri, afdelingen for neurovidenskab og mental sundhed, Imperial College, St Mary's Campus, Norfolk Place, Paddington, London, W2 1PG: Professor Elena Garralda

MDEX Studiekoordinator:

Dr K Ganeshaguru, Dubowitz Neuromuscular Centre, Department of Peediatrics, Hammersmith Hospital Campus, Imperial College London, Du Cane Road, W12ONN, k.ganeshaguru@imperial.ac.uk