Betydningen af ​​mikrotubuli-cytoskelettet i oocytkompetence

Succesfuld befrugtning er stærkt afhængig af oocytternes iboende kvaliteter og er således afhængig af oocytmodningens pålidelighed. Nedsat oocytudviklingskompetence er en af ​​hovedårsagerne til det reducerede potentiale af in vitro-producerede embryoner. Cirka 8,6 % til 15 % af alle infertilitetspatienter producerer mindst én meiotisk inkompetent oocyt. Der er også ekstreme tilfælde af kvinder, der genererer oocytter med fuldstændig eller overvejende manglende fuldførelse af meiose. Disse oocytter standser og fuldfører ikke meiose som reaktion på eksogen endelig modning og udløsning af ægløsning. Forekomsten af ​​dette er ukendt, og i betragtning af kompleksiteten af ​​de processer, der er involveret i oocytmodning, har det været vanskeligt at definere de nøglebegivenheder eller morfologiske træk, der ligger til grund for oocytkompetence.

En stigende mængde beviser i de seneste år har antydet, at mikrotubulus (MT) cytoskelettet kan have en vigtig rolle i at give oocytten kompetencepotentiale. Ægmodning involverer store omlejringer af MT-cytoskelettet. Det er velkendt vigtigheden af ​​at danne en korrekt mikrotubulus meiotisk spindel til kromosomadskillelse ved meiose. Desuden ser MT'er ud til at være vigtige for omfordelingen af ​​forskellige organeller ved modning. Den nøjagtige funktionelle betydning af denne reorganisering og hvordan MT'er påvirker kompetence gennem repositionering af disse organeller er dog stort set ukendt.

Det vigtigste MT-organiseringscenter i eukaryote celler er centrosomet. Faktisk er centrosomer afgørende for dannelsen af ​​den mitotiske MT bipolære spindel. Interessant nok er disse strukturer elimineret i langt de fleste hunæg, og den meiotiske spindel indeholder ikke centrosomer. En nylig undersøgelse i laboratorieorganismen Drosophila melanogaster (frugtflue) viste, at afbrydelse af denne eliminering, hvilket tvang opretholdelsen af ​​centrosomer op til meiose, førte til kvindelig infertilitet. Både meiose og de første kernedelinger efter befrugtning viste unormale MT-spindler med unormal kromosomkongress. Dette viser, at korrekt rumlig MT-organisering sandsynligvis vil have vigtige implikationer på oocytkompetence.

Det langsigtede mål for denne forskergruppe er at analysere MT-cytoskelettet af oocytter fra kvinder, som ved assisteret reproduktionsteknologi genererer en høj procentdel af arresterede embryoner. For at gøre dette vil MT-egenskaberne af allerede tilgængelige overskud og ubrugte oocytter, som er forglasset og tilgængelige til forskningsformål, blive sammenlignet. Disse oocytter blev doneret fra cyklusser, hvor der blev set en lav (<20 % de befrugtede embryoner) og høj (>20 % de befrugtede embryoner) forekomst af standsede embryoner. Tidligere undersøgelser har antydet, at oocytvitrifikation og -opvarmning kan udsætte oocytten for en række fysiske og kemiske processer, som kan påvirke deres strukturelle og genomiske integritet. Derfor vil denne indledende gennemførlighedspilotundersøgelse undersøge potentielle strukturelle konsekvenser for oocytterne af den forglasningsprocedure, der anvendes i huset.

Det vil således blive vurderet, om Cryotop® - Open System inducerer specifikke MT-træk, som kan være fraværende i friske oocytter. I tilfælde af at både friske og forglasede oocytter (afledt af samme patient - søskendeæggeundersøgelse) viser en lignende MT cytoskelet organisation, vil en samling af kryokonserverede oocytter doneret til forskningsformål blive brugt i de planlagte fremtidige undersøgelser af denne forskergruppe.