Verisuonten tahrojen monikeskusfenotyyppi-genotyyppianalyysi hoidon optimoimiseksi optista koherenssitomografiaa käyttämällä

Verisuonitahrat, joita yleisesti kutsutaan "portviinin syntymämerkeiksi", ovat verisuonten poikkeavuuksia, jotka vaikuttavat 0,3–0,5 %:iin vastasyntyneistä; ne vaikuttavat elämänlaatuun pehmytkudosten liikakasvun, kyhmyjen ja elämää muuttavan, leimaavan muodonmuutoksen vuoksi. Laserhoito on hoidon standardi ja perustuu verisuonten fotokoagulaatioon. Silti alle 25 %:n raportoidaan tyhjenevän kokonaan; Syytä tähän vastauksen puutteeseen ymmärretään huonosti. Äskettäin selvitettiin näiden syntymämerkkien geneettiseksi syyksi mosaiikkimutaatiot geeneissä, jotka säätelevät solusyklin säätelyä, mukaan lukien GNAQ, GNA11, PiK3CA ja muut. Tämä löytö on muuttanut perustavanlaatuista ymmärrystämme niiden patofysiologiasta. Se tarjoaa molekulaarisen selityksen rajalliselle vasteelle laserille, koska näillä geeneillä on yhteiset onkogeeniset reitit, jotka johtavat synkroniseen, tiukasti säädeltyyn solujen lisääntymiseen ja kasvuun. Mikä tärkeintä, tämä löytö on avannut mahdollisuuden hyödyntää aktivoitujen myötävirtareittien farmakologista estoa tulosten parantamiseksi.

Tämän ehdotuksen tavoitteena on hyödyntää uutta kuvantamista verisuonimerkkien verisuoniston erojen tuomiseksi esiin genotyypityksen ja syvän, parillisen kliinisen fenotyypin määrityksen avulla sekä luoda kohdennettu laseralgoritmi genotyypin ja iän perusteella. Pienessä osaryhmässä potilaita, joilla on vahvistettu GNAQ/GNA11-genotyypitys, tutkijat käyttävät yksisoluista spatiaalista transkriptioprofiilia sairastuneesta kudoksesta lääkekehityksen edistämiseksi. Tämän projektin päätyttyä tutkijat ovat tarkentaneet genotyyppi-fenotyyppi-korrelaatioita, joita tehostavat kohdekudoksen uudet kuvantamiset, jotka selvittävät erot verisuoniston genotyypeittäin, mikä kaikki voivat nopeuttaa tarkkuuspohjaisia ​​hoitoja muodonmuutosten estämiseksi ja elämänlaadun parantamiseksi. Nämä tulokset tarjoavat kriittistä tietoa sellaisten kliinisten tutkimusten toteuttamiseen, jotka muuttavat hoitoparadigmoja yhdestä tehottomasta tuhoavasta hoitomuodosta kohdennettuun farmakologiseen interventioon yhdistettynä valoon.

Tutkijat olettavat, että portviinin syntymämerkkien poistaminen edellyttää: 1) tarkkuuteen perustuvaa lähestymistapaa, joka sisältää optimaalisen laserdoosimetrin, joka perustuu uuteen angiografiseen kuvantamiseen, ikään ja genotyyppeihin, ja 2) reittikohtaisesti kohdistettua farmakologista estoa aktivoiduille poluille, jotka saadaan selville alavirran efektorit. Pitkän aikavälin tavoitteena on siirtää hoitoparadigmat yhdestä tehottomasta tuhoavasta menetelmästä kohdennettuun laserlähteeseen yhdistettynä kohdennettuun paikalliseen hoitoon.

Tavoite 1: Korreloi genotyyppi kliinisen fenotyypin kanssa

• 1.1 Korreloi genotyyppi kattavan fenotyypityksen kanssa saatavilla olevissa kerroksissa A ja ositteissa B. Kun ositetaan osallistujien iän mukaan, hypoteesi on, että genotyyppi vaikuttaa suonen kokoon, ja suurempi solusyklin aktivaatio liittyy suurempaan mediaanisuoneen halkaisijaan ja syvyyteen MMA:lla.
• 1.2 Korreloi kliininen fenotyyppi dynaamisen optisen koherenssitomografian (OCT) kanssa kerroksissa A ja kerroksissa B. Tutkijat olettavat, että osallistujan ikä on suurin suonen mediaanikoon ja syvyyden ennustaja OCT:llä. Tutkijat odottavat näkevänsä monimuotoisuutta verisuoniston arkkitehtuurissa ja kuvioinnissa genotyypin perusteella. Oletuksena on, että GNAQ-mutaation saaneet potilaat osoittavat merkittävää verisuonten vääristymistä ja verisuonten putoamista ja verisuonten laajentumista, kuten on raportoitu okulaarisessa OCT-kirjallisuudessa potilailla, joilla on Sturge Weberin oireyhtymä.
• 1.3 Kerää sekä kvantitatiivisia että laadullisia tuloksia MMA-hoitoa saaneilta osallistujilta arvioidaksesi osallistujien kokemuksia tämän adjuvanttimenetelmän käyttämisestä Strata B:n hoidossa.
• 1.4 Integroi OCT-tiedot luodaksesi kohdennettu laseralgoritmi iän ja/tai genotyypin mukaan optimoidaksesi mutatoituneiden solujen fotokoagulaatiota B-kerroksessa.

Tavoite 2: Määritä kasvojen verisuonitahrojen molekyylimekanismi kehittääksesi reittispesifisiä hoitoja

• 2.1 12–15 osallistujalle, joilla on vahvistettuja GNAQ/GNA11-mutaatioita Strata A-, Strata B- tai Strata C:ssä, otetaan biopsiat sairastuneesta ja normaalista kudoksesta, kerätään veri- ja sylkinäytteitä puolueettoman spatiaalisen transkriptomisen analyysin helpottamiseksi Visium 10x -järjestelmällä.
• 2.2 Tunnista uudet alavirran genotyyppispesifiset kohteet puolueettoman spatiaalisen transkriptomisen analyysin avulla ja kohdennetulla arvioinnilla kolmesta reitistä, joille paikallisia inhibiittoreita kehitetään parhaillaan (PiK3CA, mTOR ja MEK/ERK).

Tavoite 3: Arvioi lasertuloksia PWS:n hoidossa (Strata B & C)

• 3.1 Kvantaalinen parannus osallistujien PWS:ssä kerrottuna laserin aloituksen iän, laserhoidon parametrien ja syvän kliinisen fenotyypin (anatominen sijainti, morfologia, OCT ja genotyyppi) mukaan. Tämän tavoitteen tarkoituksena on määrittää, johtaako laserin aikaisempi aloitus (ennen 1-vuotiaana) parempiin tuloksiin ja eroaako laserin vaste anatomisen sijainnin, morfologian/värin tai genotyypin mukaan. Oletuksena on, että aikaisempi hoito (alkaen ennen 2 vuoden ikää) parantaa puhdistumaa, joka on kestävämpi kuin niillä, jotka aloittavat laserin 2 vuoden iän jälkeen. Pienessä osaryhmässä potilaita, joilla on genotyypitys saatavilla, tutkijat tutkivat taudin vastetta laserille genotyypin ja sijainnin perusteella. Hypoteesi on, että PiK3CA:han liittyvä PWS reagoi paremmin kuin muut genotyypit (GNAQ, GNA11, RASA1, EPHB4) ja että sivupuoliset kasvot ja otsan keskipiste PWS ovat herkimmät anatomiset paikat.
• 3.2 Tutki potilaan ja/tai vanhempien raportoimia merkityksellisiä tuloksia laserilla hoidetuilla koehenkilöillä. Tutkijat erottelevat laservastaajien ja ei-vastaajien mukaan. Oletuksena on, että vastaajilla on parantunut QoL. Lopuksi tutkijat arvioivat ennakoivasti potilaiden raportoimia laserhoidon tuloksia, mukaan lukien potilastyytyväisyys, uusiutuminen ja toimenpiteeseen liittyvä kipu (kuten potilas ja/tai vanhempi ovat ilmoittaneet alle 7-vuotiaista lapsista). Tutkijat olettavat, että potilailla on korkea uusiutumisaste ja epämukavuus.

Tutkimus suunnittelu:

Kun tietoinen suostumus on saatu, tutkimusihotautilääkäri tekee visuaalisen ihotutkimuksen iholöydösten dokumentoimiseksi, ja tätä tutkimusta varten otetaan valokuvat sairastuneesta alueesta. Valokuvia käytetään genotyyppi-fenotyyppi-korrelaatioiden määrittämiseen ja ne jaetaan koordinoivan keskuksen kanssa.

Valokuvat tallennetaan sähköisesti turvallisella HIPAA-yhteensopivalla tavalla kunkin sivuston käytäntöjen mukaisesti.

Ilmoittautumishetkellä tai myöhemmällä käynnillä, mutta vain kerran tutkimukseen osallistumisen aikana, koehenkilöt voivat suostua toimittamaan minkä tahansa seuraavista ei-lääketieteellisesti tarpeellisista näytteistä geneettisiä tutkimuksia varten: verinäyte, sylkinäyte, iholävistysbiopsia (normaali iho) tai vahingoittunut iho), kirurgiset kudosnäytteet, parafiiniin upotetut kudosnäytteet (aiemmista leikkauksista). Näiden näytteiden kerääminen on valinnaista.

Ilmoittautumisen yhteydessä osallistujat sijoitetaan Strata A - kertaluonteisiin OCT-mittauksiin tai Strata B -sarjaan OCT-mittauksiin, jotka tehdään tavallisen hoitolaserhoidon yhteydessä, tai Strata C -sarjaarviointiin, jossa on vakiohoitolaserhoito ilman käyttöä. OCT.

Osallistujat, jotka jatkavat Strata A:lle, saavat kertaluontoiset OCT-mittaukset verisuonitahroistaan, jos he eivät halua tai eivät ole oikeutettuja verisuonivärinsä standardinmukaiseen laserhoitoon tai he eivät ole aiemmin käyneet läpi vaskulaarista värjäytymistään. Strata A:n indikaatio on, että jotkut potilaat eivät halua saada laserhoitoa, varsinkin jos heitä on aiemmin käsitelty laajasti laserilla tai jos heillä on vaaleanpunainen verisuonen tahra, joka on pysynyt vakaana. Osallistujia, jotka siirtyvät Strata C:hen, hoidetaan laserilla standardinmukaista hoitoa varten, ja heitä seurataan ilman sarjasarjan OCT:tä.

Osallistujille, jotka jatkavat Strata B:lle, suoritetaan sarja OCT-mittauksia verisuonitahroistaan ​​ennen standardinmukaisen laserhoidon aloittamista. OCT suoritetaan ennen jokaista hoitolaserhoitoa, jos osallistuja on ilmoittautumisen yhteydessä valinnut tavallisen hoitolaserhoidon verisuonitahrojen hoidoksi.

Osallistujat, jotka ovat ilmoittautuneet kerrokseen A ja joille tehdään kertaluonteinen OCT-mittaus, voivat siirtyä kerrokseen B, jos he myöhemmin päättävät suorittaa tavallisen hoitolaserhoidon verisuonivärilleen. Nämä osallistujat voivat silti osallistua yllä mainittuihin näytekokoelmiin vain kerran osallistumisensa aikana. Siirtymistä kerroksesta A kerrokseen B ei pidetä toisena ilmoittautumisena.

Kaikki osallistujat jatkavat tutkimukseen, kunnes tutkimus on suljettu. Osallistujat voivat suorittaa näytekeräyksiä millä tahansa vierailulla tutkimuksen aikana.

Osallistujien kliinistä fenotyyppiä tehostetaan käyttämällä dynaamista OCT:tä verisuonten keskimääräisen halkaisijan ja syvyyden karakterisoimiseksi. OCT on ei-invasiivinen, ihospesifinen tekniikka, joka mahdollistaa verisuonen tilahalkaisijan, verisuonten tiheyden ja syvyyden nopean tunnistamisen skannatulla alueella. Se on käytännössä kuin ultraäänianturin asettamista osallistujan iholle. Anturi on kooltaan 6 x 6 mm ja 60 sekunnin sisällä sijoituksesta antaa yleisimmän (tila) havaitun verisuonen halkaisijan sekä verisuonipunoksen syvyyden. MMA:n tulee olla kivuton ja mahdollisimman vähäinen riski osallistujalle.

Strata B:n osallistujille OCT suoritetaan lähtötilanteessa ja ennen jokaista hoitolaserhoitoa. Tutkimuslääkäri päättää MMA-sijoituksen valinnan anatomisista maamerkeistä tavoitteenaan kuvata tahran näkyvin alue. Osalla osallistujia OCT-mittauksia tehdään myös standardinmukaisen laserhoidon jälkeen. Tässä alajoukossa valittavat anatomiset maamerkit päättää tutkimuslääkäri; tahran vaalein alue kuvataan myös verisuonen halkaisijan välisten kontrastien mukaan, koska tämä vaikuttaisi optimaalisten laserasetusten valintaan tahran eri alueilla. Hoitava lääkäri määrittää verisuonivärjäyksen koon perusteella niiden alueiden lukumäärän, joille OCT suoritetaan verisuonitahralle. Hoitolaserhoidon standardien muutettuja laserasetuksia ohjataan käyttämällä valikoivan fototermolyysin teoriaa laserin optimaalisen pulssin keston määrittämiseksi OCT-mittauksen perusteella. Tämä noudattaa hyväksyttäviä hoitostandardeja, ja se on viime kädessä laserkirurgin harkinnan varassa. Tutkimuslääkäri pyrkii myös mittaamaan samat alueet ennen jokaista käyntiä sillä odotuksella, että tahran koko todennäköisesti vaihtelee verisuonitahrojen hoidon erottelukyvyn mukaan.

Strata B:n osallistujille osallistuja ja/tai 0–17-vuotiaiden osallistujien vanhempi/huoltaja täyttää kyselylomakkeen enintään 5 kertaa. Kyselyssä kysytään, mitä osallistujat ja/tai heidän vanhempansa/huoltajansa ajattelevat laserhoidon tuloksista ja mitä mieltä he ovat OCT:n käytöstä normaalihoidon lisäksi.

Strata C:n osallistujille (joille suoritetaan laser osana normaalia hoitoa ilman OCT:tä) tutkimusryhmä pyytää vanhemmalta/ja tai heiltä täydellisiä potilaan raportoimia tuloksia tutkimuksen aikana. Näiden kyselylomakkeiden tarkoituksena on kerätä merkityksellisiä potilaiden tuloksia validoiduilla PROMIS-mittauksilla, jotka liittyvät laserin tehokkuuteen heidän portviinitahroihinsa.

Kun osallistuja ilmoittautuu Strata C:hen ja/tai osallistujan ensimmäisen laserin jälkeen, vanhemmat/huoltajat täyttävät vanhempien tyytyväisyyskyselyn. Tutkijat suorittavat laserseuranta-arvioinnin ja visuaalisen analogisen asteikon osallistujan käyntien aikana määrittääkseen portviinin tahran paranemisen lähtötasosta. Kuuden kuukauden välein potilas tai vanhempi/huoltaja täyttää potilaan/perheen laserarviointilomakkeen.